The invention belongs to the field of gene engineering and enzyme engineering technology, in particular relates to a carbonyl reductase mutant and its use. The invention uses semi rational design of crystal structure by molecular transformation of carbonyl reductase ChKRED20 based on one or more amino acid substitution, obtain a series of substrates in the broader spectrum of mutants, shows the potential application in biocatalysis.
【技术实现步骤摘要】
一种羰基还原酶突变体及其应用
本专利技术属于基因工程和酶工程
，具体涉及一种羰基还原酶突变体及其在不对称还原羰基化合物中的应用。
技术介绍
手性醇是合成手性药物的重要中间体，生物催化不对称还原羰基化合物生产手性醇是制备手性醇的重要方法之一。生物催化通常以产羰基还原酶(或酮还原酶)的微生物或偶联有辅酶再生系统的重组酶为生物催化剂。由于重组酶在反应中几乎无副反应生成，因此目前大规模的工业生产中绝大部分都采用重组酶。然而，随着生物催化剂定制需求的快速增长，现有的基础酶库在数量和质量上都远不能满足需要。以蛋白质工程技术对酶进行分子改造是公认的解决天然酶局限的有力工具，可目标导向性地快速获得酶学性能改良的突变体，以达到工业生产中工艺的要求。近年来，随着X射线晶体衍射技术和核磁共振对生物大分子的解析手段不断发展，蛋白质的理性/半理性设计越来越成为体外改良蛋白质性质的重要手段，过去十年间人们成功地利用该技术改造了上百种蛋白质的性质(J.D.Bloom，F.H.Arnold.Inthelightofdirectedevolution:Pathwaysofadaptivepr...
【技术保护点】
一种羰基还原酶突变体，其特征在于以羰基还原酶ChKRED20的氨基酸序列为出发序列，经突变后具有以下特征的氨基酸序列：将其第201位的甲硫氨酸突变为丙氨酸。
【技术特征摘要】
1.一种羰基还原酶突变体，其特征在于以羰基还原酶ChKRED20的氨基酸序列为出发序列，经突变后具有以下特征的氨基酸序列：将其第201位的甲硫氨酸突变为丙氨酸。2.一种羰基还原酶突变体，其特征在于：将权利要求1所述的突变体的第145位的组氨酸突变为丙氨酸。3.一种羰基还原酶突变体，其特征在于：将权利要求2所述的突变体的第153位的丝氨酸突变为精氨酸。4.一种羰基还原酶突变体，其特征在于：将权利要求2所述的突变体的第188位的络氨酸突变为亮氨酸。5....
【专利技术属性】
技术研发人员：吴中柳，赵凤佼，李同彪，李孜一，王刚刚，刘忠川，金赟，
申请(专利权)人：中国科学院成都生物研究所，
类型：发明
国别省市：四川,51
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