一种轻木‑溶菌酶抗感染敷料及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种轻木‑溶菌酶抗感染敷料及其制备方法与应用，所述制备方法包括以下步骤：选取轻木，用打孔器打孔制成圆片；将圆片进行干燥处理，然后进行浸泡处理；将浸泡后的轻木用去离子水小心清洗并进行干燥处理，制备得到去木质素的轻木；配制Tris‑多巴胺溶液；然后将去木质素的轻木浸泡在Tris‑多巴胺溶液中，并进行浸泡处理；配置溶菌酶溶液；将浸泡多巴胺后的轻木清洗，浸泡在溶菌酶溶液中，并在摇床中进行浸泡处理；制备得到轻木‑溶菌酶抗感染敷料。本发明专利技术中通过多巴胺胶联溶菌酶的形式，将溶菌酶充分的粘附于轻木的多孔径中，提供了一个相对稳定的释放微环境，从而对革兰阴性菌也有一定的杀菌效果。

Dressing and its preparation method and application of anti infection of a light wood lysozyme

The invention discloses a light wood lysozyme anti infection dressing and preparation method and application thereof. The preparation method comprises the following steps: selecting light wood, with a punch punch made of wafer; wafer will be dry, and then soaking; soaked wood with deionized water and careful cleaning the drying, prepared to lignin light wood; preparation of Tris dopamine solution; then to soak in light wood lignin Tris dopamine solution, and soaking treatment; lysozyme solution configuration; light wood cleaning after soaking in soaking dopamine, lysozyme solution, and were soaked in table; the prepared anti infection dressing wood lysozyme. The dopamine crosslinking lysozyme form of the invention, the adhesion of lysozyme in full multi aperture light wood, provides a relatively stable release micro environment, which also has some sterilization effect on Gram negative bacteria.

【技术实现步骤摘要】
一种轻木-溶菌酶抗感染敷料及其制备方法与应用
本专利技术属于药物制备领域，具体地说，涉及一种轻木-溶菌酶抗感染敷料及其制备方法与应用。
技术介绍
对于大面积严重皮肤缺损的病人而言，急需通过各种手段快速有效的封闭创面从而防止细菌入侵，同时防止体液、水电解质和能量的流失。创面敷料可以重建皮肤屏障，加速创面愈合，为后期手术做好准备。理想的创面敷料应该有以下一些特点：良好的力学性能、适当的水气通透性和优异的生物相容性。更为重要的是，感染、炎症反应失调等会引起创面的愈合减慢甚至不愈合，理想的创面敷料还应当能为创面局部提供一个无菌适宜生长的微环境。而天然材料如甲壳素与壳多糖、葡聚糖类、纤维素类、海藻酸盐、蚕丝蛋白等，由于取材方便，具有良好的生物相容性，被认为是用作制备创面敷料的很好的材料。因此，天然材料负载各种抗菌制剂、生长因子或者其他化学物质促进感染性创面的愈合已成为创面修复领域研究的热点及重点。因此，天然材料负载各种抗菌制剂、生长因子或者其他化学物质促进感染性创面的愈合已成为创面修复领域研究的热点及重点。做为一种可再生资源，木材具有低密度，高模量，高强度，高韧性和导热系数低等特性。而轻木是目前世界上最轻的商品用材，因其溶重最小、材质均匀、导热系数较低、易加工且体积稳定性较好，轻木可以做各种特殊结构物。目前，已有相关研究可对轻木进行去木质素处理，形成透光率既可达到90％，又可保持纤维素结构的新型透明轻型纤维木。若其用于创面敷料基础物，可能具有造价低廉、透气透光性好和常见敷料的相关作用。而溶菌酶是一种小型单体蛋白质，含129个氨基酸残基，具有抗炎、抗病毒、杀菌及抗组胺活性，目前已广泛用于抗菌。但是，革兰阴性杆菌由于存在保护细菌细胞壁的脂多糖成分，游离溶菌酶对其作用有限。且溶菌酶分子结构不稳定，易失活，临床上常将其以微球囊形式或者与其它抗菌剂结合使用。目前，将溶菌酶与创面敷料相结合已成为一个热门的研究领域，其可有效提高溶菌酶的持续杀菌能力及对革兰阴性杆菌作用。因此，我们特将去木质素轻木与溶菌酶相结合，设计一种新型的经济、高效的抗菌敷料，并研究其体外抗菌活性、细胞增值抑制以及对创面愈合的影响。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术针对上述的问题，提供了一种轻木-溶菌酶抗感染敷料及其制备方法与应用，本专利技术的轻木-溶菌酶抗感染敷料能够快速有效的封闭创面从而防止细菌入侵，同时防止体液、水电解质和能量的流失；还兼具经济性、良好的生物相容性和亲水性。为了解决上述技术问题，本专利技术公开了一种轻木-溶菌酶抗感染敷料的制备方法，包括以下步骤：步骤1、制备去木质素的轻木：选取轻木，用打孔器打孔制成圆片；将圆片进行干燥处理，然后浸泡在NaClO2-醋酸盐缓冲液中；将浸泡后的轻木用去离子水小心清洗并进行干燥处理，制备得到去木质素的轻木；步骤2、多巴胺胶联溶菌酶处理去木质素的轻木：将Tris盐酸溶于去离子，再加入多巴胺粉末，配制成Tris-多巴胺溶液；然后将去木质素的轻木浸泡在Tris-多巴胺溶液中，并在摇床中进行浸泡处理；称取溶菌酶粉剂溶于去离子水，配置成溶菌酶溶液；将浸泡多巴胺后的轻木用去离子水小心清洗，浸泡在溶菌酶溶液中，并在摇床中进行浸泡处理；反应完毕后取出置于室温下无菌保存备用，制备得到轻木-溶菌酶抗感染敷料。进一步地，所述步骤1中的轻木的密度为150-170kg/m3；圆片的直径为0.6mm，厚度为0.8mm。进一步地，所述步骤1中的圆片的干燥温度为102-108℃，干燥时间为20-28小时。进一步地，所述步骤1中的NaClO2-醋酸盐缓冲液的质量浓度为0.5％-1.5％，温度为80℃，pH为4.6，浸泡时间为8-16h。进一步地，所述步骤1中的浸泡后的轻木的干燥条件为：按照乙醇-乙醇混合丙酮(1:1，v/v)-丙酮三步顺序干燥，每步10min，重复三次，乙醇与丙酮的体积比为1:1。进一步地，所述步骤2中的Tris-多巴胺溶液的浓度为1.8-2.2mg/ml，pH为8.4-8.6。进一步地，所述步骤2中的溶菌酶的浓度为5-20mg/ml。进一步地，所述步骤2中的摇床的温度为37℃，摇床的转速为80-120r/min，浸泡处理时间为10-15h。本专利技术还公开了一种由上述的制备方法制备得到的轻木-溶菌酶抗感染敷料。本专利技术还公开了一种上述的轻木-溶菌酶抗感染敷料在制备治疗创面愈合药物中的应用。与现有技术相比，本专利技术可以获得包括以下技术效果：1)本专利技术的轻木-溶菌酶抗感染敷料能够高效抗菌：常规的溶菌酶对革兰阳性菌的抑制作用已被熟知，其机制在于水解N-乙酰胞壁酸和细菌细胞壁肽聚糖之间的化学键。但是，革兰阴性菌由于细胞壁中脂多糖(LPS)的保护作用，杀菌效果有限。本专利技术中通过多巴胺胶联溶菌酶的形式，将溶菌酶充分的粘附于轻木的多孔径中，提供了一个相对稳定的释放微环境，从而对革兰阴性菌也有一定的杀菌效果。2)本专利技术的轻木-溶菌酶抗感染敷料具有高生物相容性：常规的敷料由于来源广泛，大部分长期使用均有一定的生物不相容。但本专利技术中，去除木质素的轻木，由于来源天然无化学原料及试剂污染，且复合天然溶菌酶和多巴胺(食品安全级标准)，不同浓度溶菌酶对细胞基本无增值抑制。3)本专利技术的轻木-溶菌酶抗感染敷料具有较好的经济性：轻木来源广泛，价格低廉，且本技术所需的所有原料及试剂，均较易获得，成本较低，适合于烧伤患者的大量应用。当然，实施本专利技术的任一产品必不一定需要同时达到以上所述的所有技术效果。附图说明此处所说明的附图用来提供对本专利技术的进一步理解，构成本专利技术的一部分，本专利技术的示意性实施例及其说明用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的不当限定。在附图中：图1是本专利技术轻木-溶菌酶材料与方法简易图；图2是本专利技术A1-A3为经过处理的去木质素轻木组，即空白对照，其中A1(×102倍)，A2(×103倍)，A3(2×104倍)；B组为20mg/ml的轻木-溶菌酶组，其中B1(×102倍)，B2(×103倍)，B3(2×104倍)；图3是本专利技术轻木-溶菌酶材料的傅里叶光谱分析；其中，A代表去木质素轻木+多巴胺组，D代表20mg/ml的去木质素轻木-溶菌酶组；图4是本专利技术轻木-溶菌酶材料的亲水性分析；A代表去木质素轻木+多巴胺组，D代表20mg/ml的去木质素轻木-溶菌酶组；图5是本专利技术不同浓度轻木-溶菌酶敷料对细菌的抑制作用；图6是本专利技术不同浓度轻木-溶菌酶敷料对小鼠成纤维细胞增值抑制的OD值变化；图7是本专利技术不同浓度轻木-溶菌酶敷料对小鼠皮肤缺损模型创面愈合率的影响，其中，Control代表单纯去木质素轻木组，A代表去木质素轻木+多巴胺组，B代表5mg/ml的去木质素轻木-溶菌酶组，C代表10mg/ml的去木质素轻木-溶菌酶组，D代表20mg/ml的去木质素轻木-溶菌酶组，每组中左侧代表直接0.6cm的标准化小圆片，右侧代表小鼠创面面积；图8是本专利技术不同浓度轻木-溶菌酶敷料在3天和7天时对小鼠皮肤缺损模型创面愈合率的影响；图9是本专利技术不同浓度轻木-溶菌酶敷料对小鼠皮肤缺损模型新生上皮长度的影响的电镜图，其中，Control代表单纯去木质素轻木组，A代表去木质素轻木+多巴胺组，B代表5mg/ml的去木质素轻木-溶菌酶组，C代表10mg/ml的去木质素轻木-溶菌酶组，D代表20mg/本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种轻木‑溶菌酶抗感染敷料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、制备去木质素的轻木：选取轻木，用打孔器打孔制成圆片；将圆片进行干燥处理，然后浸泡在NaClO2‑醋酸盐缓冲液中；将浸泡后的轻木用去离子水小心清洗并进行干燥处理，制备得到去木质素的轻木；步骤2多巴胺胶联溶菌酶处理去木质素的轻木：将Tris盐酸溶于去离子，再加入多巴胺粉末，配制成Tris‑多巴胺溶液；然后将去木质素的轻木浸泡在Tris‑多巴胺溶液中，并在摇床中进行浸泡处理；称取溶菌酶粉剂溶于去离子水，配置成溶菌酶溶液；将浸泡多巴胺后的轻木用去离子水小心清洗，浸泡在溶菌酶溶液中，并在摇床中进行浸泡处理；反应完毕后取出置于室温下无菌保存备用，制备得到轻木‑溶菌酶抗感染敷料。

【技术特征摘要】
1.一种轻木-溶菌酶抗感染敷料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、制备去木质素的轻木：选取轻木，用打孔器打孔制成圆片；将圆片进行干燥处理，然后浸泡在NaClO2-醋酸盐缓冲液中；将浸泡后的轻木用去离子水小心清洗并进行干燥处理，制备得到去木质素的轻木；步骤2多巴胺胶联溶菌酶处理去木质素的轻木：将Tris盐酸溶于去离子，再加入多巴胺粉末，配制成Tris-多巴胺溶液；然后将去木质素的轻木浸泡在Tris-多巴胺溶液中，并在摇床中进行浸泡处理；称取溶菌酶粉剂溶于去离子水，配置成溶菌酶溶液；将浸泡多巴胺后的轻木用去离子水小心清洗，浸泡在溶菌酶溶液中，并在摇床中进行浸泡处理；反应完毕后取出置于室温下无菌保存备用，制备得到轻木-溶菌酶抗感染敷料。2.根据权利要求1所述的轻木-溶菌酶抗感染敷料的制备方法，其特征在于，所述步骤1中的轻木的密度为150-170kg/m3；圆片的直径为0.6mm，厚度为0.8mm。3.根据权利要求1所述的轻木-溶菌酶抗感染敷料的制备方法，其特征在于，所述步骤1中的圆片的干燥温度为102-108℃，干燥时间为20-28小时。4.根据权利要求1所述的轻木...

【专利技术属性】
技术研发人员：周代君，罗高兴，邢梦秋，吴军，
申请(专利权)人：中国人民解放军第三军医大学第一附属医院，
类型：发明
国别省市：重庆,50