一种祛皱抗氧化的生物面膜的制备方法及其产品技术

本发明专利技术提供了一种祛皱抗氧化的生物面膜制备方法，其中，所述方法包括通过从自体外周血中获取富含血小板的血浆和基质干细胞，添加到胶原蛋白液中，形成凝胶状或半凝胶状面膜，同时可以添加生长因子和抗氧化分子制备成自体的生物面膜产品，可用于皮肤祛皱、抗氧化、去红血丝、除斑和美白等功效。

The invention relates to a preparation method of biological antioxidant anti wrinkle mask and its products

The present invention provides biological mask preparation method, an anti wrinkle antioxidant which comprises a method by obtaining from autologous peripheral blood platelet rich plasma and in stromal cells, added to the collagen solution, gel forming or semi gel mask, also can add growth factor and antioxidant molecules prepared autologous biological mask products, can be used for skin wrinkle, anti-oxidation, to red blood, remove stains and whitening effect.

【技术实现步骤摘要】
一种祛皱抗氧化的生物面膜的制备方法及其产品
本专利技术涉及一种制备祛皱抗氧化的生物面膜的方法以及通过所述方法获得的生物面膜产品。特别地，本专利技术涉及采用自体外周血来源的富含血小板的血浆和基质干细胞，添加到胶原蛋白中形成凝胶状或半凝胶状面膜，同时可添加生长因子和抗氧化分子，以及通过所述方法获得的生物面膜产品。本专利技术的生物面膜可用于医学美容，对皮肤具有祛皱、抗氧化、去红血丝、除斑和美白等功效。
技术介绍
目前，市场上生物面膜产品各式各样，已经形成人们普遍接受的大众产品。绝大多数生物面膜使用的主要为化学试剂制备成的水凝胶、由木醋杆菌自然发酵制成的生物纤维、面膜纸或者由无纺布、水晶布等制备而成的面膜产品。其中可能会添加各种营养成分，如深海鱼子、酢液竹炭、蛇毒、蜂毒、胎盘素和激素等，对皮肤具有修护、控油、抗氧化和储水及保水等能力，形成各种的生物面膜产品。本专利技术利用生物分子重组和细胞生物学技术，配合皮肤自我更新功能，有效今肌底细胞间产生相互作用并进行结合。本专利技术的祛皱抗氧化的生物面膜是利用自体富含血小板的血浆和基质干细胞，添加到胶原蛋白中制备成的凝胶状或半凝集状面膜。在生长因子激活之下，促使细胞苏醒及分裂，并以标靶方式修复病变和衰老细胞，从而形成保护膜，即时提升综合御肌能力，今肌肤恢复最佳状态，恢复年轻活力。综上，目前市场上生物面膜对皮肤美容的作用是非常有限，尽管其加入了一些营养成分，但因存放条件都是使得这些营养成分都已经部分或完全失效了。另外生物面膜使用方法也大大影响其功效。为了对皮肤产生更好地祛皱、抗氧化、去红血丝、除斑和美白等作用，本专利技术利用自体来源富含血小板的血浆和基质干细胞的生物学作用，生物学有效期内及时使用，将对皮肤产生最佳的美容作用，并且联合美容物理疗法将产生更好功效。
技术实现思路
为了对皮肤产生更好地祛皱、抗氧化、去红血丝、除斑和美白等作用，本专利技术利用自体来源富含血小板的血浆和基质干细胞的生物学作用，可以高效产生皮肤美容作用，而且联合美容物理疗法将产生更好功效。本专利技术通过采集抗凝外周血获得富含血小板的血浆，抗凝外周血来源单个核细胞培养获得基质干细胞。自体富含血小板血浆富含各种生长因子，其中成纤维细胞生长因子：激发新活细胞，加速组织修复；表皮生长因子：修复上皮细胞，加速血管生长，加快组织修复；转化生长因子：促进血管上皮细胞修复再生；血小板衍生生长因子.产生胶原蛋白，促进血管生长，激活细胞再生；血管内皮生长因子：强力修复组织，产生胶原蛋白，刺激产生透明质酸。本专利技术中基质干细胞是机体存在的重要细胞，具有强的自我增殖能力和多分化潜能，可向骨、软骨、脂肪及肌肉细胞等组织分化的潜能。基质干细胞分泌巨噬细胞集落刺激因子、成纤维细胞生长因子、干细胞因子、转化生长因子-β、脑源性神经生长因子等，这些细胞因子和神经营养因子是细胞得以存活、生长和分化的重要物质。基质干细胞表达血管内皮细胞生长因子受体2(Flk-1)动员内皮祖细胞，和基质干细胞衍生因子-1(SDF-1)也能动员内皮祖细胞，促进缺血部位和创伤性皮肤的血管新生。同时在皮片和皮瓣移植中添加Flk-1可以增加皮片及随意皮瓣的成活面积，在脂肪移植中局部应用Flk-1和SDF-1可以促进移植脂肪的成活率。本专利技术提供了一种祛皱抗氧化的生物面膜的制备方法，其中，所述方法包括通过从自体外周血中获取富含血小板血浆和基质干细胞，添加到胶原蛋白液中，形成胶原蛋白面膜，制备成自体的凝胶状或半凝胶状的生物面膜。本专利技术提供了的自体富含血小板血浆由抽取人自体抗凝外周血，经离心去除红细胞和部分白细胞后获得的富含血小板血浆，将用于制备祛皱抗氧化的生物面膜。优选地，自体抗凝外周血使用肝素和乙二胺四乙酸二钾(EDTA-2K)作为抗凝剂。本专利技术提供了的自体基质干细胞由离心获取自体富含血小板血浆后的血细胞，经淋巴分离液密度梯度离心获得单个核细胞，体外培养获得基质干细胞，将添加到祛皱抗氧化的生物面膜中。所述自体基质干细胞经流式细胞仪高表达Flk-1和SDF-1，即Flk-1+细胞≥90％和SDF-1+细胞≥85％；优选，所述自体基质干细胞表型为Flk-1阳性率为99.78％，以及SDF-1阳性率为88.60％。本专利技术还提供了一种祛皱抗氧化的生物面膜，所述生物面膜包括胶原蛋白中含有自体富含血小板血浆和自体基质干细胞，制备成自体的凝胶状或半凝胶状的生物面膜；其中，祛皱抗氧化的生物面膜优选还加入生长因子和抗氧化分子；其中，生长因子优选为表皮生长因子、碱性成纤维生长因子和角蛋白18中的一种或多种；抗氧化分子优选为超氧化歧化酶、胎盘提取多肽素和银杏叶提取液中的一种或多种。本专利技术还提供了一种祛皱抗氧化的生物面膜，其中，其主要由如下成分组成：1)0.5g-5g胶原蛋白或1g-20g即溶型胶原蛋白；2)1-50ml所述自体富含血小板血浆；3)1-20×106所述自体基质干细胞；凝胶状生物面膜在无菌塑料模具中，放入塑料袋中真空包装，形成产品。半凝胶状生物面膜装入10ml无菌的塑料针管中，可用盖子密封包装，形成产品。该生物面膜产品保存在4℃条件下，保质期为48小时。根据本专利技术所述的祛皱抗氧化的生物面膜产品，其特征在于，所述祛皱抗氧化的生物面膜，优选地生长因子，即生长因子为表皮生长因子、碱性成纤维生长因子和角蛋白18等，含有一种或一种以上。所述祛皱抗氧化的生物面膜产品，优选地抗氧化分子为超氧化歧化酶、胎盘提取多肽素和银杏叶提取液等，含有一种或一种以上。通过本专利技术的方法，通过获取的自体富含血小板血浆和自体基质干细胞，并含有一种或多种生长因子，在胶原蛋白中制备成的祛皱抗氧化的生物面膜。由本专利技术提供的方法得到含有自体富含血小板血浆和自体基质干细胞或生长因子的胶原蛋白面膜，能够对皮肤具有祛皱、抗氧化、皮肤修复、除斑和抗衰老。特别当联合物理美容疗法使用时，将产生更佳的美容疗效，即高温深蓝射频美容疗法、微针疗法等，能打开表皮毛孔或微创表皮皮层，为营养因子和细胞进入皮肤的通道。附图说明图1表示由实施例1所制备的基质干细胞检测Flk-1和SDF1表型的细胞流式图。图2表示由实施例3制备的自体凝胶状生物面膜的图片。图3表示1名女性经由实施例3所制备半凝胶生物面膜1个疗程美容前后脸部皱纹改善的图片。具体实施方式本专利技术提供了一种祛皱抗氧化的生物面膜的制备方法，其中，所述方法包括通过从自体外周血中获取自体富含血小板血浆和自体基质干细胞，添加到胶原蛋白液中，形成胶原蛋白面膜，制备成自体的凝胶状或半凝胶状的生物面膜。自体富含血小板血浆由抽取人自体抗凝外周血，经离心去除红细胞和部分白细胞后获得的富含血小板血浆；自体基质干细胞由抽取人自体抗凝外周血，经淋巴分离液密度梯度离心获得单个核细胞，体外培养获得基质干细胞，两者将添加到祛皱抗氧化的生物面膜中。自体富含血小板血浆获取是由抽取人50-200ml肝素或EDTA抗凝外周血，经1000转每分钟离心10分钟得到的10-80ml血浆，再次3000转每分钟离心10分钟获得10-80ml富含血小板血浆，放置4℃冰箱存放备用。自体基质干细胞由离心获取自体富含血小板血浆后的40-120ml血细胞，用一倍体积的1×PBS(pH值7.4)稀释后经淋巴分离液密度梯度离心获得单个核细胞，用α-MEM培养基(含1-10％胎本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种祛皱抗氧化的自体生物面膜的制备方法，其特征在于，所述方法包括通过从自体外周血中获取自体富含血小板的血浆和自体基质干细胞；然后添加到胶原蛋白液中，形成胶原蛋白面膜，制备成自体的凝胶状或半凝胶状的生物面膜；所述自体基质干细胞经流式细胞仪，其高表达Flk‑1和SDF‑1，Flk‑1

【技术特征摘要】
1.一种祛皱抗氧化的自体生物面膜的制备方法，其特征在于，所述方法包括通过从自体外周血中获取自体富含血小板的血浆和自体基质干细胞；然后添加到胶原蛋白液中，形成胶原蛋白面膜，制备成自体的凝胶状或半凝胶状的生物面膜；所述自体基质干细胞经流式细胞仪，其高表达Flk-1和SDF-1，Flk-1+细胞≥90％和SDF-1+细胞≥85％。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述自体富含血小板的血浆由抽取人50-200ml肝素或EDTA抗凝外周血，经1000转每分钟离心10分钟得到的10-80ml血浆，再次3000转每分钟离心10分钟获得10-80ml富含血小板血浆，放置4℃冰箱存放备用。3.根据权利要求1-2任一项所述的方法，其特征在于，所述自体基质干细胞由离心获取自体富含血小板血浆后的40-120ml血细胞，经Ficoll密度分离液密度梯度离心获得单个核细胞，用α-MEM培养基按1-10×106细胞/ml加入10-20ml到75cm2培养瓶中，于37℃，5％CO2培养箱中培养；每间隔2天时间更换一次新鲜培养基，当基质干细胞生长融合达到90％以上，用0.5-2ml质量体积比为0.25％胰酶消化1-30分钟；消化后1000转每分钟离心5分钟收集基质干细胞；离心后用1ml生理盐水重悬，计数，即获得基质干细胞，放置冰箱4℃存放备用；获得的基质干细胞经流式细胞仪高表达血管内皮细胞生长因子受体2(vascularendothelialgrowthfactor(VEGF)receptor2，Flk-1)和基质干细胞衍生因子-1(stromalcellderivedfactor1，SDF-1)，即Flk-1+细胞≥90％和SDF-1+细胞≥85％；优选，所述α-MEM培养基，其含1-10％胎牛血清、1-200ng/ml重组人胰岛素样生长因子-1、1-100ng/ml重组人干细胞生长因子、1-50ng/ml重组人表皮生长因子和1-50ng/ml重组人碱性成纤维细胞生长因子；所述胰酶含质量体积比0.01％EDTA。4.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋静，
申请(专利权)人：北京众兴华纳生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11