一种利用终止子调控酿酒酵母基因表达强度的方法技术

本申请公开了一种利用终止子调控酿酒酵母基因表达强度的方法，属于生物工程领域。首先构建含有启动子和报告基因的终止子验证载体，通过生物信息学分析酿酒酵母结构基因下游的3＇‑UTR终止子序列信息，扩增后与终止子验证载体连接形成终止子库；通过替换或改变基因表达盒中的终止子，可以实现从转录和翻译水平调控目标基因或途径的表达强度，为酵母代谢途径优化提供了高效的精细调控手段，有利于外源基因或途径在酵母细胞中的高效和平衡表达。

A method for controlling gene expression intensity of Saccharomyces cerevisiae using Terminator

The present invention discloses a method for controlling the expression intensity of Saccharomyces cerevisiae gene by terminator, belonging to the field of bioengineering. The first construct containing the promoter and reporter gene terminator downstream verification. Through the analysis of Saccharomyces cerevisiae gene structure 3 'UTR terminator sequence information of bioinformatics, after amplification and terminator verification carrier connected to form a terminator library; through the replacement or change of gene expression in the box can be achieved from the transcription terminator and the translation level regulation target gene or pathway, provides efficient means to control the fine yeast metabolic pathway optimization, is conducive to the expression of exogenous genes or pathways in yeast cells with high efficiency and balance.

【技术实现步骤摘要】
一种利用终止子调控酿酒酵母基因表达强度的方法
本专利技术涉及一种利用终止子调控酵母基因表达强度方法，属于生物工程领域。
技术介绍
酿酒酵母作为传统工业微生物，能够以安全可靠的方式生产高值天然产物、生物燃料、化工产品和材料等，通过引入新的功能基因模块或新的合成途径已经能够在其中合成青蒿素前体青蒿酸、人参皂甙、丁醇衍生物等复杂化合物。然而，由于外源基因在酵母细胞内受转录调控、翻译后修饰、代谢网络协调等多层次的影响，限制了外源基因或途径在酵母细胞内的表达效果，造成代谢流不平衡等问题，最终限制了目标产品的生产浓度，外源基因和代谢途径的精细表达调控显得尤为重要。代谢途径调控作为代谢工程以及合成生物学的核心，可以在转录水平、翻译水平、蛋白质水平进行不同程度的调节，但能够应用于酿酒酵母的调控元件非常有限，目前最常用元件为启动子和转录因子两种，都是从基因表达的“输入”进行控制，很少从“输出”角度探索。终止子是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列，当RNA转录到终止子区域时，其自身形成发卡结构，发卡式的结构阻碍了RNA聚合酶的移动，导致RNA聚合酶从模板上脱落下来，转录终止，属于“输出”控制。现已本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用终止子调控酿酒酵母基因表达强度的方法，其特征在于：利用终止子替换或改变酵母“启动子+结构基因+终止子”基因表达盒中的“终止子”，实现从转录和翻译水平调控酿酒酵母中外源基因或途径的表达。

【技术特征摘要】
1.一种利用终止子调控酿酒酵母基因表达强度的方法，其特征在于：利用终止子替换或改变酵母“启动子+结构基因+终止子”基因表达盒中的“终止子”，实现从转录和翻译水平调控酿酒酵母中外源基因或途径的表达。2.如权利要求1所述的一种利用终止子调控酿酒酵母基因表达强度的方法，其特征在于：所述的替换或改变酵母基因表达盒中的“终止子”的终止子，其获得过程为：基于酿酒酵母基因组数据库，通过生物信息学分析扩增获得的酿酒酵母结构基因下游的3＇-UTR终止子序列，并经验证载体验证终止子活性后，得到活性合适的终止子。3.如权利要求1或2所述的一种利用终止子调控酿酒酵母基因表达强度的方法，其特征在于：所述的替换或改变基因表达盒中的“终止子”的终止子为CDC20t、HRR25t、FOB1t、HDA1t、DEP1t、PDA1t、SLD2t、HAP4t、NUT1t、LAT1t、GND1t、APP1t、BUD31t、OAC1t、APE2t、MIC60t、RBG2t、AAT1t、SIR2t、RAD53t、CDC42t、RAD54t、CDC25t、SAC6t、NAB2t、RTG2t、NDI1t、HMT1t、MDH1t、CIT2t、SSO2t、PGM2t、CIT1t、PFK1t、PUF3t、RPC40t、PDB1t、ATP5t、AAT2t、GUT2t、HST2t、MDH2t、GIP2t、ACP1t、BUD20t、BUD20t、GEP3t、YGK3t、SSB2t、IDH2t、MET5t、PYC2t、RVS167t、...

【专利技术属性】
技术研发人员：张根林，魏琳娜，王婷，
申请(专利权)人：石河子大学，
类型：发明
国别省市：新疆,65