【技术实现步骤摘要】
一种产菊粉内切酶的枯草芽孢杆菌JG-1及其制备方法和应用
本专利技术涉及基因工程和发酵工程
,具体涉及一种产菊粉内切酶的枯草芽孢杆菌JG-1及其制备方法和应用。
技术介绍
低聚果糖(Fructooligosaccharide)又称果寡糖或蔗果三糖族低聚糖,是一类双歧杆菌增殖因子,具有低热、稳定、安全无毒等特性。它是一种非消化性低聚糖,不能被动物本身分泌的消化酶水解,到达肠道后可选择性地被双歧杆菌、乳酸杆菌利用,产生对动物生长有益的有机酸和必需的维生素等;降低肠内pH值,抑制有害菌(如大肠杆菌、梭菌及腐败菌等)的增殖,减少肠道内腐败性代谢产物的生成,从而提高动物机体免疫力,改善健康状况,达到提高营养物质利用率,增强动物生产性能的目的。它是公认的益生元代表,因而受到广泛关注。糖苷水解酶第32家族包括内切菊粉酶、外切菊粉酶、蔗糖酶及内切β-2,6-果聚糖酶等,主要催化水解含β-2,6果糖苷键、β-2,1果糖苷键或β-D果糖苷键的化合物,在理论研究方面具有一定的意义,在饲料、食品、生物燃料、洗涤、制糖和医药等领域具有潜在的应用前景。因此,以菊粉为底物,在菊粉内切酶的 ...
【技术保护点】
一种产菊粉内切酶的枯草芽孢杆菌JG‑1,其特征在于,该枯草芽孢杆菌JG‑1以pMA05大肠‑枯草穿梭质粒为骨架构建质粒pMA05‑
【技术特征摘要】
1.一种产菊粉内切酶的枯草芽孢杆菌JG-1,其特征在于,该枯草芽孢杆菌JG-1以pMA05大肠-枯草穿梭质粒为骨架构建质粒pMA05-inu,然后通过化学转化法转化进Bacillsusubtilis168中,通过质粒pMA05-inu在枯草芽孢杆菌中的卡那霉素抗性筛选标记筛选出的阳性转化子即为产菊粉内切酶的枯草芽孢杆菌JG-1。2.权利要求1所述的产菊粉内切酶的枯草芽孢杆菌JG-1的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:菊粉内切酶编码基因的获得:选定霉味假单胞菌中的菊粉内切酶的CDS序列,设计引物,调取菊粉内切酶的酶基因inu;所述引物序列如SEQIDNO:1和SEQIDNO:2所示;表达载体pMA05-inu的构建:以大肠-枯草穿梭质粒pMA05为质粒骨架,利用限制性内切酶NdeI和BamHI双切质粒pMA05,随后采用一步克隆的方法将目的片段和双酶切质粒连接,形成质粒pMA05-inu;重组菌株的构建:将步骤2)构建验证正确的质粒pMA05-inu通过化学转...
【专利技术属性】
技术研发人员:高健,姜瑞凡,徐虹,张丽,薛锋,倪浩,黄巍巍,
申请(专利权)人:盐城工学院,
类型:发明
国别省市:江苏,32
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