一种高效石斑鱼精子冷冻保存液及其使用方法技术

本发明专利技术公开了一种高效石斑鱼精子冷冻保存液及其使用方法，属于鱼类种质冷冻保存的技术领域。本发明专利技术包括稀释液和抗冻剂；所述稀释液为水溶液，所述稀释液中含有以下质量浓度的组分：葡萄糖10～20g/L、氯化钠7.5～8.5g/L、氯化钾0.6～0.7g/L；所述抗冻剂为1,2‑丙二醇，所述抗冻剂在所述保存液中的体积浓度为10～20％。本发明专利技术还给出上述保存液保存石斑鱼精子的使用方法，经过稀释液配制、抗冻剂配制、保存液预冷、精液稀释、平衡和分装、冷冻保存、解冻和受精七个步骤而完成。本发明专利技术的保存液成份简单，毒性低，易于配制，养殖技术人员容易掌握，冷冻活力高，具有广泛的通用性，提高了石斑鱼精子冷冻保存成活率。

High efficiency grouper sperm cryopreservation liquid and its using method

The invention discloses a high efficiency grouper sperm cryopreservation preservation solution and a method for using the same, belonging to the technical field of cryopreservation of fish germplasm. The present invention includes dilution and antifreeze; the diluted aqueous solution, the dilution concentration in the solution containing the following components: glucose 10 ~ 20g/L, 7.5 to 8.5g/L of sodium chloride, potassium chloride 0.6 ~ 0.7g/L; the antifreeze is 1,2 propylene glycol, the antifreeze in the save the volume concentration in liquid is 10 ~ 20%. The invention also provides a method of using the solution in preservation of grouper sperm, diluted solution, antifreeze preparation, preservation liquid cooling, semen dilution, balance and packaging, cryopreservation, thawing and fertilization seven steps to complete. The preserved liquid of the invention has the advantages of simple component, low toxicity, easy preparation, easy cultivation of the technical personnel, high freezing activity, wide universality and improved survival rate of frozen semen of grouper.

【技术实现步骤摘要】
一种高效石斑鱼精子冷冻保存液及其使用方法
本专利技术属于鱼类种质保存的
，特别是指一种高效石斑鱼精子冷冻保存液及其使用方法。
技术介绍
石斑鱼(Epinephelus)是我国重要的海水养殖经济鱼类和优良种质资源，在我国有36种石斑鱼，主要分布在东海和南海。2015年石斑鱼捕捞量达117593吨，养殖量达100006吨，对于蓝色农业发展具有重要的作用。由于石斑鱼是一类雌雄同体、雌性先熟的鱼类，在同一生态群体中雄性数量相当少，在石斑鱼的人工繁殖中很难获得雄鱼的精子；另一方面随着石斑鱼产业的迅速发展，以及养殖品种出现病害多、畸形率高等问题，养殖企业急需培育出具有优良养殖性状的新品种来提高养殖产量和效益。建立石斑鱼精子库可以将分布于不同地域、不同繁殖时间的各种石斑鱼种质冷冻保存起来，利用不同品种在生长、抗病等方面的性状进行远缘杂交育种，培育生产中急需的养殖新品种，因此研究石斑鱼精子冷冻保存技术具有重要的意义。石斑鱼种繁多，例如：鞍带石斑鱼、七带石斑鱼、云纹石斑鱼、棕点石斑鱼、褐石斑鱼、金钱石斑鱼、清水石斑鱼等，每一种鱼在生态分布、生理和繁殖习性等方面都具有各自的特点，不同鱼类精子生理特本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高效石斑鱼精子冷冻保存液，其特征在于：包括稀释液和抗冻剂；所述稀释液为水溶液，所述稀释液中含有以下质量浓度的组分：葡萄糖10～20g/L、氯化钠7.5～8.5g/L、氯化钾0.6～0.70g/L；所述抗冻剂为1,2‑丙二醇，所述抗冻剂在所述保存液中的体积浓度为10～20％。

【技术特征摘要】
1.一种高效石斑鱼精子冷冻保存液，其特征在于：包括稀释液和抗冻剂；所述稀释液为水溶液，所述稀释液中含有以下质量浓度的组分：葡萄糖10～20g/L、氯化钠7.5～8.5g/L、氯化钾0.6～0.70g/L；所述抗冻剂为1,2-丙二醇，所述抗冻剂在所述保存液中的体积浓度为10～20％。2.根据权利要求1所述的高效石斑鱼精子冷冻保存液，其特征在于：所述稀释液中含有以下质量浓度的组分：葡萄糖15g/L、氯化钠8g/L、氯化钾0.65g/L。3.根据权利要求2所述的高效石斑鱼精子冷冻保存液，其特征在于：所述保存液的pH值为7～8，所述保存液的渗透压为322.28～420.69mOsm/L。4.根据权利要求3所述的高效石斑鱼精子冷冻保存液，其特征在于：所述抗冻剂在所述保存液中的体积浓度为15％。5.根据权利要求1～4任意一项所述的高效石斑鱼精子冷冻保存液保存精子的使用方法，其特征在于：包括以下步骤：1)稀释液的配制：取葡萄糖、氯化钠和氯化钾，溶解在蒸馏水中，制成稀释液；2)保存液的配制：取1,2-丙二醇，添加至步骤1)所得稀释液中，制成精子冷冻保存液；3)保存液的预冷：将步骤2)所得冷冻保存液放置于4℃下预冷；4)精液的稀释：取石斑鱼精液，将精液与保存液按照1:1～1:1....

【专利技术属性】
技术研发人员：田永胜，唐江，陈张帆，李振通，成美玲，
申请(专利权)人：中国水产科学研究院黄海水产研究所，
类型：发明
国别省市：山东,37