一种花卉苗木的组培快繁方法技术

本发明专利技术涉及农业生物技术领域，具体涉及一种花卉苗木的组培快繁方法，以茎尖为外植体，经过外植体消毒、芽诱导培养、增殖培养、生根壮苗培养、炼苗及移栽等步骤，其中外植体消毒所使用的消毒剂主要由大蒜、茶叶、茜草、艾叶、芦荟、苦豆子、茅岩莓、地榆、防风、淀粉糊、树胶、蓖麻油、桧柏油、皂角粉及茶籽饼粉等原料制成。该花卉苗木的组培快繁方法抑菌效率高，对外植体组织无伤害，无污染，有效地提高了花卉苗木的芽诱导率、生根率及成活率，促进花卉苗木的繁育生产。

A method for tissue culture and rapid propagation of flowers and seedlings

The present invention relates to the field of agricultural biotechnology, method of tissue culture and rapid propagation and particularly relates to a flower seedlings, with shoot tip as explants, after sterilization of explants, bud induction culture, proliferation, rooting, seedling and transplanting steps, which used explant disinfection disinfectant mainly composed of garlic, tea, madder, mugwort leaf, aloe, Sophora alopecuroides, Sanguisorba officinalis, wind, and Mao Yan strawberry paste, starch gum, castor oil, Cypress oil, saponin powder and tea seed cake powder and other raw materials. The method of tissue culture and rapid propagation of flower and seedling has high antibacterial efficiency, no harm to external tissue tissue, no pollution, effectively improves the bud induction rate, rooting rate and survival rate of flowers and seedlings, and promotes the breeding and production of flowers and seedlings.

【技术实现步骤摘要】
一种花卉苗木的组培快繁方法
本专利技术涉及农业生物
，具体涉及一种花卉苗木的组培快繁方法。
技术介绍
由于受到环境、季节、土壤及物种本身等诸多因素的限制，花卉苗木的繁育也因此受到限制，要想实现其规模化产业化生产是非常困难的，且难以繁育出优质的品种。目前市场上大部分都是采用常规的扦插、压条或嫁接等无性繁殖方法进行花卉苗木的繁育，但是这些方法繁育的速度慢，繁育出的品种品质不佳，不能满足日益增长的市场需求。植物组织培养是根据植物细胞具有全能性的理论，利用植物体离体的器官(如根、茎、叶、茎尖等)、组织(如形成层、表皮、皮层、髓部细胞、胚乳等)或细胞(如大孢子、小孢子、体细胞等)以及原生质体，在无菌和适宜的人工培养基及温度等人工条件下，能诱导出愈伤组织、不定芽、不定根，最后形成完整的植株的学科。植物组织培养已广泛应用于农业生产中的多个领域，已经在种苗脱毒生产、种苗快速繁殖、植物新资源的规模化应用、植物新品种选育等方面给现代农业产生了深远的影响，是农业生物技术在现代农业应用上的典范，是现代种业的重要组成部分。目前，我国植物组培苗已经在花卉、果树、阴生植物、药用植物等取得了大面积的推广与应用。而植物组织培养技术受到培养基养分、细菌、支持物等因素的影响，使得花卉苗木的繁育的生产受到限制，这时需要采取相应的措施改善这些问题，例如对外植体进行消毒以减少细菌对培养基的污染，目前通常使用酒精、次氯酸钙、升汞进行外植体消毒，虽然能消灭外植体表面的细菌，但会对外植体的组织有一定的伤害，且升汞有毒，难清洗，污染环境；因此，优化植物组织培养技术是花卉苗木的繁育的关键所在。专利技术内容本专利技术的专利技术目的在于：针对上述存在的问题，提供一种花卉苗木的组培快繁方法，抑菌效率高，对外植体组织无伤害，无污染，有效地提高了花卉苗木的芽诱导率、生根率及成活率，促进花卉苗木的繁育生产。为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：一种花卉苗木的组培快繁方法，包括以下步骤：(1)选用生长健壮无病害的当年萌发的茎尖作外植体，刷洗干净后，用洗涤剂溶液浸泡5-7min后用软毛刷刷洗外植体表面，将其表面的尘土和部分菌体去除，然后用自来水冲洗干净后置于体积浓度为70-75％酒精中浸泡5-10s，用无菌水冲洗2-3次后再放入装有消毒剂的容器内浸泡50-60min，浸泡结束后用无菌水冲洗2-3次，最后用无菌滤纸擦干表面的水珠，备用；所述消毒剂主要由以下原料制成：大蒜、茶叶、茜草、艾叶、芦荟、苦豆子、茅岩莓、地榆、防风、淀粉糊、树胶、蓖麻油、桧柏油、皂角粉及茶籽饼粉；(2)先将支持物添加到培养瓶中，再加入灭菌后的芽诱导培养基或增殖培养基或生根壮苗培养基，然后将消毒后的外植体接种到培养基中，先后依次进行芽诱导培养、增殖培养及生根壮苗培养，最后得到生根苗木，备用；(3)挑选生长良好且健壮的生根苗木进行炼苗后移栽到大田中。优选地，步骤(1)中，所述消毒剂主要由以下重量份原料制成：大蒜20-30份、茶叶25-35份、茜草15-20份、艾叶20-30份、芦荟17-20份、苦豆子17-20份、茅岩莓15-17份、地榆15-17份、防风17-20份、淀粉糊5-7份、树胶4-6份、蓖麻油2-3份、桧柏油2-3份、皂角粉3-5份及茶籽饼粉3-5份。优选地，所述消毒剂按照上述配比制备，具体包括以下步骤：(a)将新鲜的大蒜、茶叶、茜草、艾叶、芦荟、苦豆子、茅岩莓、地榆及防风除杂并清洗后，放入生理盐水中浸泡8-10min，再用无菌水漂洗，备用；(b)将处理好的大蒜、茶叶、茜草、艾叶、芦荟、苦豆子、茅岩莓、地榆及防风切碎，再按照1:30-40的比例与无菌水混合煎煮30-40min，用纱布过滤除渣，得到过滤液，备用；(c)将淀粉糊、树胶、皂角粉及茶籽饼粉加入温水中溶解混合均匀后，倒入步骤(2)的过滤液中，再加入蓖麻油及桧柏油，搅拌混合均匀，得到所述消毒剂。优选地，步骤(2)中所述支持物采用了无菌滤纸桥及干水苔相结合，即将无菌滤纸桥及干水苔浸泡于去离子水中使其膨胀制得。优选地，步骤(2)中所述支持物的添加量为培养瓶体积的1/5-2/5，其中无菌滤纸桥及干水苔的体积比为1：4-5。优选地，步骤(2)中所述芽诱导培养基或增殖培养基或生根壮苗培养基是在MS基本培养基中添加了蛋白胨、水解酪蛋白、葡萄糖、香蕉汁、马铃薯汁、亚硝酸钠、羟胺、二氢玉米素、异戊烯基腺嘌呤、多氯苯甲酸、尿素、萘氧乙酸、苯酚钠及活性炭。优选地，步骤(2)中所述生根壮苗培养基还充入二氧化碳。优选地，步骤(2)中各培养阶段均采用冷阴极荧光灯提供光照，温度均为23-27℃，相对湿度均为65-75％，pH均为5.0-6.5，其中所述芽诱导培养基及增殖培养基的培养过程中光照强度均为1500-2000LUX，所述生根壮苗培养基的培养过程中光照强度为3000-3500LUX。综上所述，由于采用了上述技术方案，本专利技术的有益效果是：1、酒精具有较强的穿透力，使菌体蛋白质变性，杀菌效果好，同时它还具有较强的湿润作用，可排除材料上的空气，利于其他消毒剂的渗入。本专利技术的花卉苗木的组培快繁方法先用酒精浸泡外植体数秒，杀灭部分细菌，并排除材料上的空气后，再浸泡于消毒剂中消毒，提高消毒效果，减少外植体的伤害。本专利技术的消毒剂主要由大蒜、茶叶、茜草、艾叶、芦荟、苦豆子、茅岩莓、地榆、防风、淀粉糊、树胶、蓖麻油、桧柏油、皂角粉及茶籽饼粉等原料制成；其中，大蒜中含硫化合物，茶叶中含有生物碱、儿茶素等物质，茜草中含有茜草素，艾叶中含有芳香油，芦荟中含有芦荟素，苦豆子中含有有机酸、黄酮类及生物碱等物质，茅岩莓中含有黄酮，地榆中含有多种鞣质成分，防风中含有挥发油、甘露醇、苦味甙等物质，这些植物中所含的物质都具有一定的抗菌杀菌作用，且每种物质的抗菌范围均不相同，彼此之间相互配合，有效增加了消毒剂的抗菌杀菌范围；淀粉糊、树胶、蓖麻油及桧柏油均属于黏着剂，混入到植物提取液中，能将植物提取液黏附在外植体表面，提高黏着性能，皂角粉及茶籽饼粉属于润湿剂，有效降低植物提取液的表面张力，使外植体迅速润湿和延展，利于渗入外植体内部；这些物质制成的消毒剂能快速渗入外植体内外表面，有效杀灭外植体表面细菌，抑菌效率高，又不伤害外植体组织，且无环境污染，有效地提高了花卉苗木的芽诱导率、生根率及成活率，促进花卉苗木的繁育生产。2、本专利技术的花卉苗木的组培快繁方法采用滤纸桥和干水台作培养基支持物，减少了支持物对培养液的吸附，提高透气性，保证了外植体养分充足，利于外植体生长。3、本专利技术的花卉苗木的组培快繁方法的各培养基在MS基本培养基中添加了蛋白胨、水解酪蛋白、葡萄糖、香蕉汁、马铃薯汁、亚硝酸钠、羟胺、二氢玉米素、异戊烯基腺嘌呤、多氯苯甲酸、尿素、萘氧乙酸、苯酚钠及活性炭，为外植体提供了充足的碳源、氮源等养分，使外植体得以健康生长，且在生根壮苗培养基还充入二氧化碳，提供充足的光照条件，外植体能通过光合作用补充碳源，有效促进了外植体的快速生长。具体实施方式下面将对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。除非另有定义，本文所使用本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种花卉苗木的组培快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)选用生长健壮无病害的当年萌发的茎尖作外植体，刷洗干净后，用洗涤剂溶液浸泡5‑7min后用软毛刷刷洗外植体表面，将其表面的尘土和部分菌体去除，然后用自来水冲洗干净后置于体积浓度为70‑75％酒精中浸泡5‑10s，用无菌水冲洗2‑3次后再放入装有消毒剂的容器内浸泡50‑60min，浸泡结束后用无菌水冲洗2‑3次，最后用无菌滤纸擦干表面的水珠，备用；所述消毒剂主要由以下原料制成：大蒜、茶叶、茜草、艾叶、芦荟、苦豆子、茅岩莓、地榆、防风、淀粉糊、树胶、蓖麻油、桧柏油、皂角粉及茶籽饼粉；(2)先将支持物添加到培养瓶中，再加入灭菌后的芽诱导培养基或增殖培养基或生根壮苗培养基，然后将消毒后的外植体接种到培养基中，先后依次进行芽诱导培养、增殖培养及生根壮苗培养，最后得到生根苗木，备用；(3)挑选生长良好且健壮的生根苗木进行炼苗后移栽到大田中。

【技术特征摘要】
1.一种花卉苗木的组培快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)选用生长健壮无病害的当年萌发的茎尖作外植体，刷洗干净后，用洗涤剂溶液浸泡5-7min后用软毛刷刷洗外植体表面，将其表面的尘土和部分菌体去除，然后用自来水冲洗干净后置于体积浓度为70-75％酒精中浸泡5-10s，用无菌水冲洗2-3次后再放入装有消毒剂的容器内浸泡50-60min，浸泡结束后用无菌水冲洗2-3次，最后用无菌滤纸擦干表面的水珠，备用；所述消毒剂主要由以下原料制成：大蒜、茶叶、茜草、艾叶、芦荟、苦豆子、茅岩莓、地榆、防风、淀粉糊、树胶、蓖麻油、桧柏油、皂角粉及茶籽饼粉；(2)先将支持物添加到培养瓶中，再加入灭菌后的芽诱导培养基或增殖培养基或生根壮苗培养基，然后将消毒后的外植体接种到培养基中，先后依次进行芽诱导培养、增殖培养及生根壮苗培养，最后得到生根苗木，备用；(3)挑选生长良好且健壮的生根苗木进行炼苗后移栽到大田中。2.根据权利要求1所述的花卉苗木的组培快繁方法，其特征在于，步骤(1)中，所述消毒剂主要由以下重量份原料制成：大蒜20-30份、茶叶25-35份、茜草15-20份、艾叶20-30份、芦荟17-20份、苦豆子17-20份、茅岩莓15-17份、地榆15-17份、防风17-20份、淀粉糊5-7份、树胶4-6份、蓖麻油2-3份、桧柏油2-3份、皂角粉3-5份及茶籽饼粉3-5份。3.根据权利要求2所述的花卉苗木的组培快繁方法，其特征在于，所述消毒剂按照上述配比制备，具体包括以下步骤：(a)将新鲜的大蒜、茶叶、茜草、艾叶、芦荟、苦豆子、茅岩莓、地榆及防风除杂并清洗后，放入生理盐水中浸泡8-10mi...

【专利技术属性】
技术研发人员：王奕杰，胡秀练，黎敬辉，
申请(专利权)人：广西现代园林绿化工程种苗有限公司，
类型：发明
国别省市：广西,45