一种猪肺炎支原体疫苗效力测定方法技术

本发明专利技术公开了一种猪肺炎支原体疫苗效力测定方法，属于生物技术领域，本发明专利技术方法包括以下步骤：（1）免疫动物；（2）血清采集、稀释；（3）支原体‑血清结合、培养；（4）结果判定。本发明专利技术使用血清学方法替代动物试验，操作简单，技术要求低，重复性强，特异性好，该方法的建立避免了免疫攻毒保护法结果判定的主观性，避免散毒，同时也为制定、优化仔猪免疫程序提供了依据，适用于普遍推广。

Efficacy test method of Mycoplasma pneumoniae vaccine for swine

The invention discloses a method for the determination of Mycoplasma hyopneumoniae vaccine, belongs to the field of biotechnology, the method of the invention comprises the following steps: (1) immune animal; (2) serum collection and dilution; (3), combined with serum mycoplasma culture; (4) the results of judgment. The present invention using serological methods alternatives to animal testing, simple operation, low technical requirements, strong repeatability, good specificity, this method avoids the subjectivity of the immune toxicity protection law result, to avoid spreading poison, but also for the formulation, provide a basis for optimization of immune procedure of piglets, suitable for universal promotion.

【技术实现步骤摘要】
一种猪肺炎支原体疫苗效力测定方法
本专利技术涉及一种疫苗效力的测定方法，尤其是一种猪肺炎支原体疫苗效力测定方法，属于生物

技术介绍
猪支原体肺炎(Swineenzootichyopneumoniae)，我国俗称猪喘气病，是由猪肺炎支原体(Mycoplasmahyopneumoniae，Mh)引起的一种慢性、接触性、呼吸道传染病，主要临床表现为咳嗽、气喘，猪只感染后往往会生长发育迟缓，饲料转化率严重降低，导致重大的经济损失。且猪只一旦感染支原体极易继发其他病毒和细菌感染，从而导致死亡率升高。国内外资料及大量临床数据表明，疫苗免疫是预防本病最重要的手段。国内外猪肺炎支原体疫苗免疫效果评价标准不一，常用的方法有：仔猪免疫攻毒法、家兔IHA测定法、ELISA抗体检测法。仔猪免疫攻毒法的弊端是攻毒需要有负压的环境，攻毒技术难以掌握，并且每次需要剖杀试验猪计算肺部病变减少率，受主观影响大，检测周期长，成本高，重复性差；家兔IHA测定法以家兔做为实验动物，为非靶动物，不能准确反应疫苗真实效力；ELISA抗体检测法测定疫苗的相对效力，而ELISA检测法受试剂盒批间差异的影响，重复性差，且多本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种猪肺炎支原体疫苗效力测定方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）免疫动物筛选猪肺炎支原体抗原抗体阴性动物作为实验动物，用所述猪肺炎支原体疫苗对实验动物进行免疫；（2）血清采集、稀释免疫程序结束后，无菌采集动物血清，灭活，对血清做倍比稀释，得到不同稀释度的血清，作为待检样品；（3）支原体‑血清结合、培养取待检样品与猪肺炎支原体检测用抗原等体积混合，每个样品设置复孔，同时设阴、阳性对照，将培养板密闭，恒温培养，定期观察；（4）结果判定试验成立条件：阳性对照孔均变为黄色，阴性对照孔均不变色，判定时间：当阳性对照孔全部变为黄色时进行结果判定，判定标准：将不变色孔的待检样品最高稀释倍数判定为所述待检样...

【技术特征摘要】
1.一种猪肺炎支原体疫苗效力测定方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）免疫动物筛选猪肺炎支原体抗原抗体阴性动物作为实验动物，用所述猪肺炎支原体疫苗对实验动物进行免疫；（2）血清采集、稀释免疫程序结束后，无菌采集动物血清，灭活，对血清做倍比稀释，得到不同稀释度的血清，作为待检样品；（3）支原体-血清结合、培养取待检样品与猪肺炎支原体检测用抗原等体积混合，每个样品设置复孔，同时设阴、阳性对照，将培养板密闭，恒温培养，定期观察；（4）结果判定试验成立条件：阳性对照孔均变为黄色，阴性对照孔均不变色，判定时间：当阳性对照孔全部变为黄色时进行结果判定，判定标准：将不变色孔的待检样品最高稀释倍数判定为所述待检样品的效价。2.如权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤（1）中所述实验动物为仔猪、家兔、种公猪或空怀母猪。3.如权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤（2）中所述待检血清做2~10倍系列倍比稀释，优选2...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑朝朝，张德宝，高晓磊，刘涛，郁宏伟，朱秀同，柳珊，杨保收，
申请(专利权)人：瑞普保定生物药业有限公司，
类型：发明
国别省市：河北,13