一种羧甲基壳聚糖/海藻酸钠复合海绵固定化木瓜蛋白酶及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种羧甲基壳聚糖/海藻酸钠复合海绵固定化木瓜蛋白酶及其应用，所述固定化木瓜蛋白酶的制备方法如下：S1：将羧甲基壳聚糖溶液和海藻酸钠溶液混合得混合溶液，备用；用磷酸缓冲溶液溶解木瓜蛋白酶得木瓜蛋白酶溶液，备用；S2：于搅拌状态下将木瓜蛋白酶溶液加入所述混合溶液中，然后加入戊二醛溶液搅拌10～30min，然后再加入CaCl2溶液并搅拌10～30min，得固化混合液备用；S3：将S2所得固化混合溶液真空冷冻干燥，即得所述羧甲基壳聚糖/海藻酸钠复合海绵固定化木瓜蛋白酶；其中，S1中，所述木瓜蛋白酶溶液的酶活为500～700 U/mL；S2中，所述戊二醛溶液的浓度为1.0～1.6%。本发明专利技术提供的羧甲基壳聚糖/海藻酸钠复合海绵固定化木瓜蛋白酶具有较好的酶活力回收率和稳定性。

Immobilization of papain with carboxymethyl chitosan / sodium alginate composite sponge and its application

The invention relates to a carboxymethyl chitosan / alginate composite sponge immobilized papain and its application are as follows, the preparation method of immobilized papain: S1: carboxymethyl chitosan and sodium alginate solution mixed mixed solution, alternate with phosphoric acid buffer solution; dissolved papain was papain solution, standby S2;: mixing state of papain solution into the mixed solution, then adding glutaraldehyde solution stirring for 10 ~ 30min, then CaCl2 solution is added and stirred for 10 ~ 30min, curing the mixture back; S3: S2 the curing mixture solution of vacuum freeze drying to obtain the carboxymethyl chitosan sodium alginate composite sponge immobilized papain; among them, S1, the papain activity was 500 ~ 700 U/mL; S2, the e The concentration of two aldehyde solution ranged from 1 to 1.6%. The papain / sodium alginate composite sponge immobilized papain has good enzyme activity recovery rate and stability.

【技术实现步骤摘要】
一种羧甲基壳聚糖/海藻酸钠复合海绵固定化木瓜蛋白酶及其应用
本专利技术属于生物酶领域，具体地，涉及一种羧甲基壳聚糖/海藻酸钠复合海绵固定化木瓜蛋白酶及其应用。
技术介绍
酶（Enzyme）的本质大部分是蛋白质，少数为非蛋白质，酶具有高效性、专一性、温和性，是一类特殊的催化剂，也称生物催化剂。但游离的酶稳定性差，极易在高温、强酸和强碱的环境中被破坏结构而变性失活，因此大大的限制了酶的大量重复使用。为了提高酶的稳定性，1953年由德国科学家（Gubhofen）提出“固定化酶”，固定化酶是使用特殊的固体材料将酶固定在一定的区域内，但其仍然能够进行催化反应，且该酶可回收及重复利用的一类技术。固定化酶的基本方法有包埋法、交联法和共价键合法等，其中交联法是利用一类特殊的试剂在酶与载体间进行交联而形成共价键，从而得到交联网架结构。木瓜蛋白酶（Papain）通常为白色的粉末状，溶于磷酸缓冲液、微溶于水，有特殊的气味。由于木瓜蛋白酶活性中心是含有半胱氨酸的巯基蛋白酶，具有较强的水解多种蛋白酶的能力，且热稳定性好以及来源丰富等特点，因此在医药、食品等行业得到广泛的应用。研究发现，木瓜蛋白酶与胃蛋白酶的作本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种羧甲基壳聚糖/海藻酸钠复合海绵固定化木瓜蛋白酶，其特征在于，所述固定化木瓜蛋白酶的制备方法如下：S1：将羧甲基壳聚糖溶液和海藻酸钠溶液混合得混合溶液，备用；用磷酸缓冲溶液溶解木瓜蛋白酶得木瓜蛋白酶溶液，备用；S2：于搅拌状态下将木瓜蛋白酶溶液加入所述混合溶液中，然后加入戊二醛溶液搅拌10～30min，然后再加入CaCl2溶液并搅拌10～30min，得固化混合液备用；S3：将S2所得固化混合溶液真空冷冻干燥，即得所述羧甲基壳聚糖/海藻酸钠复合海绵固定化木瓜蛋白酶；其中，S1中，所述木瓜蛋白酶溶液的酶活为500～700U/mL；S2中，所述戊二醛溶液的浓度为1.0～1.6％。

【技术特征摘要】
1.一种羧甲基壳聚糖/海藻酸钠复合海绵固定化木瓜蛋白酶，其特征在于，所述固定化木瓜蛋白酶的制备方法如下：S1：将羧甲基壳聚糖溶液和海藻酸钠溶液混合得混合溶液，备用；用磷酸缓冲溶液溶解木瓜蛋白酶得木瓜蛋白酶溶液，备用；S2：于搅拌状态下将木瓜蛋白酶溶液加入所述混合溶液中，然后加入戊二醛溶液搅拌10～30min，然后再加入CaCl2溶液并搅拌10～30min，得固化混合液备用；S3：将S2所得固化混合溶液真空冷冻干燥，即得所述羧甲基壳聚糖/海藻酸钠复合海绵固定化木瓜蛋白酶；其中，S1中，所述木瓜蛋白酶溶液的酶活为500～700U/mL；S2中，所述戊二醛溶液的浓度为1.0～1.6％。2.根据权利要求1所述的羧甲基壳聚糖/海藻酸钠复合海绵固定化木瓜蛋白酶，其特征在于，S1中，所述木瓜蛋白酶溶液的酶活为600U/mL。3.根据权利要求1所述的羧甲基壳聚糖/海藻酸钠复合海绵固定化木瓜蛋白酶，其特征在于S2中，所述戊二醛溶液的浓度为1.0％。4.根据权利要求1所述的羧...

【专利技术属性】
技术研发人员：苗艳丽，胡章，王宏波，李泳，谷长生，廖铭能，张兆霞，黄娜，吴育廉，
申请(专利权)人：广东海洋大学，
类型：发明
国别省市：广东,44