一种杜梨组培苗生根培养基制造技术

本发明专利技术提供了一种杜梨组培苗生根培养基，包括无机盐减半的MS培养基+0.25～0.5mg/L 3‑吲哚丁酸+6～9g/L琼脂+0.3～0.5g/L活性炭+15～30g/L蔗糖。本发明专利技术还提供了一种杜梨组培苗生根方法，包括如下步骤：选择生长健壮的杜梨组培苗，切成1～2.5cm茎段，放入所述的生根培养基进行生根培养，得到杜梨生根苗。本发明专利技术结合外植体取材方式以及外源生长素的配比探索出高效、简易的杜梨组培苗生根的培养基配方，较常规方法生根率和移栽成活率高，操作简便，成本低，适用于杜梨组培快繁。

The rooting medium for a rootstock seedlings

The invention provides a rooting medium for Pyrus plantlets, including inorganic salts by MS medium +0.25 ~ 0.5mg/L 3 IBA +6 ~ 9g/L agar +0.3 ~ 0.5g/L ~ 30g/L sucrose +15 activated carbon. The invention also provides a method of rooting of Pyrus betulaefolia seedling, which comprises the following steps: selection of Pyrus betulaefolia plantlet growth robust, cut into 1 ~ 2.5cm stems, rooting rooting medium into the root, Du Lisheng. The invention combines the explant and exogenous auxin ratio explore medium high efficiency, simple were compared with conventional methods, Miao Shenggen tissue culture, rooting rate and survival rate, simple operation, low cost, suitable for the micropropagation.

【技术实现步骤摘要】
一种杜梨组培苗生根培养基
本专利技术属于植物组织培养
，具体涉及一种杜梨组培苗生根培养基，还涉及一种杜梨组培苗生根方法。
技术介绍
梨为蔷薇科(Rosaceae)，梨亚科(Pomoideae)之梨属(PyrusL.)植物。梨是一种重要的果树，在我国水果产量中，仅次于苹果、柑橘，居第三位。梨在生产中均采用嫁接繁殖，砧木是果树嫁接的重要基础，与果树的生产密切相关。优良砧木的筛选对于调节树势，延长结果年限，甚至调节果实品质等方面具有非常重要的意义。杜梨(PyrusbetulaefoliaBunge.)是梨树砧木中综合抗性最强的砧木，在梨树生产研究中起着重要的作用。由于其适生性强，耐旱，根深、发达、耐瘠薄，抗盐碱能力强，在中性土及盐碱土中均能正常生长，且与我国现有大面积种植的白梨、砂梨、秋子梨等系统品种具有亲和力，为我国梨树砧木最佳选择，生产中广泛应用。与其他木本果树一样，杜梨具有童期较长、田间繁殖耗用较大人力和时间、占用较多土地等特点，使其在常规育种中受限。目前，杜梨繁殖以实生播种为主，由于实生苗具有不同基因型，繁育的苗木生长势、抗病性、亲和力等方面均存在较大差异。此外，生产中已发现嫁接于不同砧木上接穗的生长势、抗病性、果实品质等也存在较大的差异。因而，生产中有必要选择基因型一致砧木用于苗木快繁。对砧木进行无性繁殖，可以获得基因型一致的苗木，通常采用压条、扦插、组织培养等方式进行无性繁殖。其中，组织培养由于不受季节、环境等因素的影响，占场地面积以及人工较少而被认为是性价比以及效率最高的快繁方式。然而，木本植物组培快繁普遍存在生根困难、移栽成活率低等问题，影响了组培快繁技术的生产实际应用。为解决试管苗生根，目前常用方法有以下几种：一是筛选合适生根培养基，在生根培养基上直接培养。二是瓶外生根，先将试管苗的茎段进行激素处理后，转到蛭石、珍珠岩、泥炭、苔藓等基质中来完成瓶外生根过程。三是瓶内二次转接生根，先将试管苗的茎段激素处理后，再转到空白培养基上诱导生根。这些方法在不同植物上都有成功的报道，但是不同植物采用的培养基配方以及培养方式存在极大差异，这对杜梨砧木的研究利用等方面造成了不便。此外，这些常用方法仅仅集中于培养基的配方以及外源生长调节剂的浓度及配比，并未对外植体的选择考虑在内，而事实上，植物体内源激素对外植体的生根也具有相当大的影响，因为生长素对植物的作用具有正负两重性，即在低浓度促进生长，而超过最适浓度则抑制生长。植物的不同器官对其反应不同，一般敏感性为根＞芽＞茎，也就是说，组培苗外植体生根不仅仅取决于外源生长调节剂的控制，而是在内源以及外源生长素的共同调节下完成的，尤其是组培苗不定根的形成。其次，植物体分泌生长素的部位是幼芽幼叶和发育中的种子，不同外植体的选取，也在一定程度上影响着植物体内内源激素的含量，因此，结合外植体取材方式以及外源生长素的配比探索出便捷高效的杜梨组培苗生根的培养基配方具有重要的实际意义。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种杜梨组培苗生根培养基，该生根培养基能够提高生根效率、缩短生根周期、节约成本、操作简便。本专利技术还要解决的技术问题是提供一种高效、简易的杜梨组培苗生根方法，该方法可提高杜梨组培苗生根率和移栽成活率，适用于杜梨组培快繁。为了解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案如下：一种杜梨组培苗生根培养基，包括：无机盐减半的MS培养基+0.25～0.5mg/L3-吲哚丁酸+6～9g/L琼脂+0.3～0.5g/L活性炭+15～30g/L蔗糖。其中，所述无机盐减半的MS培养基的组分和其在杜梨组培苗生根培养基中的浓度如下：0.95g/L硝酸钾、0.825g/L硝酸铵、0.185g/L七水硫酸镁、0.085g/L磷酸二氢钾、0.166g/L无水氯化钙、16.9mg/L一水硫酸锰、8.6mg/L七水硫酸锌、6.2mg/L硼酸、0.83mg/L碘化钾、0.25mg/L二水锰酸钠、0.025mg/L五水硫酸铜、0.025mg/L六水氯化钴、37.3mg/L乙二胺四乙酸二钠、34.55mg/L七水硫酸亚铁、100mg/L肌醇、2mg/L甘氨酸、0.5mg/L烟酸、0.5mg/L盐酸吡哆醇、0.1mg/L盐酸硫胺素。本专利技术使用无机盐减半的MS培养基可使杜梨组培苗发根快，生根率高，根系发达，根多而粗壮，同时节约成本。其中，所述生根培养基，3-吲哚丁酸(IBA)的浓度为0.25mg/L。当生长素IBA的浓度为0.25mg/L时，杜梨组培苗生根效率最高，并且成本用量较低。其中，所述生根培养基，活性炭的浓度为0.3g/L。添加活性炭有利于提供生根所需的暗环境，免去刻意给予暗培养环境环节，促进生根，缩短生根周期；还对防止外植体褐化有一定的作用。其中，所述生根培养基，琼脂的浓度为7～8g/L，优选7g/L。琼脂在离体生根中用来充当支持物，其生理作用表现较弱，但其浓度的高低通过影响培养基的水势和硬度进而影响组培苗的生根。其中，所述生根培养基，蔗糖的浓度为15～25g/L，优选20g/L。蔗糖作为能源和渗透压物质，不同的蔗糖浓度影响根系的发育。其中，所述生根培养基，溶剂为煮沸后的自来水。从实际操作角度来说，用煮沸的自来水作为溶剂配制杜梨生根培养基，不但减少了成本而且简化了实际操作过程，提高了实际生产上效率。优选的，所述生根培养基包括：无机盐减半的MS培养基+0.25mg/L3-吲哚丁酸+7g/L琼脂+0.3g/L活性炭+20g/L蔗糖，溶剂为煮沸后的自来水。其中，所述生根培养基与生长健壮的切成1～2.5cm茎段的仅保留1～2片幼叶以及一芽的杜梨组培苗结合用于杜梨组培苗生根。一种基于杜梨组培苗生根培养基的杜梨组培苗生根方法，该方法包括如下步骤：选择生长健壮的杜梨组培苗，切成1～2.5cm茎段，放入所述的生根培养基进行生根培养，得到杜梨生根苗。其中，所述杜梨组培苗为继代培养30～50天后得到的组培苗，优选为继代培养40天后得到的组培苗。继代培养30天左右组培苗长势是最为良好的，超过50天，培养基养分大部分会被消耗掉，培养基会干涸，减少，对组培苗不利。其中，所述茎段仅保留1～2片幼叶以及一芽。优选地，将所述杜梨组培苗切成1.5～2.5cm茎段，仅保留一片幼叶以及一芽。外植体的类型对杜梨组培苗的生根效率有很大的影响。由于新生叶片及芽的数量影响着外植体内源激素的含量，因此，外植体的选取应结合培养基激素含量的水平。当外植体仅保留1～2片幼叶以及一芽时，组培苗主枝清晰，根系发达。当外植体为多叶多芽时，组培苗丛生严重，发根率较低。其中，所述生根培养，培养条件为：白天温度为25±2℃，夜间温度为20±2℃，光照强度为50～60μmol·m-2·s-1，每天光照12～14h。本专利技术还提供与上述杜梨组培苗生根方法配合使用的炼苗和移栽方法，包括如下步骤：向生根的杜梨组培苗中加水，敞口炼苗2～3天；取出组培苗，洗净培养基，每株留叶2～3片，移入灭菌后的基质中，持水量为60％；白天温度为25±2℃，夜间温度为20±2℃；避免强光直射，阴暗角落培养一周；随后光照强度为50～60μmol·m-2·s-1，每天光照12～14h，继续练苗20天，期间浇灌1/8无机盐MS液体培养基，用煮沸后的自来水配制；然后移栽定植。其中，所述本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种杜梨组培苗生根培养基，其特征在于，包括：无机盐减半的MS培养基+0.25～0.5mg/L 3‑吲哚丁酸+6～9g/L琼脂+0.3～0.5g/L活性炭+15～30g/L蔗糖。

【技术特征摘要】
1.一种杜梨组培苗生根培养基，其特征在于，包括：无机盐减半的MS培养基+0.25～0.5mg/L3-吲哚丁酸+6～9g/L琼脂+0.3～0.5g/L活性炭+15～30g/L蔗糖。2.根据权利要求1所述的杜梨组培苗生根培养基，其特征在于，所述无机盐减半的MS培养基的组分和其在杜梨组培苗生根培养基中的浓度如下：0.95g/L硝酸钾、0.825g/L硝酸铵、0.185g/L七水硫酸镁、0.085g/L磷酸二氢钾、0.166g/L无水氯化钙、16.9mg/L一水硫酸锰、8.6mg/L七水硫酸锌、6.2mg/L硼酸、0.83mg/L碘化钾、0.25mg/L二水锰酸钠、0.025mg/L五水硫酸铜、0.025mg/L六水氯化钴、37.3mg/L乙二胺四乙酸二钠、34.55mg/L七水硫酸亚铁、100mg/L肌醇、2mg/L甘氨酸、0.5mg/L烟酸、0.5mg/L盐酸吡哆醇、0.1mg/L盐酸硫胺素。3.根据权利要求1所述的杜梨组培苗生根培养基，其特征在于，所述生根培养基，3-吲哚丁酸的浓度为0.25mg/...

【专利技术属性】
技术研发人员：马媛春，王影，蔺经，常有宏，
申请(专利权)人：江苏省农业科学院，
类型：发明
国别省市：江苏,32