一种自由状态下非人灵长类动物的肠道菌群收集方法技术

本发明专利技术提供了自由状态下非人灵长类动物的肠道菌群收集方法，包括以下步骤：(1)在非人灵长类动物的饲养容器的底部放置一柔性垫巾，以及承载柔性垫巾的硬质垫板，其中，柔性垫巾包括吸水层和防水层，防水层与所述硬质垫板接触；(2)观察到动物排便后，从饲养容器中取出所述硬质垫板及柔性垫巾，收集柔性垫巾上的肠道菌群样品。当自由活动状态下的动物排便、排尿掉落到柔性垫巾后，尿液被吸水层吸收，避免粪便与尿液混合变成糊状，防水层又可保持粪菌的原有干燥度，利于保持肠道菌群样品的完整性；硬质垫板便于取出柔性垫巾，并收集其上的肠道菌群样品。该方法具有取样量大、重复采样性好、菌群基因样本完整性好的优点。

A method for collecting intestinal microflora of non-human primates in a free state

The present invention provides a method for collecting intestinal microflora in non-human primate animal free state, which comprises the following steps: (1) a flexible pad in non-human primate animal feeding at the bottom of the container, and the flexible bearing pad towel hard plate, the flexible pad comprises a water absorbing layer and a waterproof layer, waterproof layer with the hard plate contact; (2) to observe the animal after defecation, remove the hard plate and the flexible pad towel from the feeding container, collect samples of intestinal flora on the flexible pad. When the free state of the animal for defecation and urination fell to the flexible pad, the urine absorbed by the water absorption layer, avoid the feces and urine mixed into a paste, the waterproof layer can maintain the original dry degree of fecal bacteria, to maintain the integrity of intestinal flora of samples; the hard backing plate is convenient to take out the flexible pad, and collect samples the intestinal flora on the. The method has the advantages of large sampling quantity, good repeated sampling and good integrity of gene samples of bacteria.

【技术实现步骤摘要】
一种自由状态下非人灵长类动物的肠道菌群收集方法
本专利技术涉及动物肠道菌群的收集
，具体涉及自由状态下非人灵长类动物的肠道菌群收集方法。
技术介绍
人体肠道是一个多元化和充满活力的微生态系统，拥有很多种细菌肠道菌群。肠道菌群对人类健康有着重要的影响，已被报道与心脑血管疾病、肥胖、糖尿病、艾滋病、自闭症、抑郁症及老年痴呆症等有密切关联，因此，肠道菌群研究成为近年来的研究热点。非人灵长类动物(主要为猴)由于其在亲缘关系上与人最接近，与人类的遗传物质有75％-85％的同源性，在生理结构以及免疫代谢方面与人类高度的相似，在脑科学脑认知研究中相比其他的实验动物具有强大的优势。因此在肠道菌群的研究当中，作为最接近人类的动物模型，非人灵长类肠道菌群(又称“粪便细菌”、“粪菌”)的收集就至关重要。目前非人灵长类肠道菌群收集的方法包括：1)捡拾自由活动动物的粪便；2)麻醉状态下用药棉签插入肛门采取直肠内的粪菌；3)尸体解剖时直接在小肠、直肠处取样。方法1)通常是在固定时间(每天早晨)捡拾猴笼底部的粪便，该方法可以长期重复采样、采样量高；但存在的缺点是掉落在猴笼底部的粪便通常已与尿液混合在一起，变成糊状，其潮湿的质地和长时间的存放不利于保持肠道菌群基因样本的完整性。方法2)通常是用棉签深入肛门到达直肠采取粪菌，该方法可以短时间内可以将肠道菌群样品迅速冷冻，保证菌群基因样本的完整性，但药棉签采样量小，采样效率低。方法3)既可以保证菌群基因样本的完整性也能保证采样量，但由于动物已处死，无法长期重复取样，长时程对动物肠道菌群的检测变得不可能。因此，有必要提供一种取样效率高、可重复采用、可保持在菌群基因样本完整性的肠道菌群采集方法。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供了一种自由状态下非人灵长类动物的肠道菌群收集方法。该方法可以在对自由活动状态下的非人灵长类动物的肠道菌群进行取样时，避免肠道菌群样品与尿液混合变成糊状，有效提高菌群基因样本完整性，从而使该方法兼具重复采样性好、采样量高、菌群基因样本完整性好的优点。本专利技术提供的自由状态下非人灵长类动物的肠道菌群收集方法，包括以下步骤：(1)在非人灵长类动物的饲养容器的底部放置一柔性垫巾，以及承载所述柔性垫巾的硬质垫板，其中，所述柔性垫巾包括吸水层和防水层，所述防水层与所述硬质垫板接触；(2)观察到所述动物排便后，从所述饲养容器中取出所述硬质垫板及柔性垫巾，收集所述柔性垫巾上的肠道菌群样品。本专利技术中，所述柔性垫巾的上层为吸水层，下层为防水层，当自由活动状态下的动物排便、排尿掉落到所述饲养容器底部后，尿液可被吸水层吸收，避免带肠道菌群的粪便与尿液混合变成糊状，以免造成部分肠道菌群的死亡，同时下层的防水层又可避免带肠道菌群的粪便中原有的水分被吸干，便于保持粪便原有的干燥度，所述柔性垫巾可有效保持粪菌样品的形态完整性，提高菌群基因样本的完整性；下层的硬质垫板起承托柔性垫巾的作用，在拖拉所述硬质垫板的过程中，由于所述柔性垫巾被支撑在所述硬质垫板上，带有肠道菌群样品的柔性垫巾也被带出所述饲养容器，便于进行肠道菌群样品的收集和低温存储，同时也利于同一动物的不同粪便堆的分别取样、储存和分析。优选地，所述吸水层的材质包括植物性纤维材料绒毛浆、棉花和高分子吸水树脂中的一种或多种，但不限于此。优选地，所述防水层包括油毡、聚乙烯膜和无纺布中的一种或多种，但不限于此优选地，所述吸水层和防水层是通过粘附或缝合而连接在一起。本专利技术一实施方式中，所述柔性垫巾可以为常用的纸尿垫或手术垫巾。优选地，所述硬质垫板包括木板、PVC板、硬质塑料板和硬质合金板的一种或多种，但不限于此。优选地，所述饲养容器包括饲养笼。本专利技术的有益效果是：(1)柔性垫巾的上层吸水，下层防水，自由活动状态下的动物排便、排尿掉落到柔性垫巾后，尿液被吸水层吸收，避免粪便与尿液混合变成糊状，防水层又可保持粪菌的原有干燥度，利于保持肠道菌群样品的完整性；(2)观察到动物排便后，下层硬质垫板可便于承托并取出柔性垫巾，便于收集附着在吸水层上的肠道菌群样品，同时也利于同一个动物的不同粪便堆的分别取样，储存和分析。附图说明图1为本专利技术实施例中自由状态下非人灵长类动物的肠道菌群收集方法的示意图，1为饲养猴笼，2为柔性垫巾(吸水层和防水层结构未示出)，3为硬质垫板，4为猕猴粪便。具体实施方式以下所述是本专利技术的优选实施方式，应当指出，对于本
的普通技术人员来说，在不脱离本专利技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也视为本专利技术的保护范围。实施例1一种自由状态下非人灵长类动物的肠道菌群收集方法，包括以下步骤：(1)在非人灵长类动物的饲养容器的底部放置一硬质垫板，并在所述硬质垫板之上放置一柔性垫巾，其中，所述柔性垫巾包括吸水层和防水层，所述防水层与所述硬质垫板接触；(2)观察到非人灵长类动物排便后，从所述饲养容器中中拖拉所述硬质垫板，硬质垫板及支撑在其上的柔性垫巾被带出猴笼，收集所述柔性垫巾上的肠道菌群样品。本专利技术实施例中，所述非人灵长类动物为猕猴，所述饲养容器为饲养猴笼。本专利技术实施例中，所述吸水层的材质包括植物性纤维材料绒毛浆、棉花和高分子吸水树脂中的一种或多种。本实施方式中，所述吸水层为纯木浆和高吸水树脂(SAP)构成的复合结构。本专利技术实施例中，所述防水层包括油毡、聚乙烯膜和无纺布中的一种或多种。本实施方式中，所述防水层为防水无纺布。本实施方式中，所述吸水层和防水层是缝合在一起。作为本专利技术的另外一种实施可能，可采用医院用纸尿垫作为所述柔性垫布。本专利技术实施例中，所述硬质垫板包括木板、PVC板、硬质塑料板和硬质合金板的一种或多种。本实施方式中，所述硬质垫板为聚氟乙烯(PVC)。本专利技术中，所述柔性垫巾的上层为吸水层，下层为防水层，当自由活动状态下的猴子的排便、排尿掉落到饲养猴笼底部后，尿液可被吸水层吸收，避免带肠道菌群的粪便与尿液混合变成糊状，以免造成部分肠道菌群的死亡，同时下层的防水层又可避免带肠道菌群的粪便中原有的水分被吸干，便于保持粪便原有的干燥度，即所述柔性垫巾可有效保持粪菌样品的形态完整性，提高菌群基因样本的完整性；下层的硬质垫板起承托柔性垫巾的作用，在拖拉所述硬质垫板的过程中，带有肠道菌群样品的柔性垫巾也被带出所述饲养容器，便于进行肠道菌群样品的收集和低温存储，同时也利于同一动物的不同粪便堆的分别取样、储存和分析。本专利技术中提供的所述肠道菌群收集方法，可以兼具肠道菌群样品重复采样性高、采样量高、菌群基因样本完整性好的优点。以上所述实施例仅表达了本专利技术的一种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本专利技术专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本专利技术构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本专利技术的保护范围。因此，本专利技术专利的保护范围应以所附权利要求为准。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种自由状态下非人灵长类动物的肠道菌群收集方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)在非人灵长类动物的饲养容器的底部放置一柔性垫巾，以及承载所述柔性垫巾的硬质垫板，其中，所述柔性垫巾包括吸水层和防水层，所述防水层与所述硬质垫板接触；(2)观察到所述动物排便后，从所述饲养容器中取出所述硬质垫板及柔性垫巾，收集所述柔性垫巾上的肠道菌群样品。

【技术特征摘要】
1.一种自由状态下非人灵长类动物的肠道菌群收集方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)在非人灵长类动物的饲养容器的底部放置一柔性垫巾，以及承载所述柔性垫巾的硬质垫板，其中，所述柔性垫巾包括吸水层和防水层，所述防水层与所述硬质垫板接触；(2)观察到所述动物排便后，从所述饲养容器中取出所述硬质垫板及柔性垫巾，收集所述柔性垫巾上的肠道菌群样品。2.如权利要求1所述的方法，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：李蕾，黄艳，王立平，坤曼特迪，
申请(专利权)人：深圳先进技术研究院，
类型：发明
国别省市：广东,44