鼠源抗人IgE单克隆抗体的制备方法及其应用技术

本发明专利技术提供鼠源抗人IgE单克隆抗体的制备方法及其应用，该方法包括应用原核表达系统表达的含IgE Fcε3‑4蛋白片段的融合蛋白免疫小鼠，随后通过杂交瘤方法制备鼠源抗人IgE单克隆抗体；其中，所述IgE Fcε3‑4蛋白片段为由SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列在所述原核表达系统中表达的蛋白。所以方法与现有技术中所用的IgE Fcε2‑4或IgE Fcε3‑4的蛋白相比较，降低了抗原蛋白的纯化难度，从而提高了效率；原核表达抗原降低了抗体制备的成本。

Preparation and application of mouse anti human IgE monoclonal antibody

Preparation and application of the invention provides a method of mouse anti human IgE monoclonal antibody, the method includes using prokaryotic expression system containing IgE Fc epsilon 3 4 protein fragment fusion protein in mice, followed by hybridoma method preparation of mouse anti human IgE monoclonal antibody; among them, the IgE Fc epsilon 3 4 protein fragment by SEQ ID shown in the NO:1 nucleotide sequence in the expression system of the prokaryotic expression protein. So with the present technology in IgE Fc epsilon 2 4 or IgE Fc 3 epsilon 4 protein compared to reduce the difficulty of purification of the antigen proteins, thereby improving the efficiency; prokaryotic expression of antigen antibody preparation reduces the cost.

【技术实现步骤摘要】
鼠源抗人IgE单克隆抗体的制备方法及其应用
本专利技术涉及抗人IgE抗体
，具体涉及一种鼠源抗人IgE单克隆抗体的制备方法及其应用。
技术介绍
近年来随着社会工业化的进程，环境污染越来越严重。与此同时，IgE介导的过敏性疾病的发病率也迅速增长，严重影响了人类的生存质量。据报道，约占世界人口的40％的人群处于超敏状态，世界卫生组织已将这类疾病列为21世纪重点防治的疾病之一。IgE最早在1968年由世界卫生组织免疫球蛋白参考实验室正式提出，属于人类第五种免疫球蛋白。IgE是由B细胞分泌，并通过与嗜酸性粒细胞和肥大细胞表面的Fc受体结合，导致其脱颗粒释放炎性介质，从而引起过敏症状。IgE敏感可导致典型的过敏性疾病：哮喘、鼻炎、食物过敏、药物过敏和过敏性休克等。目前国内检测人血清中IgE的产品较少，而且特异性较低，可重复性差。加之，国内科研所用检测人IgE及相关细胞免疫学实验所用的试剂大多购自国外，而且价格也昂贵，从而在某种程度上限制了该蛋白相关实验的进展。因此，需要一种特异性更强、重复性更高、生产成本更低的可检侧IgE的试剂。生产检测抗IgE单克隆抗体的方法通常有杂交瘤技术、噬菌体抗本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鼠源抗人IgE单克隆抗体的制备方法，所述方法包括应用原核表达系统表达的含IgE Fcε3‑4蛋白片段的融合蛋白免疫小鼠，随后通过杂交瘤方法制备鼠源抗人IgE单克隆抗体；其中，所述IgE Fcε3‑4蛋白片段为由SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列在所述原核表达系统中表达的蛋白。

【技术特征摘要】
1.一种鼠源抗人IgE单克隆抗体的制备方法，所述方法包括应用原核表达系统表达的含IgEFcε3-4蛋白片段的融合蛋白免疫小鼠，随后通过杂交瘤方法制备鼠源抗人IgE单克隆抗体；其中，所述IgEFcε3-4蛋白片段为由SEQIDNO:1所示的核苷酸序列在所述原核表达系统中表达的蛋白。2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述含IgEFcε3-4蛋白片段的融合蛋白还含有载体pET32(+)表达的蛋白。3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述由SEQIDNO:1所示的核苷酸序列是以SEQIDNO:6及SEQIDNO:7为引物，及以CRL8033cDNA为模板扩增所得。4.一种鼠源抗人IgE单克隆抗体或来源于该单克隆抗体的能够特异性结合人IgE的生物活性片段，其中，该抗体的轻链可变区氨基酸序列如SEQIDNO:4所示，或该序列经替换、缺失或添加一个或几个氨基酸形成的具有同等功能的氨基酸序列；和/或该抗体的重链可变区氨基酸序列如SEQIDNO:5所示，或该序列经替换、缺失或添加一个或几个氨基酸形成的具有同等功能的氨基酸序列。5.编码权利要求4所述的鼠源抗人IgE单克隆抗体或来源于该单克隆抗体的能够特异性结合人IgE的生物活性片段的基因...

【专利技术属性】
技术研发人员：万晓春，崔璐璐，毕嘉成，鄢德洪，
申请(专利权)人：深圳先进技术研究院，
类型：发明
国别省市：广东,44