肉豆蔻木脂素在制备肝保护药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种肉豆蔻木脂素在制备肝保护药物中的应用。肉豆蔻木脂素在小鼠硫代乙酰胺(TAA)诱导的急性肝损伤模型中显示出明显的肝保护作用，能显著降低急性肝损伤动物模型血浆中的天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平，抑制毒性物质对肝细胞膜的损伤，减轻肝细胞炎症，将其应用于保肝药物的研发能创造良好的经济效益和广泛的社会效益。

Application of nutmeg lignans in the preparation of liver protective drugs

The present invention discloses the application of nutmeg lignans in the preparation of liver protective drugs. Nutmeg lignan in mice with thioacetamide (TAA) showed obvious protective effect on liver induced acute liver injury model, can significantly reduce the acute liver injury animal model of plasma aspartate amino transferase in (AST), alanine aminotransferase (ALT) levels, inhibit the damage of toxic substances on liver cells film, reduce the inflammation of the liver, its application in the research of liver protective drugs can create a good economic benefit and society benefit.

【技术实现步骤摘要】
肉豆蔻木脂素在制备肝保护药物中的应用
：本专利技术属于肝损伤药物
，具体地说，涉及一种用肉豆蔻木脂素作为治疗毒性化学物引起的急性肝损伤疾病的药物的应用。
技术介绍
：化学性肝损伤是指是由化学性肝毒性物质所造成的肝损伤。这些化学物质包括酒精、环境中的化学毒物及某些药物。肝脏作为人体最大、最重要的解毒器官，对来自体外和机体自身代谢产生的毒性物质有强大的防御和解毒功能。另外，由于肝脏具有肝动脉和肝静脉双重血液供应，化学物质可通过胃肠道门静脉或体循环进入肝脏进行转化，因此肝脏非常容易受到化学物毒性物质的损害。在现代工业环境下，人们越来越容易接触毒性化学物质，导致肝脏受到这些毒性物质的化学侵害。目前临床上应用于治疗肝损伤的药物主要为合成药物，但是长期使用合成药物对机体的副作用也是不容忽视的。因此，研发安全的治疗化学性肝损伤药物迫在眉睫。中药肉豆蔻为肉豆蔻科植物肉豆蔻的干燥种仁，中医用于治疗腹泻、呕吐、风湿痛、调节肠胃等，也常用于治疗肝脏疾病的配伍用药。肉豆蔻中的主要活性成分为木脂素类化合物，其中肉豆蔻木脂素是主要的成分。体内外研究表明，肉豆蔻木脂素具有清除自由基、抗炎、抗癌、抗菌等活性，具有广阔的开发前景。但是将肉豆蔻木脂素用于肝损伤疾病的应用，至今未见报道。硫代乙酰胺(TAA)作为一种毒性化学物质，具有直接肝毒性，摄入后可经肝细胞内的细胞色素P450混合功能氧化酶代谢为氧化产物，与细胞内生物大分子结合，产生活性氧簇，破坏肝细胞膜，形成肠源性内毒素，导致大面积肝细胞坏死，使天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)明显升高。TAA常用于模拟化学性急性肝损伤，肝纤维化和肝性脑病模型，因此，本专利技术采用TAA模拟化学性急性肝损伤。
技术实现思路
：本专利技术的目的在于克服现有技术的局限，对肉豆蔻木脂素针对化学性肝损伤疾病的治疗作用效果进行研究，明确肉豆蔻木脂素对化学性肝损伤疾病的治疗作用。同时，为传统的肉豆蔻科植物肉豆蔻提取物肉豆蔻木脂素拓展新的应用领域，本专利技术将肉豆蔻木脂素应用于化学性肝损伤疾病的治疗，具有明显效果。本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的：肉豆蔻木脂素在制备肝保护药物中的应用。肉豆蔻木脂素在制备治疗急性肝损伤的药物中的应用。肉豆蔻木脂素在制备治疗化学性急性肝损伤疾病的药物中的应用。肉豆蔻木脂素在制备治疗由接触毒性化学物质引起的化学性肝损伤疾病的药物中的应用。如所述的应用，其中所述的治疗化学性肝损伤疾病的药物的给药方式为口服，对应相应患者的体重，其用量为20mg/kg·d，使用对象为化学性肝损伤疾病患者。所述肉豆蔻木脂素提取于肉豆蔻科肉豆蔻属植物肉豆蔻的干燥种仁，生产厂家为南昌贝塔生物科技有限公司，结构式为：使用要求：给药方式为口服，对应相应患者的体重，其用量为20mg/kg·d。使用对象：化学性肝损伤疾病患者。与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：本专利技术通过TAA诱导的小鼠急性肝损伤模型，研究并证实了肉豆蔻木脂素可用于治疗急性肝损伤，保持肝细胞形态的完整性，能显著降低血浆中ALT和AST活性，并显著降低由TAA引起的肝损伤、肝脏坏死，显著抑制由急性肝损伤引起的炎症，对化学性急性肝损伤有显著的治疗作用。附图说明：图1：空白组小鼠肝脏组织切片图；图2：TAA模型小鼠肝脏病理切片图；图3：肉豆蔻木脂素治疗TAA诱导的急性肝损伤病理切片图；图4：肉豆蔻木脂素对炎症因子相关基因表达的影响。具体实施方式：下面结合附图，用本专利技术的具体实施例来进一步说明本专利技术的实质性内容，应理解，以下实施例仅用于说明本专利技术，但并不以此来限定本专利技术的保护范围。实施例1：肉豆蔻木脂素提取于肉豆蔻科肉豆蔻属植物肉豆蔻的干燥种仁，生产厂家为南昌贝塔生物科技有限公司(批号20049‐201507)，结构式为：肉豆蔻木脂素对TAA诱导的小鼠急性肝损伤的治疗作用：动物：C57BL/6小鼠，SPF级，37～40日龄，体重20～22g，雄性；合格证号均为：SCXK(湘)2013‐0004，购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司。药品与试剂：肉豆蔻木脂素，无色无定型结晶粉末，南昌贝塔生物科技有限公司，批号20049‐201507。天冬氨酸氨基转移酶(AST)试剂盒(货号C010‐3，批号20161031)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)试剂盒(货号C009‐3，批号20161031)均为南京建成生物工程研究所生产。硫代乙酰胺(TAA，货号C1290‐25G，批号1002213299)、羧甲基纤维素钠(货号419311‐100G，批号1001845888)均购自Sigma公司。。主要仪器：精密电子天平，Sartorius公司；全自动酶标仪，BioTekInstruments公司；水浴恒温振荡器SHA‐C，常州中诚仪器制造有限公司；冷冻离心机，Eppendorf公司。实验方法：实验分组：实验共需15只雄性C57BL/6小鼠，分为三组：空白组(n＝5)；造模组(n＝5)；治疗组(肉豆蔻木脂素+TAA，n＝5)。药物溶解及剂量：肉豆蔻木脂素采用0.5％羧甲基纤维素钠混匀，灌胃给药，给药剂量200mg/kg·d，给药容积为10μL/g·d。TAA采用生理盐水溶解，腹腔注射给药，给药剂量250mg/kg，给药容积为5μL/g。实验流程：治疗组肉豆蔻木脂素采用灌胃给药，给药剂量为200mg/kg·d，连续给药五天；空白组及造模组喂以等剂量0.5％羧甲基纤维素钠(空白)连续给药五天。在实验第五天，造模组及治疗组在空白和肉豆蔻木脂素分别处理1h后进行TAA腹腔注射造模注射量为250mg/kg，空白组腹腔注射生理盐水。TAA处理24h后，小鼠CO2麻醉后摘眼球取血，脱颈处死后取肝脏。血浆样品于冰上放置1‐2h后，在4℃下4000g离心5min，取上清血浆样品，测定血浆生化指标AST、ALT、及ALP水平。肝脏取左叶浸与福尔马林，用于做组织切片，剩余部分立即冻存与‐80℃冰箱，用于生化检测。实验结果：表1结果显示，空白组、模型组及治疗组3组小鼠体重均匀，无显著差异。但模型组小鼠处死时肝重(1.74g)显著高于空白组(1.30g)，且模型组小鼠肝重/体重(7.00％)显著高于空白组(5.34％)，表明TAA模型组肝损伤严重。治疗组小鼠处死时肝重(1.45g)显著低于模型组(1.74g)，与空白组间无显著性差异；且治疗组小鼠肝重/体重(6.20％)显著低于模型组(7.00％)，表明肉豆蔻木脂素对TAA诱导的急性肝损伤模型有显著的治疗作用，可显著降低治疗组肝重、及肝重/体重。表1肉豆蔻木脂素治疗小鼠TAA诱导的急性肝损伤模型体重及肝重变化#，模型组与空白组相比；*，治疗组与模型组相比。表2结果显示，模型组血浆中AST、ALT水平均显著高于空白组(P<0.05)，表明模型组肝部损伤严重。治疗组AST水平较模型组显著降低(P<0.05)，ALT水平也有所下降，表明肉豆蔻木脂素对TAA诱导的急性肝病的明显的治疗作用，可降低治疗组AST和ALT水平。表2肉豆蔻木脂素治疗小鼠TAA诱导的急性肝损伤模型血浆AST、ALT变化#，模型组与空白组相比；*，治疗组与模型组相比。本文档来自技高网...

【技术保护点】
肉豆蔻木脂素在制备肝保护药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.肉豆蔻木脂素在制备肝保护药物中的应用。2.肉豆蔻木脂素在制备治疗急性肝损伤的药物中的应用。3.肉豆蔻木脂素在制备治疗化学性急性肝损伤疾病的药物中的应用。4.肉豆蔻木脂素在制备治疗由接触毒性化学物质引起的化学性肝损伤疾病的药物中的应用。5.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述的肉豆蔻木脂素药物的给...

【专利技术属性】
技术研发人员：李飞，杨晓男，吕倩倩，
申请(专利权)人：中国科学院昆明植物研究所，
类型：发明
国别省市：云南,53