The invention discloses a method for application of high performance liquid chromatographic method for the simultaneous determination of PHYTOECDYSONES substances, which comprises the following steps: using a, YMC250 * 4.6mm, S-5 B, m column; using the methanol water mobile phase gradient elution; C, flow rate: 1.0mL / min, sample volume: 20 L, column temperature: 38 C; D, wavelength: 260nm, scanning wavelength: 200-600nm. The invention has the advantages of simple operation, fast separation, high sensitivity, no need to replace the chromatographic column, good stability and high repeatability.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于于分析化学领域。涉及一种色谱检测的方法，具体涉及一种应用高效液相色谱法同时测定植物蜕皮激素类物质的检测方法。
技术介绍
蜕皮激素是一类非常重要的植物次生代谢产物，具有昆虫蜕皮活性的天然甾体化合物，在植物抵抗植食性昆虫侵害中扮演着十分重要的角色。因此，阐明植物蜕皮激素的生物合成途径，不仅在基础研究上具有理论意义的突破，而且在生产上为农业害虫防治提供新技术。在植物蜕皮激素生物合成的途径中，20-羟基蜕皮甾酮是其终产物，7-脱氢胆固醇、2-脱氧-20-羟基蜕皮甾酮和α-蜕皮甾酮为中间产物，上述化合物均具有7-烯-6-酮结构，可吸收一定波长的紫外线，故多采用高效液相色谱紫外法检测其含量。此法不仅操作简便、分析速度快，灵敏度高，而且结果稳定性好、重复性高。然而，国内外现有的检测方法均不能在同一色谱条件下同时检测上述多种蜕皮激素类物质。目前，尚未见应用高效液相色谱紫外法同时检测蜕皮激素合成的中间产物和终产物含量的报道，只有对某一种蜕皮激素类物质检测的研究。因...
【技术保护点】
一种应用高效液相色谱法同时测定植物蜕皮激素类物质的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)分别制备20‑羟基蜕皮甾酮、α‑蜕皮甾酮、2‑脱氧‑20‑羟基蜕皮甾酮和7‑脱氢胆固醇的标准溶液和混合标准溶液；(2)取上述制备的标准液母液，按照倍比稀释的方法，配成5种浓度，稀释溶剂为甲醇，经0.45μM微孔滤膜过滤后，各取20μL进样分析；(3)进行高效液相色谱分析：实验仪器：美国沃特世液相色谱仪的系统：四元输液泵P4000、在线真空脱气机、全自动进样器AS1000、二极管阵列检测器UV6000LP；色谱条件：采用YMC250×4.6mm，S‑5μm色谱柱；采用甲醇‑水的流动相进行梯...
【技术特征摘要】
1.一种应用高效液相色谱法同时测定植物蜕皮激素类物质的方法，其特征在于，包括
以下步骤：
(1)分别制备20-羟基蜕皮甾酮、α-蜕皮甾酮、2-脱氧-20-羟基蜕皮甾酮和7-脱氢胆
固醇的标准溶液和混合标准溶液；
(2)取上述制备的标准液母液，按照倍比稀释的方法，配成5种浓度，稀释溶剂为甲
醇，经0.45μM微孔滤膜过滤后，各取20μL进样分析；
(3)进行高效液相色谱分析：
实验仪器：美国沃特世液相色谱仪的系统：四元输液泵P4000、在线真空脱气机、全自
动进样器AS1000、二极管阵列检测器UV6000LP；
色谱条件：采用YMC250...
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