一种附子多糖的制备方法和新用途技术

本发明专利技术提供了一种附子多糖的提取纯化方法，包括以下步骤：a、附子生品或炮制品粉碎，过筛，将粉碎后的粉末加入95％乙醇进行温浸3～6小时，过滤，得到滤渣；b、滤渣加纯化水在80～100℃提取1～3小时，过滤，收集滤液；c、重复b步骤1～2次，合并滤液；d、将合并的溶液在55～65℃蒸发至溶液剩余10～20％，冷却至室温；e、加入95％乙醇，边加边搅拌，直至溶液中最终含醇量为65～85％；f、将e步骤的溶液于4℃静置12～24小时，过滤，弃去滤液，收集滤渣；g、滤渣分别用无水乙醇、丙酮和乙醚各洗涤两次，将剩余沉淀在50～60℃真空干燥，得到附子多糖粉末。本发明专利技术还提供了该提取方法制备的附子多糖及用途。本发明专利技术附子多糖的提取纯化方法简便、提取率高、成本低廉；药效学实验证明本发明专利技术附子多糖提取物具有抗脾虚腹泻和增强免疫的作用。

Preparation method and new use of Monkshood Polysaccharide

The present invention provides a method for extraction and purification of Monkshood Polysaccharide, which comprises the following steps: A, the crude and processed aconite crushed, sieved crushed powder with 95% ethanol immersion 3 ~ 6 hours, filtering, get the filter residue; B, residue with purified water in 80 ~ 100 C from 1 to 3 hours, filtration, the filtrate was collected; C, repeat steps B 1 ~ 2 times, D, merging filtrate; the combined solution at 55 to 65 DEG C to 10 ~ 20% residual solution evaporation, cooling to room temperature; E, adding 95% ethanol, while stirring, until the final solution containing alcohol the volume of 65 to 85%; F, the solution steps for the e at 4 DEG C standing for 12 to 24 hours, filtering, discard the filtrate, collect the residue; G and residue respectively by ethanol, acetone and ether by washing two times, the remaining precipitation in 50 ~ 60 degrees of vacuum drying, get more aconite sugar powder. The invention also provides Monkshood Polysaccharide prepared by the extraction method and uses thereof. The extraction and purification method of the Monkshood Polysaccharide is simple and convenient, the extraction rate is high and the cost is low; the pharmacodynamics experiment proves that the extract of the Monkshood Polysaccharide of the invention has the function of resisting spleen deficiency diarrhea and enhancing immunity.

【技术实现步骤摘要】
一种附子多糖的制备方法和新用途
本专利技术涉及一种附子多糖及其提取纯化方法。
技术介绍
附子为毛茛科植物乌头(AconitumCarmichaeliDexb)子根的加工品，具有回阳救逆、补火助阳、散寒止痛之功，用于亡阳虚脱、肢冷脉微、阳萎、宫冷、心腹冷痛、虚寒吐泻、阴寒水肿等。《汤液本草》中提到：“附子，入手少阳三焦、命门之剂，浮中，无所不至，味辛大热，为阳中之阳”；《本草经读》也提到：“附子，味辛气温，火性迅发，无所不到，故为回阳救逆第一品药”；《本草纲目》记载：“附子性重滞，温脾逐寒”。现代常将附子用于慢性心功能不全、休克、风湿性关节炎、肠炎腹泻等疾病治疗。附子中主要化学成分有生物碱、多糖、苷类等，国内外对附子的研究主要集中在生物碱类成分，对附子中的多糖的研究则较少。多糖是一类天然具有多种生理活性的高分子化合物，中药多糖已成为当今药物研究和保健品开发的重点方向之一。现有研究表明，附子多糖具有较强的生理活性，且无明显毒性，有调节免疫、抗肿瘤、保护心肌细胞、降血脂等作用，其高效低毒的特性已逐渐受到人们关注。在云南楚雄等地区，每年霜降到立春之前吃附子药膳已经成为当地人一种特色美食。当地人认为吃附子药膳可以“可以暖手脚、治疗风湿、驱风寒，强筋健体，一年吃两次，一年之内都不会感冒。”申请号：201610526606.8，专利技术名称：附子多糖在制备治疗动脉粥样硬化药物中的应用，该专利技术是将附子多糖单体应用在制备治疗动脉粥样硬化药物中，制备得到的药物能够有效降低动脉粥样硬化的发病率。该专利技术公开了粗多糖的提取方法：取干燥的附子100克粉碎成细小颗粒，用95％的乙醇进行脱脂处理，然后用1升90～100℃的双蒸馏水提取2小时并过滤。残渣继续用750ml水提取1小时。合并水提取液用旋转式蒸发器减压(50℃)浓缩并过滤。在4℃的条件下将滤液与4倍体积的95％乙醇混合，离心5000转20分钟。把沉淀物再溶于300ml水中，用60ml体积比为5:1的三氯甲烷和正丁醇的混合液进行脱蛋白处理三次。将脱蛋白后的提取物置于双蒸馏水中透析三天，再加入3倍体积95％乙醇进行醇析。用无水乙醇洗涤沉淀，然后再40℃进行真空干燥，得到粗多糖备用。申请号：201410566573.0，专利技术名称：一种熟附子多糖的提取方法及其新用途，该专利技术公开了一种熟附子多糖的提取方法，包括以下步骤：(1)预处理，得到滤液与滤渣；(2)滤渣加入超纯水继续煎煮小时后，与步骤(1)中收集的滤液合并；(3)将合并后溶液于蒸发至溶液剩余10％～20％，转移至烧杯，冷却至室温；(4)加入95％的乙醇，边加边搅拌；(5)将步骤(4)的溶液静置沉淀，抽滤，弃去滤液，收集滤渣。滤渣再分别用乙醇和丙酮各洗涤一次，将剩余滤渣在烘干，得到熟附子多糖粉末。该专利采用熟附子加水煎煮提取，有效成分和其它物质提取较多。目前，附子温中补阳的物质基础目前还有待研究，还未有将附子多糖与附子补火助阳功效相关联的研究。
技术实现思路
本专利技术的技术方案是提供了一种附子多糖。本专利技术的另一方案是提供了该该附子多糖的制备方法和用途。本专利技术提供了一种附子多糖的提取纯化方法，包括以下步骤：a、附子生品或炮制品粉碎，过筛，将粉碎后的粉末加入95％乙醇进行温浸3～6小时，过滤，得到滤渣；b、滤渣加纯化水在80～100℃提取1～3小时，过滤，收集滤液；c、重复b步骤1～2次，合并滤液；d、将合并的溶液在55～65℃蒸发至溶液剩余10～20％，冷却至室温；e、加入95％乙醇，边加边搅拌，直至溶液中最终含醇量为65～85％；f、将e步骤的溶液于4℃静置12～24小时，过滤，弃去滤液，收集滤渣；g、滤渣分别用无水乙醇、丙酮和乙醚各洗涤两次，将剩余沉淀在50～60℃真空干燥，得到附子多糖粉末。其中，a步骤所述的95％乙醇的加入量与附子重量体积比为：10－25︰1。其中，b步骤所述的水的加入量与附子的重量体积比为：10－25︰1。进一步优选地，b步骤所述的水的加入量与附子的重量体积比为：15︰1。其中，g步骤制备的附子多糖粉末复溶后置于分子截留量为3500～10000的透析袋中，流水透析12～24小时，冻干。本专利技术还提供了上述提取纯化方法制备得到的附子多糖。其中，多糖中含有甘露糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、木糖几种单糖组成，各成分含量之比为1:2.96:6.52:157:29.63。本专利技术还提供了所述的附子多糖在制备调节免疫作用的药物中的用途。本专利技术还提供了所述的附子多糖在制备治疗脾阳虚泄泻的药物中的用途。本专利技术附子多糖提取工艺中原料可为附子生品，也可以为炮制品，制备工艺中采用温浸提取，减少其他物质的浸出；提取纯化方法简便、提取率高、成本低廉；药效学实验，证明本专利技术附子多糖提取物具有抗脾虚腹泻和增强免疫的作用。显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。附图说明图17种单糖HPLC分离图(其中，1～8.PMP、甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖、葡萄糖、半乳糖醛酸、木糖)图2附子多糖水解样品衍生物的HPLC分离图图3血清IFN-γ图4血清VIP具体实施方式实施例1本专利技术附子多糖的提取纯化方法(1)去脂将中药附子生附片分选除杂，用机械粉碎机粉碎过20目筛，取100g，加入1000ml95％乙醇，温度条件为80℃，提取3h，过滤，得滤渣自然挥干乙醇。(2)提取将去脂后的滤渣加入纯化水1500ml，温度条件为90℃，提取2次，每次2小时(固料比1:15)，用四层纱布过滤，合并2次滤液。(3)浓缩、醇沉滤液减压浓缩至剩余溶液10％，转移至烧杯，冷却至室温，加入95％乙醇，使乙醇最终浓度达到65％，于4℃冰箱静置20小时，使多糖沉淀完全，过滤，得附子粗多糖。(5)精制将得到的附子多糖沉淀先后用无水乙醇、丙酮、乙醚充分洗涤各两次，采用分子截留量为5000的透析袋透析24小时。(6)干燥将精制的多糖移至于50℃真空干燥箱。(7)将干燥后的附子多糖粉碎，得白色粉末状附子多糖5.86g，装入密闭容器防潮保存，备用。实施例2本专利技术附子多糖的提取纯化方法(2)去脂将中药附子黑顺片分选除杂，用机械粉碎机粉碎过20目筛，取100g，加入1500ml95％乙醇，温度条件为80℃，提取3h，过滤，得滤渣自然挥干乙醇。(2)提取将去脂后的滤渣加入纯化水1500ml，温度条件为90℃，提取2次，每次1小时(固料比1:15)，用四层纱布过滤，合并2次滤液。(3)浓缩、醇沉滤液减压浓缩至剩余溶液10％，转移至烧杯，冷却至室温，加入95％乙醇，使乙醇最终浓度达到75％，于4℃冰箱静置20小时，使多糖沉淀完全，过滤，得附子粗多糖。(5)精制将得到的附子多糖沉淀先后用无水乙醇、丙酮、乙醚充分洗涤各两次，采用分子截留量为5000的透析袋透析12小时。(6)干燥将精制的多糖移至于50℃真空干燥箱。(7)将干燥后的附子多糖粉碎，得白色粉末状附子多糖6.94g，装入密闭容器防潮保存，备用。实施例3本专利技术附子本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种附子多糖的提取纯化方法，其特征在于：包括以下步骤：a、附子生品或炮制品粉碎，过筛，将粉碎后的粉末加入95％乙醇进行温浸3～6小时，过滤，得到滤渣；b、滤渣加纯化水在80～100℃提取1～3小时，过滤，收集滤液；c、重复b步骤1～2次，合并滤液；d、将合并的溶液在55～65℃蒸发至溶液剩余10～20％，冷却至室温；e、加入95％乙醇，边加边搅拌，直至溶液中最终含醇量为65～85％；f、将e步骤的溶液于4℃静置12～24小时，过滤，弃去滤液，收集滤渣；g、滤渣分别用无水乙醇、丙酮和乙醚各洗涤两次，将剩余沉淀在50～60℃真空干燥，得到附子多糖粉末。

【技术特征摘要】
1.一种附子多糖的提取纯化方法，其特征在于：包括以下步骤：a、附子生品或炮制品粉碎，过筛，将粉碎后的粉末加入95％乙醇进行温浸3～6小时，过滤，得到滤渣；b、滤渣加纯化水在80～100℃提取1～3小时，过滤，收集滤液；c、重复b步骤1～2次，合并滤液；d、将合并的溶液在55～65℃蒸发至溶液剩余10～20％，冷却至室温；e、加入95％乙醇，边加边搅拌，直至溶液中最终含醇量为65～85％；f、将e步骤的溶液于4℃静置12～24小时，过滤，弃去滤液，收集滤渣；g、滤渣分别用无水乙醇、丙酮和乙醚各洗涤两次，将剩余沉淀在50～60℃真空干燥，得到附子多糖粉末。2.根据权利要求1所述的附子多糖的提取纯化方法，其特征在于步骤所述附子粉碎后过20～50目筛。3.根据权利要求1所述的附子多糖的提取纯化方法，其特征在于：a步骤所述的95％乙醇的加入量与附子重量体积比为：10－25︰...

【专利技术属性】
技术研发人员：章津铭，傅超美，杨晓琴，吴亿晗，傅舒，张臻，游宇，林彦君，
申请(专利权)人：成都中医药大学，
类型：发明
国别省市：四川,51