使用α 9 整联蛋白拮抗剂和CXCR4拮抗剂的HSC的迁移和释放制造技术

造血干细胞动员是一种将造血干细胞刺激出骨髓空间的过程，在HSC可以动员之前，它们必须从它们所位于并且通过粘着相互作用而保留其中的BM干细胞龛被迁移和释放。因此，在本发明专利技术的一个方面，提供了一种用于在体内或离体增强HSC及其前体和祖细胞从BM干细胞结合配体迁移的方法，所述方法包括在体内或离体向BM干细胞龛施用有效量的α9整联蛋白或其活性部分的拮抗剂和CXCR4拮抗剂或其活性部分。一旦动员到外周血(PB)，HSC可以被收集用于移植。增强HSC动员的方法也可以改善血液病的治疗。

Migration and release of HSC using alpha 9 integrin antagonists and CXCR4 antagonists

Hematopoietic stem cell mobilization is a hematopoietic stem cell will stimulate bone marrow space, before HSC can be mobilized, they must be from which they are located and through interaction and adhesion to preserve the BM stem cell niche is the migration and release. Therefore, in one aspect of the invention, for in vivo or in vitro enhanced HSC and its precursor stem cells and progenitor cells combined with ligand migration from BM is provided, the method includes in vivo or in vitro to BM stem cell niche in administering an effective amount of alpha 9 integrin or its activity part of the antagonist and CXCR4 antagonist or its active part. Once mobilized to peripheral blood (PB), HSC can be collected for transplantation. Enhanced HSC mobilization can also improve the treatment of hematologic diseases.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】使用α9整联蛋白拮抗剂和CXCR4拮抗剂的HSC的迁移和释放
本专利技术涉及增强造血干细胞(HSC)及其前体和祖细胞从骨髓(BM)干细胞龛的迁移和释放，以及用于增强HSC及它们的前体及其祖细胞从BM和干细胞龛的迁移和释放的方法。本专利技术还涉及用于增强HSC及它们的前体及其祖细胞的迁移和释放的组合物。本专利技术包括已经通过所述方法和组合物迁移和释放的HSC及它们的前体和祖细胞的细胞群以及所述细胞群用于治疗血液病和HSC及其前体和祖细胞的移植的用途。专利技术背景BM干细胞龛内的HSC调节和保留是通过HSC表面受体与周围细胞如成骨细胞和窦状内皮细胞所表达的其相应配体之间的相互作用来介导的。使用功能测定及体内和离体成像进行的BM内的HSC的空间分布分析表明它们优先集中于骨内膜龛内的最靠近于骨/BM界面之处。值得注意的是，与经典的Lin-Sca-1+ckit+CD150+CD48-表型相同、但与骨内膜BM分离的HSC相对于从中央髓腔分离的HSC具有更大的归龛潜力和增强的长期、多谱系造血重构。因此，用于动员的骨内膜HSC的治疗靶向应提供更好的移植结果。BM血生成位置涉及原始造血细胞与基质细本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于在体内或离体增强HSC及其前体和其祖细胞从BM干细胞结合配体迁移的方法，所述方法包括在体内或离体向BM干细胞龛施用有效量的α9整联蛋白或其活性部分的拮抗剂和CXCR4拮抗剂或其活性部分。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.12.12 AU 20149050391.用于在体内或离体增强HSC及其前体和其祖细胞从BM干细胞结合配体迁移的方法，所述方法包括在体内或离体向BM干细胞龛施用有效量的α9整联蛋白或其活性部分的拮抗剂和CXCR4拮抗剂或其活性部分。2.根据权利要求1的方法，其中所述方法还增强HSC及其前体和其祖细胞从BM干细胞龛的释放。3.根据权利要求1或2的的方法，其中所述方法还增强HSC从BM干细胞龛的动员。4.根据权利要求1至3中任意一项的方法，其中所述α9整联蛋白是α9β1整联蛋白或其活性部分。5.根据权利要求1至4中任意一项的方法，其还包括施用α4整联蛋白或其活性部分的拮抗剂。6.根据权利要求5的方法，其中所述α4整联蛋白是α4β1或其活性部分的拮抗剂。7.根据权利要求1至6中任意一项的方法，其中所述拮抗剂与α9和α4交叉反应,并任选地与α9β1和α4β1交叉反应。8.根据权利要求1至7中任意一项的方法，其中所述拮抗剂是具有下式的式(I)的化合物或其可药用盐:其中X选自键和–SO2–；R1选自H、烷基、任选地被取代的芳基和任选地被取代的杂芳基；R2选自H和取代基；R3选自H和C1-C4烷基；R4选自H和–OR6；R5选自H和–OR7；条件是当R4是H时，则R5是–OR7，且当R4是–OR6时，则R5是H；R6选自H、C1-C4烷基、–(CH2)n-R8、–C(O)R9和–C(O)NR10R11；R7选自H、C1-C4烷基、–(CH2)n-R12、–C(O)R13和–C(O)NR14R15；R8选自任选地被取代的烷基、任选地被取代的芳基、任选地被取代的杂芳基、–O(C1-C4烷基)、–C(O)-(C1-C4烷基)、–C(O)O-(C1-C4烷基)和–CN；R9选自任选地被取代的环烷基、任选地被取代的杂环烷基、任选地被取代的芳基和任选地被取代的杂芳基；R10和R11与它们所连接的氮一起形成任选地被取代的杂环烷基环；R12选自任选地被取代的烷基、任选地被取代的芳基、任选地被取代的杂芳基、–O(C1-C4烷基)、–C(O)-(C1-C4烷基)、–C(O)O-(C1-C4烷基)和–CN；R13选自任选地被取代的环烷基、任选地被取代的芳基和任选地被取代的杂芳基；R14和R15各自独立地选自C1-C4烷基和任选地被取代的芳基，或R14和R15与它们所连接的氮一起形成任选地被取代的杂环烷基环；且n每次出现时为1至3范围内的整数。9.根据权利要求8的方法，其中:R4是H；且R5是–OR7。10.根据权利要求8或权利要求9的方法，其中:R7选自C1-C4烷基、–(CH2)n-R12、–C(O)R13和–C(O)NR14R15；R12选自C1-C4烷基、–CN、–O(C1-C4烷基)和任选地被取代的杂芳基；R13选自任选地被取代的环烷基、任选地被取代的芳基和任选地被取代的杂芳基；R14和R15各自独立地选自C1-C4烷基、任选地被取代的芳基或R14和R15与它们所连接的氮一起形成任选地被取代的杂环烷基环；且n是1或2。11.根据权利要求8至10中任意一项的方法，其中:R7选自C1-C4烷基、–(CH2)n-R12、–C(O)R13和–C(O)NR14R15；R12选自C1-C4烷基、–CN、–O(C1-C4烷基)和5-四唑基；R13是2-吡咯基；R14和R15各自独立地是C1-C4烷基或R14和R15与它们所连接的氮一起形成任选地被取代的吡咯烷基或吗啉基环；且n是1或2。12.根据权利要求8至11中任意一项的方法，其中式(I)的化合物具有以下的式(Ia):或其可药用盐。13.根据权利要求8至12中任意一项的方法，其中R1为任选地被取代的苯基。14.根据权利要求13的方法，其中所述苯基任选地被至少一个卤素基团取代。15.根据权利要求8至13中任意一项的方法，其中式(I)的化合物具有以下的式(Ib):或其可药用盐。16.根据权利要求15的方法，其中式(I)的化合物具有以下的式(Ic):或其可药用盐。17.根据权利要求8至12中任意一项的方法，其中R1是任选地被取代的吡啶基。18.根据权利要求17的方法，其中式(I)的化合物具有以下的式(Id):或其可药用盐。19.根据权利要求18的方法，其中式(I)的化合物具有以下的式(Ie):或其可药用盐。20.根据权利要求1至19中任意一项的方法，其中所述CXCR4拮抗剂或其活性部分选自bicyclam衍生物、四氢喹啉衍生物、环肽、基于对亚二甲苯二胺的衍生物、异硫脲衍生物和POL6326、POL5551、CCTE-9908和TG-0054，且任选地，CXCR4拮抗剂是AMD3100。21.根据权利要求1至20中任意一项的方法，其中将α9整联蛋白或其活性部分的拮抗剂和CXCR4拮抗剂或其活性部分组合、同时或依次施用。22.根据权利要求1至21中任意一项的方法，其中在没有G-CSF的情况下施用所述拮抗剂和CXCR4拮抗剂或其活性部分。23.根据权利要求1至22中任意一项的方法，其中静脉内、皮内、皮下、肌内、透皮、腹膜内或透粘膜施用所述α9整联蛋白拮抗剂和CXCR4拮抗剂或其活性部分；任选地静脉内或皮下施用α9整联蛋白拮抗剂和CXCR4拮抗剂或其活性部分。24.根据权利要求5至23中任意一项的方法，其中同时、连续或组合施用所述α9整联蛋白拮抗剂和CXCR4拮抗剂或其活性部分与α4整联蛋白拮抗剂。25.根据权利要求1至24中任意一项的方法，其中所述HSC及其前体和祖细胞源自骨髓。26.根据权利要求25的方法，其中所述HSC及其前体和祖细胞源自干细胞龛，任选地源自骨内膜龛。27.根据权利要求25或26的方法，用于在体内或离体增强HPC从BM干细胞结合配体迁移。28.根据权利要求1至27中任意一项的方法，其中所述HSC及其前体和祖细胞为长期再生HSC及其前体和祖细胞，且任选地选自CD34+细胞,CD38+,CD90+,CD133+,CD34+CD38-细胞、谱系-定型CD34-细胞或CD34+CD38+细胞；任选地CD34+或CD34+CD38-细胞。29.用于增强HSC及其前体和其祖细胞从BM干细胞结合配体的迁移的组合物，所述组合物包含α9整联蛋白或其活性部分的拮抗剂和CXCR4拮抗剂或其活性部分。30.根据权利要求29的组合物，其还增强HSC及其前体和祖细胞从BM干细胞结合配体的释放。31.根据权利要求29或30的组合物，其还增强从BM干细胞龛至PB的HSC的动员，任选地从BM干细胞龛至PB的HPC的动员。32.根据权利要求29至31中任意一项的组合物，其中所述α9整联蛋白是α9β1整联蛋白或其活性部分。33.根据权利要求29至32中任意一项的组合物，其还包含α4整联蛋白或其活性部分的拮抗剂。34.根据权利要求33的组合物，其中所述α4整联蛋白是α4β1的拮抗剂或其活性部分。35.根据权利要求29至34中任意一项的组合物，其中所述拮抗剂与α9和α4交叉反应，任选地与α9β1和α4β1交叉反应。36.根据权利要求29至35中任意一项的组合物，其中所述α9整联蛋白拮抗剂是具有下式的式(I)的化合物或其可药用盐:其中X选自键和–SO2–；R1选自H、烷基、任选地被取代的芳基和任选地被取代的杂芳基；R2选自H和取代基；R3选自H和C1-C4烷基；R4选自H和–OR6；R5选自H和–OR7；条件是当R4是H时，则R5是–OR7，且当R4是–OR6时，则R5是H；R6选自H、C1-C4烷基、–(CH2)n-R8、–C(O)R9和–C(O)NR10R11；R7选自H、C1-C4烷基、–(CH2)n-R12、–C(O)R13和–C(O)NR14R15；R8选自任选地被取代的烷基、任选地被取代的芳基、任选地被取代的杂芳基、–O(C1-C4烷基)、–C(O)-(C1-C4烷基)、–C(O)O-(C1-C4烷基)和–CN；R9选自任选地被取代的环烷基、任选地被取代的杂环烷基、任选地被取代的芳基和任选地被取代的杂芳基；R10和R11与它们所连接的氮一起形成任选地被取代的杂环烷基环；R12选自任选地被取代的烷基、任选地被取代的芳基、任选地被取代的杂芳基、–O(C1-C4烷基)、–C(O)-(C1-C4烷基)、–C(O)O-(C1-C4烷基)和–CN；R13选自任选地被取代的环烷基、任选地被取代的芳基和任选地被取代的杂芳基；R14和R15各自独立地选自C1-C4烷基和任选地被取代的芳基，或R14和R15与它们所连接的氮一起形成任选地被取代的杂环烷基环；且n每次出现时为1至3范围内的整数。37.根据权利要求36的组合物，其中:R4是H；且R5是–OR7。38.根据权利要求29或37的组合物，其中:R7选自C1-C4烷基、–(CH2)n-R12、–C(O)R13和–C(O)NR14R15；R12选自–CN、–O(C1-C4烷基)和任选地被取代的杂芳基；R13选自任选地被取代的环烷基、任选地被取代的芳基和任选地被取代的杂芳基；R14和R15各自独立地选自C1-C4烷基、任选地被取代的芳基或R14和R15与它们所连接的氮一起形成任选地被取代的杂环烷基环；且n是1或2。39.根据权利要求29至38中任意一项的组合物，其中:R7选自C1-C4烷基、–(CH2)n-R12、–C(O)R13和–C(O)NR14R15；R12选自C1-C4烷基、–C...

【专利技术属性】
技术研发人员：S·K·尼尔森，D·N·海洛克，B·B·M·曹，
申请(专利权)人：联邦科学和工业研究组织，
类型：发明
国别省市：澳大利亚,AU