一种基于荧光定量PCR鉴定啮齿类螺杆菌的引物、试剂盒及鉴定方法技术

本发明专利技术提供了一种基于荧光定量PCR鉴定啮齿类螺杆菌的引物、试剂盒及鉴定方法，属于分子生物学技术领域。本发明专利技术提供的引物适用于16S rRNA荧光定量PCR扩增，并且准确地从肝螺杆菌、胆螺杆菌等多种螺杆菌中鉴别出啮齿类螺杆菌，特异性达100％。本发明专利技术还提供了一种基于荧光定量PCR鉴定啮齿类螺杆菌的试剂盒及其鉴别方法，所述试剂盒方便准确地鉴定啮齿类螺杆菌的存在，操作简便，无需进行琼脂糖凝胶电泳，只需荧光定量PCR仪即可完成，实现快速、大通量诊断和检测，降低了鉴别时间和检测成本，研究表明本发明专利技术提供的这一荧光PCR检测方法，灵敏度达30拷贝。

Primer, kit and identification method for identification of rodent Helicobacter pylori based on fluorescent quantitative PCR

The invention provides a primer, a kit and an identification method for identification of a rodent Helicobacter based on fluorescent quantitative PCR, and belongs to the technical field of molecular biology. The invention provides a primer for 16S rRNA fluorescence quantitative PCR amplification, and accurately from Helicobacter hepaticus, bile and other identified rodent Helicobacter pylori, the specificity was 100%. The invention also provides a kit for fluorescence quantitative PCR identification of rodent Helicobacter and identification method based on the kit to facilitate accurate identification of rodent Helicobacter, simple operation, without the need for agarose gel electrophoresis, fluorescence quantitative PCR instrument only can be completed, to achieve rapid and high throughput diagnosis the identification and detection, reduce the time and cost of testing, the study shows that the fluorescence PCR detection method provided by the invention, the sensitivity was 30 copies.

【技术实现步骤摘要】
一种基于荧光定量PCR鉴定啮齿类螺杆菌的引物、试剂盒及鉴定方法
本专利技术属于分子生物学
，具体涉及一种基于荧光定量PCR鉴定啮齿类螺杆菌的引物、试剂盒及鉴定方法。
技术介绍
自1992年首次从小鼠中分离得到小家鼠类螺杆菌后，到目前为止已分离到至少13种啮齿类动物螺杆菌，其中胆汁螺杆菌(Helicobacterbilis)、肝螺杆菌(helicobacterhepaticus)、啮齿类螺杆菌(helicobacterrodentium)为较为重要的感染哨齿类动物的螺杆菌，主要存在于消化道，包括盲肠、结肠及肝胆等器官。啮齿动物螺杆菌会引起动物疾病，更易以隐性感染形式存在于免疫缺陷型动物中，感染啮齿类螺杆菌会导致小鼠肝炎、盲肠结肠炎等多种肠肝疾病，另外一同感染啮齿类螺杆菌和胆汁螺杆菌会引起小鼠腹泻。因此，若在科研或生物安全性评价等试验中采用此类实验动物，定会对实验数据造成影响，结果缺乏可靠性。啮齿类螺杆菌为螺杆菌属，而螺杆菌属的菌种在菌落、菌体形态上差异小、十分相似，采用传统的生理生化特性的基础进行分类鉴定有一定困难，同时，由于螺旋杆菌需在微氧环境中生长，所需设备特殊，营养要求严苛本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于荧光定量PCR鉴定啮齿类螺杆菌用引物，其特征在于，所述引物包括正向引物和反向引物；所述正向引物具有如序列表中SEQ ID No.1所示的核苷酸序列；所述反向引物具有如序列表中SEQ ID No.2所示的核苷酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种基于荧光定量PCR鉴定啮齿类螺杆菌用引物，其特征在于，所述引物包括正向引物和反向引物；所述正向引物具有如序列表中SEQIDNo.1所示的核苷酸序列；所述反向引物具有如序列表中SEQIDNo.2所示的核苷酸序列。2.一种基于荧光定量PCR鉴定啮齿类螺杆菌的试剂盒，其特征在于，包括SYBR荧光染料Taq酶预混液、荧光误差校正液、阳性质控品和权利要求1所述的引物。3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述的引物的质量浓度为10μmol/L。4.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述阳性质控品的质量浓度为108ng/μL。5.根据权利要求3或4所述的试剂盒，其特征在于，SYBR荧光染料Taq酶预混液5ml、荧光误差校正液200μL、阳性质控品2ml和所述的正向引物400μL和所述的反向引物400μL。6.基于权利要求2～5任意一项所述的试剂盒鉴别啮齿类螺杆菌的鉴...

【专利技术属性】
技术研发人员：张泉，孙靖谕，谢灵志，于宁，钱淼，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32