A protein with immunoglobulin folding structure and can be formed by the subunit structure of fusion protein composed of monomeric protein obtained a multimeric protein preparation method, the preparation method comprises the following steps: (A), a preparation of insoluble particles in the form of microbial cell protein in the protein of the monomer protein; step (B), using aqueous solution containing lauroyl solubilization step L Glu (A) monomer protein preparation; step (C), steps in a buffer containing arginine hydrochloride (B) in dilute solution was reduced, the concentration of L Glu lauroyl; and step (D), using gel filtration chromatography step (C) solution obtained by solvent replacement into buffer.
【技术实现步骤摘要】
多聚体蛋白的制备方法本申请是申请号为201280030917.5、申请日为2012年6月25日、专利技术名称为“由使具有免疫球蛋白折叠结构的蛋白和能够形成亚单元结构的蛋白融合而得到的单体蛋白组成的多聚体蛋白的制备方法”的中国专利申请的分案申请。
本专利技术涉及由使具有免疫球蛋白折叠结构的蛋白和能够形成亚单元结构的蛋白融合而得到的单体蛋白组成的多聚体蛋白的制备方法。
技术介绍
治疗用抗体由于其疗效高和副作用风险小而取得了巨大成功,但因其制造成本高而引起的高药价则成为课题。该抗体的疗效局限于白血病或自身免疫疾病等较窄的疾病范围,在药物的组织转移性受到限制的固体癌症等中不太有效,这也成为课题。自从1988年可以在大肠杆菌内制备抗体片段(非专利文献1~3)以来,组织转移性高、低分子化的修饰抗体(抗体片段)的开发持续进行。为了获得更高的抗癌效果,有多种使抗体片段与抗癌药、毒素、放射性同位素或前体药物活化酶等融合而得到的抗体融合蛋白也被提案。但是,当天然抗体所具有的二价结合性是发挥其与靶抗原的高亲和性和优异的体内动力学的基础时,人工制作的一价抗体融合蛋白与靶抗原的结合性不及天 ...
【技术保护点】
多聚体蛋白的制备方法,所述多聚体蛋白是由使具有免疫球蛋白折叠结构的蛋白和能够形成亚单元结构的蛋白或其功能性片段融合而得到的单体蛋白组成的,该制备方法包括下述步骤:步骤(A),准备在微生物的菌体内呈不溶性颗粒形态的蛋白,该蛋白为使具有免疫球蛋白折叠结构的蛋白与能够形成亚单元结构的其他蛋白融合而得到的单体蛋白;步骤(B),利用含有月桂酰谷氨酸或其盐的水溶液增溶步骤(A)中准备的单体蛋白;步骤(C),在含有精氨酸或精氨酸衍生物的缓冲液中稀释步骤(B)中得到的溶液,降低月桂酰谷氨酸或其盐的浓度;以及步骤(D),利用选自下述(d1)~(d4)的方法,将步骤(C)中得到的溶液的溶剂置换 ...
【技术特征摘要】
2011.06.23 JP 2011-1398371.多聚体蛋白的制备方法,所述多聚体蛋白是由使具有免疫球蛋白折叠结构的蛋白和能够形成亚单元结构的蛋白或其功能性片段融合而得到的单体蛋白组成的,该制备方法包括下述步骤:步骤(A),准备在微生物的菌体内呈不溶性颗粒形态的蛋白,该蛋白为使具有免疫球蛋白折叠结构的蛋白与能够形成亚单元结构的其他蛋白融合而得到的单体蛋白;步骤(B),利用含有月桂酰谷氨酸或其盐的水溶液增溶步骤(A)中准备的单体蛋白;步骤(C),在含有精氨酸或精氨酸衍生物的缓冲液中稀释步骤(B)中得到的溶液,降低月桂酰谷氨酸或其盐的浓度;以及步骤(D),利用选自下述(d1)~(d4)的方法,将步...
【专利技术属性】
技术研发人员:江岛大辅,佐藤春奈,津本浩平,伊达雅代,
申请(专利权)人:味之素株式会社,
类型:发明
国别省市:日本,JP
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