The invention discloses a method for identification of a Zhejiang province of Ophiopogon japonicus, including DNA extraction, also includes the following steps: firstly, setting parameters: PCR amplification, the amplified products directly to HRM; two, radixophiopogonis standard and sample respectively according to the steps of the parameters of the HRM in radixophiopogonis standard; according to the baseline, the difference between the sample and the relative fluorescence baseline value generated as ordinate derived melting curve, so as to obtain high resolution melting curve difference map; when the relative fluorescence sample with the baseline value generated by the difference between 6.969 ~ 8.031, determine the Zhejiang Ophiopogon japonicus; conversely, it determination of non Zhejiang maidong.
【技术实现步骤摘要】
浙江道地性麦冬的鉴定方法
本专利技术属于生物
,具体涉及一种应用高分辨率熔解曲线技术鉴定麦冬道地性的方法。
技术介绍
麦冬是指以麦冬为名的百合科沿阶草属(OphiopogonKer-Gawl.)和山麦冬书(LiriopeLour.)植物,其块根为常用中药。其主要的药用化学成分为甾体皂苷、麦冬多糖等。药理学研究结果显示,麦冬有降血糖、抗衰老、抗氧化及改善心脑血管疾病等方面的作用。麦冬入药始载于《神农本草经》,在我国栽培历史有1200年之久,著名道地性产地有浙江杭州与慈溪(杭麦冬)、四川三台(川麦冬)、福建泉州(福建麦冬)、湖北襄樊(湖北麦冬)等地。对几种著名药材麦冬的鉴定结果表明:杭麦冬、川麦冬为百合科沿阶草属植物麦冬;湖北麦冬为百合科山麦冬属植物山麦冬的变种,福建麦冬为短葶山麦冬。其中杭麦冬品质上佳,为著名的道地药材“浙八味”之一。传统鉴别中药材的方法难以精准区分麦冬与其混伪品。DNA条形码技术在2003年被首次提出,并且迅速在物种的分类与鉴定研究领域中得到广泛的关注和应用。它是一种新型物种分子鉴定技术。该技术可以利用短的、标准的DNA序列片段作为物种标记, ...
【技术保护点】
浙江道地性麦冬的鉴定方法,包括DNA提取,其特征是还包括以下步骤:一、设置参数:1)、PCR扩增:PCR扩增体系:
【技术特征摘要】
1.浙江道地性麦冬的鉴定方法,包括DNA提取,其特征是还包括以下步骤:一、设置参数:1)、PCR扩增:PCR扩增体系:引物F:ATGCGATACTTGGTGTGAAT,引物R:GACGCTTCTCCAGACTACAAT;PCR扩增程序为:95℃变性5min;95℃变性15s,Tm退火25s,72℃延伸30s;40个循环;引物退火温度为55~59℃;2)、将扩增产物直接进行HRM:HRM程序为:95℃,1min;40℃,1min;65℃,1s;95℃,1min;降温至25℃;收集65~95℃的荧光信号数据;二、将浙麦冬标准品和待测样品分别按照步骤一所述参数进行HRM;以浙麦冬标准品为参照做基线,待测样品与基线所产生的相对荧光值的差值为纵坐标生成派生熔解曲线,从而获得高分辨率熔解曲线差异图;当待测样品与基线所产生的相对荧光值的差值在-6.969~8.031之间,判定是浙江麦冬;反之...
【专利技术属性】
技术研发人员:陈绍宁,杨东风,梁宗锁,吕洪飞,胡秀芳,贾巧君,丁先锋,普倩,
申请(专利权)人:浙江理工大学,
类型:发明
国别省市:浙江,33
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