The invention relates to the technical field of biological chip, in particular to a small molecule chip, its construction method, its application and test methods; small molecular chip provided by the invention comprises light crosslinking chip and small molecule chemical bonding, which small molecules can bind to BChE protein or BACE1 protein; the invention also provides the construction method of the small molecular chip, the application of the method of small molecules fixed high efficiency, good fixing effect; the invention also provides a method to detect BChE protein or BACE1 protein using the small molecule chip, this method has the advantages of simple operation, accurate detection results. The small molecule chip provided by the invention detects the BChE protein or BACE1 protein in the sample to be tested, and has the advantages of low cost and stable performance.
【技术实现步骤摘要】
一种小分子芯片、其构建方法、其应用及其检测方法
本专利技术涉及生物芯片
,特别涉及一种小分子芯片、其构建方法、其应用及其检测方法。
技术介绍
小分子芯片也称小分子微阵列,是生物芯片研究的重要分支之一。自从哈佛大学Schreiber课题组1999年首次报道小分子微阵列以来,小分子芯片得到了广泛的应用。目前小分子芯片的研究主要有两个方向,一是基于小分子芯片载体表面化学修饰及小分子化合物固定化策略为主的基础性研究,二是拓展小分子芯片的应用范围。近年来,小分子芯片已经成功应用于各种蛋白质配体的筛选、蛋白质与小分子之间的相互作用、酶的抑制剂筛选、酶活性图谱研究、高通量药物筛选、食品和临床检测及细胞表面与小分子的相互关系等领域。阿尔茨海默氏症又称早老性痴呆,是威胁人类寿命的一种常见疾病。它们主要影响六十岁以上的老年人的认知和行为能力,患病周期可长达数十年。目前人们对于阿尔茨海默氏症的基本病因仍未完全了解。研究发现,丁酰胆碱脂酶(BChE蛋白)和人β位淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1蛋白)均与阿尔茨海默氏病有关,因此,检测BChE蛋白和BACE1蛋白对于科研具有重要的意义。现有技术中,主要采用Elisa法来检测BChE蛋白和BACE1蛋白。此方法首先采用BChE蛋白和BACE1蛋白生产抗体,利用抗原与抗体的特异反应来检测待测样品中的BChE蛋白和BACE1蛋白。此方法灵敏度高、强,但也具有一定的缺点。例如,Elisa试剂盒中所采用的抗体制备过程复杂,生产成本高;且抗体易变性失活,性能不稳定,运输和存储成本也较高。针对以上缺点,研发一种成本低廉,性能稳定的检测BC ...
【技术保护点】
一种小分子芯片,其特征在于,由光交联芯片和小分子化合物组成,所述小分子化合物与所述光交联芯片化学键合;其中,所述小分子化合物包含2‑(1‑(2,3‑二氮杂萘基))肼羧酸乙酯盐酸盐、6‑甲基‑2‑(2‑氨基乙氧基)甲基‑4‑(2‑氯苯基)‑1,4‑二氢‑3,5‑吡啶二甲酸甲乙酯、(2S,5R,6R)‑3,3‑二甲基‑6‑(2‑苯乙酰氨基)‑7‑氧代‑4‑硫杂‑1‑氮杂双环[3.2.0]庚烷‑2‑甲酸钠盐或4‑氨基‑2‑羟基苯甲酸中的任意一种或两者以上的化合物;和/或;N‑(3‑氯‑4‑(3‑氟苯甲氧基))苯基‑6‑(5‑((2‑甲磺酰基乙胺基)甲基)呋喃‑2‑基)喹唑啉‑4‑胺、三环癸胺或(4‑(2‑氯‑4‑硝基苯基)哌啶‑1‑基)(5‑甲基‑3‑苯基异噁唑‑4‑基)酮中的任意一种或两者以上的化合物。
【技术特征摘要】
1.一种小分子芯片,其特征在于,由光交联芯片和小分子化合物组成,所述小分子化合物与所述光交联芯片化学键合;其中,所述小分子化合物包含2-(1-(2,3-二氮杂萘基))肼羧酸乙酯盐酸盐、6-甲基-2-(2-氨基乙氧基)甲基-4-(2-氯苯基)-1,4-二氢-3,5-吡啶二甲酸甲乙酯、(2S,5R,6R)-3,3-二甲基-6-(2-苯乙酰氨基)-7-氧代-4-硫杂-1-氮杂双环[3.2.0]庚烷-2-甲酸钠盐或4-氨基-2-羟基苯甲酸中的任意一种或两者以上的化合物;和/或;N-(3-氯-4-(3-氟苯甲氧基))苯基-6-(5-((2-甲磺酰基乙胺基)甲基)呋喃-2-基)喹唑啉-4-胺、三环癸胺或(4-(2-氯-4-硝基苯基)哌啶-1-基)(5-甲基-3-苯基异噁唑-4-基)酮中的任意一种或两者以上的化合物。2.根据权利要求1所述的小分子芯片,其特征在于,所述光交联芯片还与空白对照化学键合。3.根据权利要求1或2所述的小分子芯片,其特征在于,所述光交联芯片为二维光交联芯片或三维光交联芯片。4.根据权利要求3所述的小分子芯片,其特征在于,所述二维光交联芯片包括固体支持物、两端修饰的聚乙二醇和光交联剂;所述两端修饰的聚乙二醇为一端由铆定基团修饰,另一端由结合基团修饰的聚乙二醇,所述固体支持物与所述铆定基团连接,所述光交联剂与所述结合基团连接;所述铆定基团选自-SH、-S-S-或-SiCl3;所述结合基团选自-COOH、-OH、-NH2或-OCH3。5.根据权利要求3所述的小分子芯片,其特征在于,所述三维光交联芯片包括固体支持物、引发组合物、引发单体和光交联剂;所述引发单体通过所述引发组合物与所述固体支持物连接;所述光交联剂与所述引发单体连接,所述引发组合物包括引发剂和稀释剂,所述引发剂为双硫醇引发剂。6.一种如权利要求1或2所述的小分子芯片的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:取所述小分子化合物与所述光交联芯片混合,干燥,光交联,清洗,干燥,得到芯片,封闭未结合位点,清洗,干燥,即得。7.根据权利要求6所述的构建方法,其特征在于,所述封闭未结合位点具体为:取所述芯片与浓度为1mol/L、pH值为8.5的乙醇胺溶液混合。8.一种如权利要求1或2所述的小分子芯片在制备检测丁酰胆碱脂酶或人β位淀粉样前体蛋白裂解酶1产品中的应用。9.一种如权利要...
【专利技术属性】
技术研发人员:赵智,张振伟,何建安,彭开美,祁婷婷,朱劲松,
申请(专利权)人:广州高通生物技术有限公司,
类型:发明
国别省市:广东,44
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