本发明专利技术公开了丹酚酸A作为脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp‑PLA2)抑制剂的新用途。通过高脂饲喂联合VD3注射和球囊损伤术建立大鼠动脉粥样硬化(AS)模型，研究丹酚酸A对AS大鼠血清Lp‑PLA2含量和活性的影响，对AS大鼠主动脉Lp‑PLA2mRNA和蛋白表达的影响。结果显示，丹酚酸A可降低AS大鼠血清Lp‑PLA2含量及活性，下调主动脉Lp‑PLA2蛋白的表达，从而发挥抗AS作用。同时建立人胰腺癌BxPC3裸鼠皮下移植瘤模型，研究两种给药途径SAA对荷瘤裸鼠Lp‑PLA2、cPLA2、sPLA2表达的影响，结果发现，SAA可显著降低荷瘤裸鼠肿瘤组织、瘤旁组织及血清中Lp‑PLA2、cPLA2、sPLA2的含量。本项发明专利技术为丹酚酸A开拓了新的用途，预期丹酚酸A可以作为Lp‑PLA2抑制剂用于多种医药用途。
New use of salvianolic acid A as a lipoprotein associated phospholipase A2 inhibitor
The present invention discloses salvianolic acid A as lipoprotein associated phospholipase A2 (Lp PLA2) new use of inhibitors. The establishment of atherosclerosis in rats by high-fat feeding combined with VD3 injection and balloon angioplasty (AS) model. The effects of salvianolic acid A on serum Lp content and activity of PLA2 in AS rats, the expression of Lp protein and PLA2mRNA aorta in AS rats. The results showed that salvianolic acid A can reduce PLA2 content and the activity of serum Lp of AS rats, Lp expression of aorta PLA2 protein, which play the role of anti AS. At the same time to establish the model of subcutaneous human pancreatic cancer BxPC3 in nude mice and study of two routes of administration of SAA on Lp in nude mice PLA2, cPLA2 and sPLA2 were studied. The results showed that the content of SAA can significantly reduce the tumor tissue, peritumoral tissue and serum Lp, cPLA2, sPLA2, PLA2. This invention opens up new uses for salvianolic acid A and salvianolic acid A can be expected as Lp PLA2 inhibitors for a variety of medical uses.
【技术实现步骤摘要】
丹酚酸A作为脂蛋白相关磷脂酶A2抑制剂的新用途
本专利技术属于医药
，具体是丹酚酸A作为脂蛋白相关磷脂酶A2抑制剂的新用途。
技术介绍
脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)是一种Ca2+不依赖型的分泌磷脂酶A2，血浆Lp-PLA2与脂蛋白颗粒结合，其中约80％与低密度脂蛋白(LDL)结合，尤其是小颗粒LDL，仅10％与高密度脂蛋白(HDL)结合。Lp-PLA2与分泌型磷脂酶A2(sPLA2)、胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)共同组成磷脂酶A2(PhospholipaseA2,PLA2)家族。研究表明，cPLA2、sPLA2和Lp-PLA2在促进炎症反应和引起动脉粥样硬化(AS)中起着重要的作用，与心血管事件的发生有密切关系。其中，Lp-PLA2作为一种新的炎症标志物，是当前研究的热点。研究显示，Lp-PLA2与AS、肿瘤等严重威胁人类健康的重大疾病密切相关。Lp-PLA2能水解氧化LDL，产生溶血卵磷脂(LPC)和氧化非酯化脂肪酸(oxNEFA)两种前体炎性因子，促进AS发生。大量报道表明Lp-PLA2抑制剂具有抗AS作用，可用于降低冠心病患者的心血管事件，明显延缓AS发展，减少损伤血管巨噬细胞含量和缓解动物模型的斑块炎症。但是已有的Lp-PLA2抑制剂未能降低心脏病发作和中风的整体风险，而且副作用多。这也促使人们寻求新的有效Lp-PLA2抑制剂。丹酚酸A(SAA)是唇形科植物丹参的干燥根及根茎中所含的一种水溶性酚酸类化合物。近年来研究表明，SAA在心脑血管疾病保护、抗肝损伤、糖尿病及并发症、抗肿瘤等方面有显著活性。但是丹酚酸A作为脂蛋白相关磷脂酶A2抑制剂的研究未见报道。
技术实现思路
为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种丹酚酸A作为脂蛋白相关磷脂酶A2抑制剂的新用途。本专利技术的另一个目的是提供了丹酚酸A作为脂蛋白相关磷脂酶A2抑制剂在制备防治动脉粥样硬化药物中的用途。本专利技术还提供了丹酚酸A作为脂蛋白相关磷脂酶A2抑制剂在制备防治心脑血管疾病药物中的用途。本专利技术还提供了丹酚酸A作为脂蛋白相关磷脂酶A2抑制剂在制备防治糖尿病及并发症药物中的用途。本专利技术还提供了丹酚酸A作为脂蛋白相关磷脂酶A2抑制剂在制备抗肿瘤药物中的用途。所述的用途，其中丹酚酸A与药学上可接受的载体组成临床可以接受的制剂。所述载体包括药学领域的常规稀释剂，赋形剂，填充剂，粘合剂，湿润剂，崩解剂，吸收促进剂，表面活性剂，吸附载体，润滑剂等，必要时还可以加入香味剂，甜味剂等。本专利技术药物可以制成片剂，粉剂，粒剂，胶囊，口服液及注射用药等多种形式，上述各剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。本专利技术通过高脂饲喂联合VD3注射和球囊损伤术建立大鼠AS模型，研究丹酚酸A对AS大鼠血清Lp-PLA2含量和活性的影响，对AS大鼠主动脉Lp-PLA2mRNA和蛋白表达的影响。结果显示，丹酚酸A可降低AS大鼠血清Lp-PLA2含量及活性，下调主动脉Lp-PLA2蛋白的表达，从而发挥抗AS作用。通过建立人胰腺癌BxPC3裸鼠皮下移植瘤模型，通过瘤内注射和静脉注射两种给药途径给予2mg/kgSAA，研究SAA对荷瘤裸鼠Lp-PLA2、cPLA2、sPLA2表达的影响，结果发现，SAA可显著降低荷瘤裸鼠肿瘤组织、瘤旁组织及血清中Lp-PLA2、cPLA2、sPLA2的含量，可显著减小肿瘤体积。通过建立ZDF大鼠模型，结果显示丹酚酸A可显著降低ZDF大鼠血清中Lp-PLA2含量，由此可见，丹酚酸A在作为脂蛋白相关磷脂酶A2抑制剂以及防治动脉粥样硬化、防治心脑血管疾病、抗肿瘤、防治糖尿病及并发症中具有广阔的应用前景。附图说明图1为丹酚酸A对AS大鼠血清中Lp-PLA2含量的影响。其中，与正常组比较，##P<0.01；与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01。图2为丹酚酸A对AS大鼠主动脉Lp-PLA2mRNA表达的影响。图3为丹酚酸A对AS大鼠主动脉Lp-PLA2蛋白表达水平的影响。其中，与正常组比较，##P<0.01；与模型组比较，*P<0.05。图4为丹酚酸A对人胰腺癌BxPC3移植瘤裸鼠Lp-PLA2、cPLA2、sPLA2含量的影响。其中，SAA-1组为瘤内注射2mg/kgSAA，SAA-2组为尾静脉注射给予2mg/kgSAA；与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。图5为丹酚酸A对人胰腺癌BxPC3裸鼠移植瘤生长的抑制作用。图6为丹酚酸A对ZDF大鼠组织中Lp-PLA2mRNA表达的影响。图7为丹酚酸A对ZDF大鼠组织中Lp-PLA2蛋白表达的影响。具体实施方式实施例1：丹酚酸A对AS大鼠血清中Lp-PLA2含量的影响材料：丹酚酸A、维生素D3注射液、戊巴比妥钠、大鼠Lp-PLA2ELISA检测试剂盒、血小板活化因子乙酰水解酶分析试剂盒。实验动物：SPF级雄性SD大鼠，6～8周龄，体重220～250g。(1)实验方法1.模型建立和分组给药1.1模型建立雄性SD大鼠适应性饲养1周后，用于模型制备，高脂饲喂(胆固醇1％、猪油10％、蛋黄粉10％、3号胆盐0.5％、基础饲料78.5％)，同时腹腔注射40万IU/kg的VD3。VD3注射2周后，参照文献行主动脉球囊损伤术。大鼠用3％戊巴比妥钠(45mg/kg)腹腔麻醉，颈部剃毛，背部固定于鼠板。碘酒消毒颈部皮肤，无菌条件下作颈部正中开口，钝性分离大鼠左侧颈总动脉，结扎远心端，动脉夹夹闭近心端，暂时阻断左侧颈总动脉近心及远心端血流。在两端之间的动脉壁上约呈45°显微剪剪开一“V”形开口，向近心端仔细轻柔插入2.0×20mm直径球囊导管，松开动脉夹，使球囊进入近心端动脉，并向颈总动脉起始部推送8～10cm。手推式压力泵注入生理盐水，将球囊充盈，用4～6ATM加压球囊，然后，回抽球囊(以回来时有明显阻力感，又可以拉动球囊为宜)，当球囊回撤至切口处时球囊完全减压，然后再将球囊导管推送入主动脉，再次充盈球囊、回撤减压，使之与动脉内膜摩擦，造成内膜机械损伤。如此来回摩擦5次后，释放球囊气体，退出导管，结扎近心端颈总动脉。生理盐水冲洗伤口，并洒青霉素钠防感染，缝合肌肉和皮肤，碘酒再次消毒皮肤，将动物放入保温箱保暖护理待其苏醒。1.2分组给药次日，选择手术成功的大鼠，按体重随机分为2组，即模型组(Model)、SAA组(SAA)、每组6只。另6只作为正常组(Control)，共3组，每笼3只饲养。正常组和模型对照组大鼠均尾静脉注射5ml/kg生理盐水，SAA组每天尾静脉注射SAA1mg/kg，连续4周。试验期间，除正常组饲喂普通饲料外，其余各组高脂饲喂，并于给药前和给药2周时分别注射10万IU/kgVD3。1.3血清Lp-PLA2含量及活性测定1.3.1血清Lp-PLA2含量测定采用ELISA法测定大鼠血清中Lp-PLA2含量。操作步骤按照试剂盒说明进行。1.3.2血清Lp-PLA2活性测定按PAFAcetylhydrolaseAssayKit试剂盒说明书进行测定，根据说明书提供的公式计算各样本的Lp-PLA2活性。结果以每分钟每升血浆水解PAF的微摩尔数表示Lp-PLA2活性(μmol/min/L)。(2)实验结果：与正常组比，AS模型组大鼠血清Lp-PL本文档来自技高网...
【技术保护点】
丹酚酸A作为脂蛋白相关磷脂酶A2抑制剂的用途。
【技术特征摘要】
1.丹酚酸A作为脂蛋白相关磷脂酶A2抑制剂的用途。2.丹酚酸A作为脂蛋白相关磷脂酶A2抑制剂在制备防治动脉粥样硬化药物中的用途。3.丹酚酸A作为脂蛋白相关磷脂酶A2抑制剂在制备防治心脑血管疾病药物中的用途。4.丹酚酸A作为脂蛋白...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈民利，屠珏，马全鑫，杨钦钦，戎亦骊，陈小真，
申请(专利权)人：浙江中医药大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33
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