嗜水气单胞菌表面特异性抗原AhsA及其抗体和应用制造技术

本发明专利技术属于蛋白质分离纯化技术领域，具体涉及嗜水气单胞菌表面特异性抗原AhsA及其抗体和应用。嗜水气单胞菌表面特异性抗原AhsA，由基因片段在大肠杆菌细胞中表达，制备时，将所述的基因片段的编码区克隆进pET‑28a载体，转化大肠杆菌BL21感受态细菌；待细菌生长至对数生长期，以0.5mM IPTG诱导表达AhsA蛋白，25℃诱导24小时后离心收集菌体并纯化浓缩得到抗原蛋白，并基于此蛋白制备了多克隆抗体，经间接Elisa效价检测后抗体为阳性。本发明专利技术解决了嗜水气单胞菌表面特异性抗原AhsA蛋白异源表达含量低，浓度差等问题，制备得到高纯度，高浓度嗜水气单胞菌表面特异性抗原AhsA。制备的抗体可以特异性识别嗜水气单胞菌，从而为临床上该致病菌的诊断提供了新的技术手段。

【技术实现步骤摘要】
嗜水气单胞菌表面特异性抗原AhsA及其抗体和应用
本专利技术属于蛋白质分离纯化
更具体地，涉及嗜水气单胞菌表面特异性抗原AhsA及其多克隆抗体和应用。
技术介绍
嗜水气单胞菌是养殖及野生鱼类常见的致病菌之一，鱼类的嗜水气单胞菌病往往呈爆发性流行趋势，造成鱼类的大面积死亡而导致养殖渔业的严重经济损失，同时该菌也可通过生物链感染人体，造成人体的多种疾病。目前，鱼类嗜水气单胞菌病的诊断方法主要是根据发病的季节进行调查访问，并对患病鱼体进行解剖检查，诊断速度和诊断准确性都受到一定程度的限制。有条件的情况下可利用抗嗜水气单胞菌多克隆抗体为基础的免疫学检查；另一方面，鱼类嗜水气单胞菌病的治疗主要依靠各种抗生素，对环境、鱼体以及消费者均有不利影响。抗生素的长期使用造成的耐药菌株的出现，也对抗生素的使用构成挑战而鱼类嗜水气单胞菌病的预防方面也缺乏有效的疫苗。现有的研究显示，嗜水气单胞菌中致病因子主要有气溶素(aerolysin)、溶血素(hemolysin)、细胞毒性肠毒素(cytolyticen-terotoxin)、胞外蛋白酶(extracellularprotease)、载铁体、S层蛋本文档来自技高网...

【技术保护点】
嗜水气单胞菌表面特异性抗原AhsA，其特征在于，由基因片段在大肠杆菌细胞中表达，并经过纯化浓缩得到；所述基因片段序列如下：TCAGCTGCCGCTCTGGGGGTCGTCGATCACCAGCTTGCCATCCTTGACCGGGATGGTGGCGCCGGGGGCCTTGTTCATGCGGATCACCCCTTCCTGACCGGCGAGGCGGTAGGTGACGTCATAGCCAAGGGTGCGGGTGCTGCTCTCTTGCACCGTCTTGCAGCGCTGTTCGGTGGTGGTGTAGGTATCACCGGCCTGCATGTTGCCCTGCACCTGGTTGCCGGCATAGCCACCCGCCA...

【技术特征摘要】
1.嗜水气单胞菌表面特异性抗原AhsA，其特征在于，由基因片段在大肠杆菌细胞中表达，并经过纯化浓缩得到；所述基因片段序列如下：TCAGCTGCCGCTCTGGGGGTCGTCGATCACCAGCTTGCCATCCTTGACCGGGATGGTGGCGCCGGGGGCCTTGTTCATGCGGATCACCCCTTCCTGACCGGCGAGGCGGTAGGTGACGTCATAGCCAAGGGTGCGGGTGCTGCTCTCTTGCACCGTCTTGCAGCGCTGTTCGGTGGTGGTGTAGGTATCACCGGCCTGCATGTTGCCCTGCACCTGGTTGCCGGCATAGCCACCCGCCACGGCGCCTGCGGCGGTCGCCACCTTCTTGCCGTTGCCGCCACCAAACTGGTTGCCGAGCACCCCGCCCAGCGCCGCACCGACCACGGTACCCAGGATCTTGTGCTCGTCCTGCACCGGTTTGCGGTGGGTCACGCTGACGTTGCGACACTCCTGACGGGGGGTCTTGATGGTCTCGGTCACCGCTTTGCTGGCCAGCACTTCGGCGAACTGAGGCTGTGATGAAAACAGGGA...

【专利技术属性】
技术研发人员：权春善，许永斌，刘爽，王路路，陈金利，
申请(专利权)人：大连民族大学，
类型：发明
国别省市：辽宁,21