一种利用鱼卵母细胞提取物诱导成纤维细胞重编程为成骨细胞样细胞的试剂盒及方法技术

本发明专利技术涉及一种利用鱼卵母细胞提取物诱导成纤维细胞重编程为成骨细胞样细胞的试剂盒及方法，属于细胞生物学技术和再生医学领域。该试剂盒和方法针对当前将成纤维细胞转分化为成骨细胞样细胞技术普遍存在的需载体介导和转基因操作、实验步骤复杂、实验技术水平要求高、产生的成骨细胞安全性较差等问题，发明专利技术了一种非载体介导的、利用鱼卵母细胞提取物直接诱导成纤维细胞重编程为成骨细胞样细胞的方法和试剂盒。由于通过该方法及试剂盒获得的成骨细胞样细胞不涉及载体介导和外源基因插入，因此不存在载体构建环节，实验操作相对简单，产生的成骨细胞样细胞安全性也相对较好，在骨组织工程和再生医学领域具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种利用鱼卵母细胞提取物诱导成纤维细胞重编程为成骨细胞样细胞的试剂盒及方法
本专利技术涉及一种利用鱼卵母细胞提取物诱导成纤维细胞重编程为成骨细胞样细胞的试剂盒及方法，属于细胞生物学技术和再生医学领域。
技术介绍
近年来，我国每年由于外伤、感染及肿瘤等原因造成机体骨缺损或骨损伤的患者达数百万例。自体骨移植不但给患者造成额外的身体创伤，同时给患者带来严重的心理和生理负担，而异体骨虽然可成为临床上自体骨移植的替代材料，但由于供体有限，难以大幅应用，同时异体骨移植还存在免疫排斥反应、并可能存在传染疾病的风险等问题，因而也难以成为骨病治疗的理想策略。随着骨组织工程和再生医学的发展，将成骨细胞与生物支架结合，通过体外培养、构建成复合材料后移植到骨损伤部位，随着生物支架的不断降解和吸收，成骨细胞不断增殖并分泌细胞因子和基质，从而实现对骨损伤部位的治疗和修复（VacantiCA,etal.,PlastReconstrSurg,1991,88(5):753-759;CaoY,etal.,TransplantProc,1994,26(6):3390-3392）。在骨组织工程中，获得较为理想的种子细胞是实本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用鱼卵母细胞提取物诱导成纤维细胞重编程为成骨细胞样细胞的试剂盒，其特征在于该试剂盒的成份包括：鱼卵母细胞提取物、基础培养基、胎牛血清、青霉素和链霉素、抗坏血酸、β‑甘油磷酸钠、地塞米松、茜素红染液。

【技术特征摘要】
1.一种利用鱼卵母细胞提取物诱导成纤维细胞重编程为成骨细胞样细胞的试剂盒，其特征在于该试剂盒的成份包括：鱼卵母细胞提取物、基础培养基、胎牛血清、青霉素和链霉素、抗坏血酸、β-甘油磷酸钠、地塞米松、茜素红染液。2.一种采用权利要求1所述一种利用鱼卵母细胞提取物诱导成纤维细胞重编程为成骨细胞样细胞的试剂盒，其特征在于，鱼卵母细胞提取物蛋白浓度为10mg/ml，成骨细胞诱导分化培养基包含下列成份：基础培养基，10%的胎牛血清，10nmol/L的地塞米松，50μmol/L的抗坏血酸，10mmol/L的β-甘油磷酸钠，100U/ml的青霉素和100mg/L的链霉素。3.一种利用鱼卵母细胞提取物诱导成纤维细胞重编程为成骨细胞样细胞的方法，其特征在于包括如下步骤：（1）成纤维细胞的制备，包括成纤维细胞的分离、鉴定和培养；（2）鱼卵母细胞提取物的制备，包括低温条件下鱼卵母细胞的研磨、过滤和蛋白浓度检测；（3）成纤维细胞的鱼卵母细胞...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱向情，潘兴华，陈强，
申请(专利权)人：陈强，
类型：发明
国别省市：云南,53