一种抗炎兼具抑菌和抗氧化功能的复合型植物水提物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种复合植物水提物及其在饲料及动物保健产品领域的应用，尤其涉及一种抗炎兼具抑菌和抗氧化功能的复合型植物水提物及其制备方法和应用。一种抗炎兼具抑菌和抗氧化功能的复合植物水提物，该植物水提物按质量百分比计由以下组分的植物原料提取制得：石榴皮4.17％、柠檬54.16％、桂枝4.17％、青蒿16.67％、厚朴20.83％。本发明专利技术摸索建立了一套适用于提取植物多种活性成分的简易工艺，适用于各中小型企业加工、生产。本发明专利技术中用于组成复合植物提取物的几种植物原料均属低价或中等价位、且在国内资源丰富、性价比高。与原来配方相比，保留了性价比较高的石榴皮，极大地降低了复方的成本并可显著降低在仔猪上的应用剂量。

Composite plant water extract capable of resisting inflammation, bacteriostasis and antioxidation function, preparation method and application thereof

The invention relates to a composite plant water extract and its application in feed and animal health products, in particular to an anti-inflammatory and antioxidative function of both antibacterial compound plant water extract and preparation method and application thereof. Both an anti-inflammatory and antioxidative function of antibacterial compound plant water extract, water extract of the plant according to the mass percentage is composed of the following components: plant materials prepared by extracting pomegranate peel 4.17%, lemon 54.16%, Guizhi 4.17% and Artemisia 16.67%, 20.83% magnolia. The invention explores a simple process suitable for extracting a plurality of active ingredients from plants, and is suitable for processing and producing in small and medium-sized enterprises. In the invention, a plurality of plant materials used for forming composite plant extracts are of low or medium price, and are rich in domestic resources and high in cost performance. Compared with the original formula, the pomegranate peel with high cost performance is reserved, which greatly reduces the cost of the compound and can significantly reduce the applied dose on the piglet.

【技术实现步骤摘要】
一种抗炎兼具抑菌和抗氧化功能的复合型植物水提物及其制备方法和应用
本专利技术涉及一种复合植物水提物及其在饲料及动物保健产品领域的应用，尤其涉及一种抗炎兼具抑菌和抗氧化功能的复合型植物水提物及其制备方法和应用。
技术介绍
饲用抗生素曾对畜禽养殖业的发展起到了不可磨灭的贡献，但其耐药性和药物残留等问题也日益凸显。抗生素被禁用后，抗生素替代品的研究也就理所当然成为养殖业内首要解决的问题。植物提取物因富含蛋白、糖苷和酚酸等多种活性成分，兼具抑菌、抗氧化、抗应激、抗病毒和免疫调节等功能，且不易产生细菌耐药性和药物残留等问题，成为抗生素替代品的研究热点。但目前所研究的提取物大多是从单种植物原料中提取，因此往往存在生物活性成分含量较低、功能单一、效果不显著等问题。而对于复合提取物而言，又存在复方科学性不强、添加量过高、成本昂贵等缺陷。因此，若能筛选出具有多种功能、且性价比较高的复合植物提取物用于替代仔猪饲用抗生素，无疑可解决畜牧养殖业的一大难题。申请人前期研制的复方植物提取物在断奶仔猪上具有较好促生长及替代饲用抗生素效果，但因价格昂贵、添加量大等问题，限制了它的应用前景。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的是提供一种复合植物水提物，用于替代饲用抗生素，最终实现“环保、无毒、安全和绿色”的养殖目标。本专利技术的第二个目的是提供上述的复合植物水提物的制备方法，该方法工艺简易，成本低。本专利技术的第三个目的是提供上述的复合植物水提物的应用。为了实现上述的第一个目的，本专利技术采用了以下的技术方案：一种抗炎兼具抑菌和抗氧化功能的复合植物水提物，该植物水提物按质量百分比计由以下的组分的植物原料提取制得：石榴皮4.17％柠檬54.16％桂枝4.17％青蒿16.67％厚朴20.83%。为了实现上述的第二个目的，本专利技术采用了以下的技术方案：上述的复合植物水提物的方法，该方法包括以下的步骤：1）将植物原料研磨粉碎、混合，按料水比1：20放入提取设备槽内，升温至80℃，提取6h后转至浓缩槽内，在0.085MPa、60℃条件下浓缩比重至1.25；2）将浓缩产物转至喷雾干燥设备，在进风温度150℃、空气流量500L/H、进料量20％条件下对其进行喷雾干燥。为了实现上述的第三个目的，本专利技术采用了以下的技术方案：上述的复合植物水提物用于制备代替抗生素的动物饲料添加剂中的应用。本专利技术还提供了一种动物饲料添加剂，动物饲料添加剂包所述的复合植物水提物。本专利技术还提供了一种动物饲料，动物饲料包括权所述的复合植物水提物。综上所述，本专利技术采用的技术方案如下：（1）为了实现本专利技术的首要目的，首先摸索建立了一套适用于提取植物多种活性成分的简易工艺参数：料水比1：20、80℃提取6h后，在60℃下浓缩提取液比重至1.25，再进行喷雾干燥(进风温度150℃、空气流量500L/H、进料量20％)。（2）然后以体外抗炎、抑菌和抗氧化能力为评价指标，初步从23种植物原料中筛选出复合植物提取物的原料组成：石榴皮、厚朴、桂枝、青蒿和柠檬。原来配方原料为：石榴皮、艾叶、南五味子和吴茱萸。（3）进一步通过正交组合实验明确复合植物提取物的配方（石榴皮1g，桂枝1g，青蒿4g，厚朴5g和柠檬13g）及验证其抑菌功能（MIC为125mg/mL）抗炎(IC50为0.138mg/mL)和抗氧化能力(IC50为0.40mg/mL)。原来配方（石榴皮1g，艾叶3g，南五味子9g和吴茱萸9g）及验证其抑菌功能（MIC为250mg/mL）和抗氧化能力(IC50为6.46mg/mL)，未检测其抗炎活性。（4）分别给小鼠连续灌胃125、250、500、1000mg/kg·bw-1剂量的复方提取物21天，小鼠精神状态良好，毛色光亮、未见异常死亡现象，经综合分析后，复合植物提取物的添加量应当低于125mg/kg·bw-1。（5）在小鼠饮水中添加0.3mg/ml（相当于100mg/kg·bw-1剂量）21天，可使小鼠日增重极显著提高13.3%（P＝0.008），料重比显著降低10.8%（P<0.05）。原来配方未做此内容研究，仅发现在每天给小鼠灌胃1000mg/kg·bw-1剂量，连续灌胃14天，可使小鼠日增重具有提高趋势。（6）在小鼠饮水中添加0.3mg/ml（相当于100mg/kg·bw-1剂量）21天，小鼠进行LPS造模处理后，可降低小鼠的腹泻率，显著提高小肠的绒毛高度及绒毛高度/隐窝深度的值（P<0.05）；显著降低小肠黏膜促炎因子IL-1β和IL-6的基因表达（P<0.05）。（7）与原来配方相比，本专利技术的复合植物提取物在小鼠上的用量仅为原来配方的10％，在很大程度上提高了其性价比，在畜禽养殖中具有较好应用前景。本专利技术的优点如下：1、本专利技术摸索建立了一套适用于提取植物多种活性成分的简易工艺，适用于各中小型企业加工、生产。2、本专利技术中用于组成复合植物提取物的几种植物原料均属低价或中等价位、且在国内资源丰富、性价比高。3、与原来配方相比，保留了性价比较高的石榴皮，极大地降低了复方的成本并可显著降低在仔猪上的应用剂量。附图说明图1为LPS注射4小时后小鼠空肠绒毛的光镜切片图。图1A为正常对照组（生理盐水注射4h），图1B为LPS组（LPS注射4h）,图1C为抗炎复方组（LPS注射4h）。图2为LPS注射24小时后小鼠空肠绒毛的光镜切片图。图2A为LPS组（LPS注射24h）,图2B为抗炎复方组（LPS注射24h）。图3为LPS注射4小时后小鼠空肠黏膜促炎因子的基因表达水平图。图4为LPS注射24小时后小鼠空肠黏膜促炎因子的基因表达水平图。具体实施方式一、植物原料的提取、筛选、复方活性成分检测1、提取包括青蒿、女贞子、柠檬、泽漆、桂枝、石榴皮、柠檬、刺五加、牛膝、绞股蓝、银杏、秦皮、鱼腥草、补骨脂、厚朴、香附子、茵陈蒿、迷迭香、肉桂、白术、淫羊藿、甘草、竹叶、蚊子草等23种植物原料。2、提取工艺：将植物原料研磨粉碎，按料水比1：20放入提取设备槽内，升温至80℃，提取6h后转至浓缩槽内，在0.085MPa、60℃条件下浓缩比重至1.25。将浓缩产物转至喷雾干燥设备，在进风温度150℃、空气流量500L/H、进料量20％条件下对其进行喷雾干燥。3、抗炎率测定：紫外分光光度计测定23种植物水提物对脂肪氧化酶（LOX）活性的抑制率来表征植物水提物的体外抗炎活性。具体操作如下：（1）试验组：取1μL0.5g/mL的中药材水提物加入至已含20μL酶液的1.5mLeppendorf管中，30℃水浴30min后，加入150μL底物，30℃反应3min，加入500μL无水乙醇终止反应，然后加入500μL蒸馏水混匀待测；（2）阳性对照组：以1μL蒸馏水替代中药材水提物，其余步骤同（1）；（3）阴性对照组：取1μL中药材水提物，以20μL蒸馏水取代酶液，其余步骤同（1）；（4）空白对照组：以1μL蒸馏水替代中药材水提物，在加底物之前先加入500μL无水乙醇终止反应，其余步骤同（1）。各取200μL待测液至96孔紫外检测板，在酶标仪上选取234nm波长检测反应液的吸光度OD值。中药材水提物的抑制活性以抗炎率表示，公式如下：ODa、ODb、ODc、ODd分别表示试验组、阳性对照组、阴性对照组、空白对照组的OD值。表1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗炎兼具抑菌和抗氧化功能的复合植物水提物，其特征在于该植物水提物按质量百分比计由以下组分的植物原料提取制得：石榴皮     4.17％柠檬       54.16％桂枝       4.17％青蒿       16.67％厚朴       20.83%。

【技术特征摘要】
1.一种抗炎兼具抑菌和抗氧化功能的复合植物水提物，其特征在于该植物水提物按质量百分比计由以下组分的植物原料提取制得：石榴皮4.17％柠檬54.16％桂枝4.17％青蒿16.67％厚朴20.83%。2.一种制备权利要求1所述的复合植物水提物的方法，其特征在于该方法包括以下的步骤：1）将植物原料研磨粉碎，按料水比1：20放入提取设备槽内，升温至80℃，提取6h后转至浓缩槽内，在0.085...

【专利技术属性】
技术研发人员：陶新，徐子伟，吴宛澐，孙雨晴，邓波，门小明，吴杰，周文俊，
申请(专利权)人：浙江省农业科学院，
类型：发明
国别省市：浙江,33