一种含有益生菌的生长猪专用酶及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种含有益生菌的生长猪专用酶及其制备方法，属于饲料酶制剂领域。所述含有益生菌的生长猪专用酶由以下重量份数的组分组成：中草药粉0.5-2份，木聚糖酶80-100份，蛋白酶20-30份，果胶酶10-20份，纤维素酶8-12份，地衣芽孢杆菌培养物20-30份，中温α-淀粉酶5-10份。其中地衣芽孢杆菌（Bacillus?licheniformis）β-10-25，保藏编号CCTCC?NO：M?2013538。制备方法如下：地衣芽孢杆菌经发酵后通过过滤、浓缩、干燥获得的培养物与其他成分复配，所得复合酶能提高饲料转化率，降低饲料成本。

【技术实现步骤摘要】
一种含有益生菌的生长猪专用酶及其制备方法
本专利技术属于酶制剂领域，具体涉及一种生长猪专用酶及其制造方法。
技术介绍
饲料酶制剂是为了提高动物对饲料的消化、利用或改善动物体内的代谢效能而加入饲料中的酶类物质。目前可以在饲料中添加的酶制剂包括淀粉酶、α-半乳糖苷酶、纤维素酶、β -葡聚糖酶、葡萄糖氧化酶、脂肪酶、麦芽糖酶、甘露聚糖酶、果胶酶、植酸酶、蛋白酶、角蛋白酶、木聚糖酶等。由于饲料原料结构的复杂性，目前饲料工业生产中更多使用的是复合酶制剂。复合酶制剂是一种新型的饲料添加剂，在国外其应用始于20世纪70年代，而我国的饲料工业在20世纪90年代才开展酶制剂的应用。因此，加大对饲料复合剂的研究对于我国的养殖业发展具有非常重要的意义。饲用酶种类繁多，在畜禽生产中均取得了相当好的效果。前苏联科学家在早期断奶仔猪日粮中添加淀粉糊精酶，使得日增重提高14.6%，碳水化合物消化率提高77.2%。据美国有关资料报道，Collier在早期断奶仔猪日粮中补充酶制剂(含蛋白酶、淀粉酶、葡聚糖酶)，结果实验组比对照组日增重提高了 25%，饲料转化率提高了 15.5%。西德学者曾多次进行育肥猪添加复合酶制剂的实验研究，在以大麦为主的日粮中，添加0.1%的复合酶制剂，结果为:实验组比对照组生长速度提高5.1%，饲料利用率提高4.1%。可见，饲料酶能显著提高畜禽对饲料的消化吸收，促进生长，降低饲料成本，并且作为一种绿色饲料添加剂，它的使用具有安全性，有利于畜牧业生产走上经济节约型的发展道路。此外，科学实验 证实了地衣芽孢杆菌具有促进畜禽生长，降低料重比；增加肠道有益菌数量，改善畜禽肠道微生态环境；预防和治疗肠道疾病，降低死亡率的作用。1989年，美国FDA和美国饲料控制官员协会公布了可以直接饲喂且一般认为是安全的微生物菌种名单，其中包括地衣芽孢杆菌。中华人民共和国农业部318号公告也把地衣芽孢杆菌列入了饲料添加剂目录。目前，市场上针对饲料的复合酶多种多样，但是有的酶配比不合理，达不到应有的效果，导致畜禽生长缓慢，生产力低下；有的酶活性低，添加量大，导致饲养成本成本高。鉴于粮食的短缺是困扰我国饲料工业发展的主要因素，因此，要选择有利于节约粮食资源的畜牧业发展道路，提高饲料利用率，充分利用有限的粮食资源获得尽可能多的畜产品。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对上述缺陷提供一种配比合理，活性高且含有益生菌的生长猪专用酶及其制备方法。本专利技术的目的可以通过以下技术方案来实现:一种含有益生菌的生长猪专用酶，由以下重量份数的组分组成:中草药粉2-8份，木聚糖酶80-100份，蛋白酶20-30份，果胶酶10-20份，纤维素酶8_12份，地衣芽孢杆菌培养物20-30份，中温α -淀粉酶5-10份。所述木聚糖酶、蛋白酶、果胶酶、纤维素酶和中温α -淀粉酶均为湖南鸿鹰翔生物工程股份有限公司或其他现有产品；所述中草药粉的制备方法如下:称取黄芪10-30份；党参10-18份；板蓝根10-15份；当归10-15份；分别将上述中草药粉碎至粒径为2毫米以下混合获得中草药粉；所述地衣芽孢杆菌培养物制备方法如下:(I)种子培养将地衣芽孢杆菌斜面菌种经三级摇瓶发酵剂一级种子罐发酵；所述种子培养的培养基为:酵母粉0.5%，蛋白胨I %，可溶性淀粉1%，NaCll %,ρΗ4.5-7.0,121-123°C灭菌 30_40min。(2)发酵罐发酵将一级种子罐发酵液以3%接种量接入含有3L发酵培养基的发酵罐中，培养温度35-45°C，搅拌速度200-300r/min，通风量(V/V) 1:1-3，培养时间10_15h ;然后将IL经过121°C灭菌20min，温度为10°C的发酵培养基补入发酵罐，待温度升至35_45°C时恒温培养15-20h ;此时，将一级种子罐发酵液以2%接种量追加接入发酵罐，恒温培养10-15h ;继续将IL经过121°C灭菌20min，温度为10°C的发酵培养基补入发酵罐，待温度升至35_45°C时恒温培养10-15h ;所述发酵培养基组成为:麦麸75g，玉米粉55g，米糠25g，豆饼粉20g，β -葡聚糖2g，中草药粉40g，海藻糖35g，酵母粉6g，玉米浆3g，硫酸铵2g，磷酸氢二钾2g，磷酸二氢钾2g，柠檬酸钠3g，消泡剂0.5g,纯净水`1000mL, pH值4.5-7.0,121°C灭菌20min ；所述发酵培养基的调配方法为:按比例准确称取原料，将原料中的纯净水、玉米粉、豆饼粉投入配料罐中，调节PH值3-7，加入中温淀粉酶(3u/g玉米粉)与高温淀粉酶(30u/g玉米粉)，同时边搅拌边升温至70°C保温15-30min，然后缓慢升温至90°C保温15-30min进行液化，最后加入其它原料，搅拌均匀，调初始PH3-7，121_123°C灭菌30_40min备用。溶解氧控制:通过调整搅拌转速及通风量，控制溶解氧15-30% ；PH控制:通过补氨水或稀磷酸，控制发酵过程中pH值保持在3-7 ；补料控制:当发酵液中的还原糖含量降至3mg/ml-8mg/ml时,开始添加补料培养基，补料量以维持发酵液还原糖含量为2mg/ml-5mg/ml ；放罐标准:60-80%菌体衰老自溶，酶活力增长缓慢。(3)发酵液经孔径10-1000 μ m粗滤，然后于10_20°C循环超滤浓缩去除水分得固形物含量20-40%浓缩液；浓缩液经真空冷冻干燥、超微粉碎得地衣芽孢杆菌培养物。所述地衣芽孢杆菌具体为地衣芽孢杆菌(B acillus Iicheniformis) β-10-25。该菌株已于2013年11月3日保藏于中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC，地址为:湖北省武汉市武昌区珞珈山武汉大学生命科学学院)，保藏号为CCTCC NO:Μ2013538ο该菌株为通过物理化学诱变获得，特点如下:所述菌株在固体平板上菌落为白色，边缘不整齐，表面干燥不透明，镜检为革兰氏阳性细菌，细胞形态呈短杆状，芽孢中生，椭圆形，不膨大。所述菌株生理生化特征:V-P试验( + )，淀粉水解( + )，酪素水解( + )，明胶水解(+)，硝酸盐还原(+)，吲哚试验(-)，利用柠檬酸盐(+)，硝酸还原(+)，甘露醇(+)，木糖(+ )。所述地衣芽孢杆菌β -10-25是一株高产热稳定性β -葡聚糖酶的菌株，生产所得的葡聚糖酶酶活力高达8000-10000u/ml ;在室温下保存6个月后酶活损失小于25%，4°C保存12个月后酶活损失小于20% ;60°C条件下保存Ih后仍能保持80%以上酶活，70°C条件下保存IOmin后保持20%以上酶活。比现有的β _葡聚糖酶酶活力高，热稳定性及储存稳定性均较高，特别适合饲料工业的需求。优选的，一种含有益生菌的生长猪专用酶按如下重量份数组成:中草药粉5份，木聚糖酶90份，蛋白酶25份，果胶酶15份，纤维素酶10份，地衣芽孢杆菌培养物25份，中温α -淀粉酶8份。所述生长猪专用酶适用于饲料加工厂和养殖场自配饲料，使用时应与饲料中的其它原料混合均匀。建议每吨全价料添加量为80-150g (饲料中小麦用量低于30%，添加量为100g/t，小麦用量超过30%，添加量为120-150g/t)。有益效果:本专利技术所添加的地衣芽孢杆菌培养物，与添加纯酶工艺本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种含有益生菌的生长猪专用酶，其特征在于:由以下重量份数的组分组成:中草药粉2-8份，木聚糖酶80-100份，蛋白酶20-30份，果胶酶10-20份，纤维素酶8_12份，地衣芽孢杆菌培养物20-30份，中温α -淀粉酶5-10份； 所述地衣芽孢杆菌为地衣芽孢杆菌(B acillus Iicheniformis) β-10-25,保藏编号为 CCTCC NO:Μ2013538ο2.如权利要求1所述一种含有益生菌的生长猪专用酶，其特征在于，所述中草药粉的制备方法如下: 称取黄芪10-30份；党参10-18份；板蓝根10-15份；当归10-15份；分别将上述中草药粉碎至粒径为2毫米以下混合获得中草药粉。3.如权利要求1所述一种含有益生菌的生长猪专用酶，其特征在于，地衣芽孢杆菌培养物的制备方法，包括如下步骤: 地衣芽孢杆菌β-10-25经斜面菌种活化培养后进行一、二、三级液体种子和种子罐培养；将一级种子罐发酵液以3%接种量接入含有3L发酵培养基的发酵罐中，培养温度35-45°C，搅拌速度200-300r/min，通风量(V/V) 1:1-3,培养时间10_15h ;然后将IL经过121°C灭菌20min，温度为10°C的发酵培养基补入发酵罐，待温度升至35_45°C时恒温培养15-20h ;此时，将一级种子罐发酵液以2%接种量追加接入发酵罐，恒温培养10-15h ;继续将IL经过121°C灭菌20min，温度为10°C的发酵培养基补入发酵罐，待温度升至35_45°C时恒温培养10-15h ; 发酵液经孔径10-1000 μ m粗滤，然后于10-20°C循环超滤浓缩去除水分得固形物含量20-40%浓缩液；浓缩`液经真空冷冻干燥、超微粉碎得地衣芽孢杆菌培养物。4.如权利要求3所述的一种含有益生菌的生长猪专用酶，其特征在于；所述种子培养的培养基为:酵母粉0.5%，蛋白胨1%，可溶性淀粉l%，NaCll%，pH4.5-7.0，121-123。。灭菌 30_40min。 所述发酵培养基组成为:麦麸75g，玉米粉55g，米糠25g，豆饼粉20g，β -葡聚糖2g，中草药粉40g，海藻糖35g，酵母粉6g，玉米浆3g，硫酸铵2g，磷酸氢二钾2g，磷酸二氢钾2g，柠檬酸钠3g,消泡剂0.5g,纯净水1000mL, pH值4.5-7.0,121°C灭菌20min ； 所述发酵培养基的调配方法为:按比例准确称取原料，将原料中的纯净水、玉米粉、豆饼粉投入配料罐中，调节pH值3-7,加入中温淀粉酶(3u/g玉米粉)与高温淀粉酶(30u/g玉米粉)，同时边搅拌边升温至70°C保温15-30min，然后缓慢升温至90°C保温15_30min进行液化，最后加入其它原料，搅拌均匀，调初始PH3-7，121-123°C灭菌30_40min备用。5.如权利要求3所述的一种含有益生菌的生长猪专用酶，所述发酵培养基中的中草药粉组成和制备方法如下:黄芪20份；党参5份；当归12份；分别将上述中草药粉碎至粒径为2毫米以下混合获得中草药粉。6.一种制备如权利要求1-5所述的含有益生菌的生长猪专用酶的方法，包括如下步骤: 按照原料组成将中草...

【专利技术属性】
技术研发人员：张锦杰，朱永明，刘文明，刘波，向左东，
申请(专利权)人：湖南鸿鹰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：