大豆蛋白及其编码基因的应用及引物、表达载体和制备方法技术

本发明专利技术公开一种大豆蛋白及其编码基因的应用及引物、表达载体和制备方法，将所述大豆蛋白或其编码基因用于提高植物或大肠杆菌的耐盐性。其中，所述大豆蛋白的基因编码为Glyma06g25310.1。该大豆蛋白可增强大肠杆菌的耐盐性，由于很多抗逆基因在大肠杆菌和植物体系具有相似的抗逆功能，因此，该大豆蛋白及其编码基因在植物抗逆领域具有潜在的应用前景。

Soybean protein and application of its coding gene, primer, expression vector and preparation method

The invention discloses a soybean protein and the application of a coding gene thereof, a primer, an expression vector and a preparation method thereof, wherein the soybean protein or its coding gene is used to improve the salt tolerance of plants or Escherichia coli. Among them, the soybean protein gene is encoded as Glyma06g25310.1. The soybean protein can enhance the salt tolerance of E.coli, because many resistance genes have similar resistance function in Escherichia coli and plant system therefore has the potential application of soybean protein and its encoding gene of the inverse in the field of plant resistance.

【技术实现步骤摘要】
大豆蛋白及其编码基因的应用及引物、表达载体和制备方法
本专利技术涉及生物
，主要涉及一种大豆蛋白及其编码基因的应用及引物、表达载体和制备方法。
技术介绍
盐碱、干旱等非生物胁迫是限制植物生长发育的主要环境因子。这些环境因子导致植物体内发生一系列的生理代谢反应，表现为代谢和生长的可逆性抑制，严重时甚至引起不可逆伤害，导致整个植株死亡。因此，如何提高植物的抗逆功能，一直是人们研究的课题。因此，现有技术还有待于改进和发展。
技术实现思路
鉴于上述现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种大豆蛋白及其编码基因的应用及引物、表达载体和制备方法，该大豆蛋白的基因编码为Glyma06g25310.1，本专利技术中旨在提供一种该大豆蛋白在提高植物耐盐性中应用。本专利技术的技术方案如下：一种大豆蛋白的应用，其中，所述大豆蛋白的基因编码为Glyma06g25310.1，将所述大豆蛋白用于提高植物或大肠杆菌的耐盐性。一种大豆蛋白的编码基因的应用，其中，所述大豆蛋白的基因编码为Glyma06g25310.1，将所述大豆蛋白的编码基因用于提高植物或大肠杆菌的耐盐性。一种用于制备大豆蛋白或其编码基因的引物，其中，所述大豆蛋白的基因编码为Glyma06g25310.1，引物的序列如下所示：F：3’-ATGGCGAGCGCAGTGGAGAAG(NdeI)-5’；R：3’-TCAGCTCTCGTGAGTGCCATTC(XhoI)-5’。一种用于提高耐盐性的表达载体，其中，所述表达载体为携带有SEQIDNO.4所示的大豆蛋白基因，用于表达基因编码为Glyma06g25310.1的大豆蛋白。所述的用于提高耐盐性的表达载体，其中，所述表达载体用PET-28a蛋白表达载体重组得到，该大豆蛋白基因通过酶切位点NdeI和XhoI连接在表达载体上。一种用于提高耐盐性的表达载体的制备方法，其中，其制备方法包括以下步骤：扩增目的基因：以F：3’-ATGGCGAGCGCAGTGGAGAAG-5’；R：3’-TCAGCTCTCGTGAGTGCCATTC-5’作为引物，以大豆R0期胚根cDNA为模板，进行PCR扩增，得到目的基因片段，目的基因片段的基因序列如SEQIDNO.4所示；构建重组质粒：将目的基因片段与经NdeI和XhoI双酶切的蛋白表达载体PET-28a，通过T4连接酶连接酶切产物，构建pET-28a重组质粒。所述的用于提高耐盐性的表达载体的制备方法，其中，构建重组质粒过程中，包括以下步骤：将目的基因片段和经过双酶切的PET-28a蛋白表达载体按照摩尔比10:1混合，加入0.5μLT4连接酶，1μL10×Buffer，用水补齐至10μL，16℃连接过夜。有益效果：本专利技术中首次发现该蛋白可以提高大肠杆菌的耐盐性，对于其在植物抗逆工程上的应用具有指导意义。该大豆蛋白可增强大肠杆菌的耐盐性，由于很多抗逆基因在大肠杆菌和植物体系具有相似的抗逆功能，因此，该基因在植物抗逆领域具有潜在的应用前景。附图说明图1为本专利技术实施例1中利用PCR扩增大豆基因片段的电泳结果图(M为DL2000Marker)。图2为本专利技术实施例1中利用菌落PCR验证重组菌的电泳结果图(M为DL2000Marker)。图3为本专利技术实施例5中17号蛋白的诱导表达的电泳结果图。图4为本专利技术实施例6中空载体转化菌在不同浓度的高盐LB固体培养基和正常固体培养基的生长结果图。图5本专利技术实施例6中重组质粒转化菌在不同浓度的高盐LB固体培养基和正常固体培养基的生长结果图。图6本专利技术实施例6中空载体转化菌和重组质粒转化菌的存活率柱形图。具体实施方式本专利技术提供一种大豆蛋白及其编码基因的应用及引物、表达载体和制备方法，为使本专利技术的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下对本专利技术进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。本专利技术所提供的一种大豆蛋白及其编码基因的应用，是将所述大豆蛋白或其编码基因用于提高植物或大肠杆菌的耐盐性。其中，所述大豆蛋白的基因编码为Glyma06g25310.1。该大豆蛋白可增强大肠杆菌的耐盐性，由于很多抗逆基因在大肠杆菌和植物体系具有相似的抗逆功能，因此，该大豆蛋白及其编码基因在植物抗逆领域具有潜在的应用前景。所述大豆蛋白的基因序列(SEQIDNO.1)如下所示：ATCGAATCGACCTGAACTGCTTCTTCAAATTTTTTTCTGGTGATTCTACAACCTGTCCTAACTCTCAACCCTCTTCCTCTTAATTAATCTATTCCTCTTTATCCTCCTCTGAACCTCAAACACCAAAACAAAGCATTACAATTCTCAATTTCACATAAACACCAGAATTGATAAAAACACATAACAAAAAAAAAAAGTGAAAAATGGCGAGCGCAGTGGAGAAGGAGGGTGGCGCGAGCGAGGAAACTTTGTCTTTGGAGCTTCCTGCTCCACCTGGTTGGAAGAAGCAGTTCATTCCAAAGAAAGCTGGTACCCCAAAGAAAAACGAGATTGTGTTCACTGCACCAACAGGAGAGGAGATCAATAACAGGAAGCAGCTGGAAAAATATTTGAAAGCACACCCTGGAGGCCCAGCTGTATCAGAATTTGACTGGGGCACTGGTGAGACCCCAAGAAGATCTACAAGAATCAGTGAGAAGGCCAAGGCAGCTCCTCCAACACAGAGGGAGCCCCCAAAGAAGCGTACTAAAAGATCATCAGCTTCACAAAAGGAAATTTCCCAGGAAGAAAAAGAAGAGGAGACCAAGGAAGCAGAGATGCAAGAAGCTGATGACACCACTAAGGGTGATAATGATATAGAGAAGGAAAAGGTTGTTGTAAACGAAAATCATGACAAGAGTGTGGAAGATACAGATGTCAACAAATCCACTCGTTATGGAGAAGAAGCTAAAGCTGGAGAAAACGTTGAGGTACCTATTGAAGAGGAAAAATCCAATGCTGCTGATGGAGAACTACCTGCATTAAAAGATAAAGCTGATGACAAAGTAACTGAGGGCTCTGAAGTTTTTCTGAGAAAGGATGAAGAAAAGATTGAGCAACCACAGGAAGAGACAAAAGAATATAGTGGATTTGGGGAGCCAGAGAAATTGGAAACATGCACTACTGCAGACAAAACGGTTGAAGTGGAAGGAGTGAATAAAGAGGATCACGTCAAAAGTACTCATGAATTTGAAGTTGGGGAAATAGAAGGAACAAAAGTGAACGGTGAAGAACATCACAAGCTTGATGAGATAAACAAGGCCGAAGCAGAGTTGACTGTGAATGGCACTCACGAGAGCTGAACTGGTGAGGTCAAAAGCCTGGAGCAGGGAATAGATTAATAAGCTCTCCGCTTCCCTCCTCTCATTCTGACCCCTTTAGATCTGTTTGAAAT本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种大豆蛋白的应用，其特征在于，所述大豆蛋白的基因编码为Glyma06g25310.1，将所述大豆蛋白用于提高植物或大肠杆菌的耐盐性。

【技术特征摘要】
1.一种大豆蛋白的应用，其特征在于，所述大豆蛋白的基因编码为Glyma06g25310.1，将所述大豆蛋白用于提高植物或大肠杆菌的耐盐性。2.一种大豆蛋白的编码基因的应用，其特征在于，所述大豆蛋白的基因编码为Glyma06g25310.1，将所述大豆蛋白的编码基因用于提高植物或大肠杆菌的耐盐性。3.一种用于制备大豆蛋白或其编码基因的引物，其特征在于，所述大豆蛋白的基因编码为Glyma06g25310.1，引物的序列如下所示：F：3’-ATGGCGAGCGCAGTGGAGAAG(NdeI)-5’；R：3’-TCAGCTCTCGTGAGTGCCATTC(XhoI)-5’。4.一种用于提高耐盐性的表达载体，其特征在于，所述表达载体为携带有SEQIDNO.4所示的大豆蛋白基因，用于表达基因编码为Glyma06g25310.1的大豆蛋白。5.根据权利要求4所述的用于提高耐盐性的表达载体，其特征在于，所述表达载体用PET-28a...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘昀，谭芳美，郑易之，吴佳辉，程华，孙楠，
申请(专利权)人：深圳大学，
类型：发明
国别省市：广东,44