一种高通量桃叶片基因组DNA的提取方法技术

本发明专利技术公开了一种高通量桃叶片基因组DNA的提取方法，精简了提取步骤和水浴方法，每人每天可提取1024个样品DNA，克服了传统DNA提取方法程序复杂、耗时长的缺点，为大规模提取桃叶片基因组DNA提取奠定了基础。该方法提取的基因组DNA可用于SSR分析、基于HRM的SNP分型扩增、Sanger测序以及其他分子标记分析等后续研究。

【技术实现步骤摘要】
一种高通量桃叶片基因组DNA的提取方法
本专利技术涉及一种桃叶片基因组DNA的提取方法，具体涉及一种高通量桃叶片基因组DNA的提取方法。
技术介绍
桃[Prunuspersica(L.)Batsch]原产我国，是我国栽培面积较大的落叶果树之一。由于其遗传和生物学特征(基因组小、童期短、自交亲和、质量性状多等)，是多年生果树研究的模式植物。同时由于栽培品种多为二倍体，更易于遗传规律分析、重要性状定位、遗传多样性分析以及系统进化关系研究。桃全基因组序列测定的完成和在GenomeDatabaseforRosaceae(GDR)的数据释放，为基于大量样品DNA进行基因精细定位和分子辅助选种研究奠定了基础。近年来随着生物技术的进步，特别是基于二代测序的标记技术加速了作物经济性状基因的挖掘和分子聚合育种体系的建立。其中，图位克隆法仍是基因定位和克隆的常用和有效手段。这种方法首先在初步定位该基因的基础上，通过寻找较为紧密的分子标记，对该基因进行精细定位，从而将该基因界定在一个较小的区域内。许多重要的质量和数量性状已经通过图位克隆的方法被精细定位或克隆。但图位克隆的前提是需要足够量的杂交群体后代。同本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高通量桃叶片基因组DNA的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：称取桃叶片分别置于48组、每个离心管体积为1.2ml的八连排离心管中，在每个离心管中加入直径4mm的研磨钢珠，加入液氮冷冻后放入样品研磨仪中研磨100s至桃叶片粉碎，研磨完成后在放入液氮中冷冻；步骤2：加入500μL、质量浓度为2%的CTAB，在60℃烘箱中放置30min，期间每隔10min轻轻摇匀；步骤3：采用台式离心机，在转速500r/min下离心5min，防止研磨物溢出导致样品间污染；步骤4：用300ml量程的8通道移液器向八连排离心管中加入氯仿和异戊醇的混合液，直至1.2ml离心管的满载线，然后轻轻上下晃动摇匀5...

【技术特征摘要】
1.一种高通量桃叶片基因组DNA的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：称取桃叶片分别置于48组、每个离心管体积为1.2ml的八连排离心管中，在每个离心管中加入直径4mm的研磨钢珠，加入液氮冷冻后放入样品研磨仪中研磨100s至桃叶片粉碎，研磨完成后在放入液氮中冷冻；步骤2：加入500μL、质量浓度为2%的CTAB，在60℃烘箱中放置30min，期间每隔10min轻轻摇匀；步骤3：采用台式离心机，在转速500r/min下离心5min，防止研磨物溢出导致样品间污染；步骤4：用300ml量程的8通道移液器向八连排离心管中加入氯仿和异戊醇的混合液，直至1.2ml离心管的满载线，然后轻轻上下晃动摇匀5min；所述混合液中氯仿和异戊醇的体积比为24:1；步骤5：放入冷冻离心机，在4℃、转速4000r/min条件下离心10min，吸取上清液，...

【专利技术属性】
技术研发人员：鲁振华，王志强，牛良，崔国朝，张南南，曾文芳，潘磊，
申请(专利权)人：中国农业科学院郑州果树研究所，
类型：发明
国别省市：河南,41