与胎儿绒毛外滋养层细胞测定有关的方法和组合物技术

根据本公开内容的方面，分离和测定胎儿绒毛外滋养层细胞——包括测定胎儿绒毛外滋养层细胞的RNA——的方法包括：从妊娠受试者获得含有胎儿绒毛外滋养层细胞的母体子宫颈内样品；将所述母体子宫颈内样品在醛固定剂中固定；从所述母体子宫颈内样品中移除胎儿绒毛外滋养层细胞，从而产生经分离的胎儿绒毛外滋养层细胞；从所述胎儿绒毛外滋养层细胞分离并测定RNA。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】与胎儿绒毛外滋养层细胞测定有关的方法和组合物相关申请的引用本申请要求于2014年10月10日提交的美国临时专利申请序列号62/062,433的优先权，所述临时专利申请的全部内容以引用的方式纳入本文。
本公开内容总体上涉及经分离的胎儿绒毛外滋养层细胞以及遗传变异和病理状况的产前检测和诊断的测定方法。根据本公开内容的具体方面，本文记载了分离和测定来自妊娠中胎儿的胎儿绒毛外滋养层细胞的RNA的方法，以及来自妊娠中胎儿的胎儿绒毛外滋养层细胞的蛋白的质谱测定方法。
技术介绍
遗传变异和病理状况的产前检测和诊断适用于监测并维持母亲和胎儿的健康和幸福。缺少无创性方法用于获得并测定通常数量较少的胎儿细胞。持续需要这样的测定，其向临床医生警示妊娠中的异常状况，例如唐氏综合征和其他染色体数目疾病、遗传病的诊断以及将发展先兆子痫或子宫内生长受限的妊娠中的胎儿的病理状况。
技术实现思路
根据本专利技术的方面，测定来自胎儿绒毛外滋养层细胞的RNA的方法包括：从妊娠受试者获得母体子宫颈内样品；从所述母体子宫颈内样品中移除胎儿绒毛外滋养层细胞；通过用醛固定剂处理来固定胎儿绒毛外滋养层细胞，产生醛固定的胎儿绒毛外滋养层细胞；清洗所述醛固定的胎儿绒毛外滋养层细胞以促使除去由醛固定剂引入的交联，产生经清洗的胎儿绒毛外滋养层细胞；从所述经清洗的胎儿绒毛外滋养层细胞中提取胎儿绒毛外滋养层细胞RNA；以及测定所述胎儿绒毛外滋养层细胞RNA以确定所述胎儿绒毛外滋养层细胞RNA的一个或更多个特征。根据本专利技术的方面，测定来自胎儿绒毛外滋养层细胞的RNA的方法包括：从妊娠受试者获得母体子宫颈内样品；从所述母体子宫颈内样品中移除胎儿绒毛外滋养层细胞，产生经分离的胎儿绒毛外滋养层细胞；通过用醛固定剂处理来固定经分离的胎儿绒毛外滋养层细胞，产生醛固定的经分离的胎儿绒毛外滋养层细胞；裂解所述醛固定的经分离的胎儿绒毛外滋养层细胞，产生裂解物；清洗所述裂解物以促使除去由醛固定剂引入的交联，产生经清洗的裂解物；从所述经清洗的裂解物中提取胎儿绒毛外滋养层细胞RNA；以及测定所述胎儿绒毛外滋养层细胞RNA以确定所述胎儿绒毛外滋养层细胞RNA的一个或更多个特征。根据本专利技术的方面，测定来自胎儿绒毛外滋养层细胞的RNA的方法包括：从妊娠受试者获得母体子宫颈内样品；从所述母体子宫颈内样品中移除胎儿绒毛外滋养层细胞；通过用醛固定剂处理来固定胎儿绒毛外滋养层细胞，产生醛固定的胎儿绒毛外滋养层细胞，其中所述用醛固定剂处理在从母体子宫颈内样品中移除胎儿绒毛外滋养层细胞之前和/或之后进行；清洗所述醛固定的胎儿绒毛外滋养层细胞以促使除去由醛固定剂引入的交联，产生经清洗的胎儿绒毛外滋养层细胞；从所述经清洗的胎儿绒毛外滋养层细胞中提取胎儿绒毛外滋养层细胞RNA；以及测定所述胎儿绒毛外滋养层细胞RNA以确定所述胎儿绒毛外滋养层细胞RNA的一个或更多个特征。根据本专利技术的方面，测定来自胎儿绒毛外滋养层细胞的RNA的方法包括：从妊娠受试者获得母体子宫颈内样品；从所述母体子宫颈内样品中移除胎儿绒毛外滋养层细胞，产生经分离的胎儿绒毛外滋养层细胞；通过用醛固定剂处理来固定胎儿绒毛外滋养层细胞，产生醛固定的胎儿绒毛外滋养层细胞，其中所述用醛固定剂处理在从母体子宫颈内样品中移除胎儿绒毛外滋养层细胞之前和/或之后进行；在醛固定之后裂解经分离的胎儿绒毛外滋养层细胞，产生裂解物，清洗所述裂解物以促使除去由醛固定剂引入的交联，产生经清洗的裂解物；从所述经清洗的裂解物中提取胎儿绒毛外滋养层细胞RNA；以及测定所述胎儿绒毛外滋养层细胞RNA以确定所述胎儿绒毛外滋养层细胞RNA的一个或更多个特征。根据本专利技术的方面，测定来自胎儿绒毛外滋养层细胞的RNA的方法包括：从妊娠受试者获得母体子宫颈内样品；从所述母体子宫颈内样品中移除胎儿绒毛外滋养层细胞，产生经分离的胎儿绒毛外滋养层细胞；通过用醛固定剂处理来固定胎儿绒毛外滋养层细胞，产生醛固定的胎儿绒毛外滋养层细胞，其中在从妊娠受试者获得样品之后立即将母体子宫颈内样品在醇固定剂中固定，并且该在醇固定剂中的固定在通过用醛固定剂处理来固定胎儿绒毛外滋养层细胞产生醛固定的胎儿绒毛外滋养层细胞之前进行，并且其中所述用醛固定剂处理在从母体子宫颈内样品中分离出胎儿绒毛外滋养层细胞之前和/或之后进行；清洗所述醛固定的胎儿绒毛外滋养层细胞以促使除去由醛固定剂引入的交联，产生经清洗的胎儿绒毛外滋养层细胞；从所述经清洗的胎儿绒毛外滋养层细胞中提取胎儿绒毛外滋养层细胞RNA；以及测定所述胎儿绒毛外滋养层细胞RNA以确定所述胎儿绒毛外滋养层细胞RNA的一个或更多个特征。根据本专利技术的方面，测定来自胎儿绒毛外滋养层细胞的RNA的方法包括：从妊娠受试者获得母体子宫颈内样品；从所述母体子宫颈内样品中移除胎儿绒毛外滋养层细胞；通过用醛固定剂处理来固定胎儿绒毛外滋养层细胞，产生醛固定的胎儿绒毛外滋养层细胞，其中在从妊娠受试者获得样品之后立即将母体子宫颈内样品在醇固定剂中固定，并且该在醇固定剂中的固定在通过用醛固定剂处理来固定胎儿绒毛外滋养层细胞产生醛固定的胎儿绒毛外滋养层细胞之前进行，并且其中所述用醛固定剂处理在从母体子宫颈内样品中分离出胎儿绒毛外滋养层细胞之前和/或之后进行；在醛固定之后裂解经分离的胎儿绒毛外滋养层细胞，产生裂解物，清洗所述裂解物以促使除去由醛固定剂引入的交联，产生经清洗的裂解物；从所述经清洗的裂解物中提取胎儿绒毛外滋养层细胞RNA；以及测定所述胎儿绒毛外滋养层细胞RNA以确定所述胎儿绒毛外滋养层细胞RNA的一个或更多个特征。根据本专利技术的方面，测定来自胎儿绒毛外滋养层细胞的RNA的方法包括：从妊娠受试者获得母体子宫颈内样品；从所述母体子宫颈内样品中移除胎儿绒毛外滋养层细胞；通过用醛固定剂处理来固定胎儿绒毛外滋养层细胞，产生醛固定的胎儿绒毛外滋养层细胞，其中在从妊娠受试者获得样品之后立即将母体子宫颈内样品在醇固定剂中固定，并且该在醇固定剂中的固定在通过用醛固定剂处理来固定胎儿绒毛外滋养层细胞产生醛固定的胎儿绒毛外滋养层细胞之前进行；清洗所述醛固定的胎儿绒毛外滋养层细胞以促使除去由醛固定剂引入的交联，产生经清洗的胎儿绒毛外滋养层细胞；从所述经清洗的胎儿绒毛外滋养层细胞中提取胎儿绒毛外滋养层细胞RNA；以及测定所述胎儿绒毛外滋养层细胞RNA以确定所述胎儿绒毛外滋养层细胞RNA的一个或更多个特征。根据本专利技术的方面，测定来自胎儿绒毛外滋养层细胞的RNA的方法包括：从妊娠受试者获得母体子宫颈内样品；从所述母体子宫颈内样品中移除胎儿绒毛外滋养层细胞，产生经分离的胎儿绒毛外滋养层细胞；通过用醛固定剂处理来固定胎儿绒毛外滋养层细胞，产生醛固定的胎儿绒毛外滋养层细胞，其中在从妊娠受试者获得样品之后立即将母体子宫颈内样品在醇固定剂中固定，并且该在醇固定剂中的固定在通过用醛固定剂处理来固定胎儿绒毛外滋养层细胞产生醛固定的胎儿绒毛外滋养层细胞之前进行；在醛固定之后裂解经分离的胎儿绒毛外滋养层细胞，产生裂解物，清洗所述裂解物以促使除去由醛固定剂引入的交联，产生经清洗的裂解物；从所述经清洗的裂解物中提取胎儿绒毛外滋养层细胞RNA；以及测定所述胎儿绒毛外滋养层细胞RNA以确定所述胎儿绒毛外滋养层细胞RNA的一个或更多个特征。根本文档来自技高网...

【技术保护点】
测定来自胎儿绒毛外滋养层细胞的RNA的方法，包括：从妊娠受试者获得母体子宫颈内样品；从所述母体子宫颈内样品中移除胎儿绒毛外滋养层细胞，产生经分离的胎儿绒毛外滋养层细胞；通过用醛固定剂处理来固定胎儿绒毛外滋养层细胞，产生醛固定的胎儿绒毛外滋养层细胞；清洗所述醛固定的胎儿绒毛外滋养层细胞或清洗经分离的醛固定的胎儿绒毛外滋养层细胞的裂解物以促使除去由醛固定剂引入的交联，产生经清洗的胎儿绒毛外滋养层细胞或经清洗的裂解物；从经清洗的胎儿绒毛外滋养层细胞或经清洗的裂解物中提取胎儿绒毛外滋养层细胞RNA；以及测定所述胎儿绒毛外滋养层细胞RNA以确定胎儿绒毛外滋养层细胞RNA的一个或更多个特征。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.10.10 US 62/062,4331.测定来自胎儿绒毛外滋养层细胞的RNA的方法，包括：从妊娠受试者获得母体子宫颈内样品；从所述母体子宫颈内样品中移除胎儿绒毛外滋养层细胞，产生经分离的胎儿绒毛外滋养层细胞；通过用醛固定剂处理来固定胎儿绒毛外滋养层细胞，产生醛固定的胎儿绒毛外滋养层细胞；清洗所述醛固定的胎儿绒毛外滋养层细胞或清洗经分离的醛固定的胎儿绒毛外滋养层细胞的裂解物以促使除去由醛固定剂引入的交联，产生经清洗的胎儿绒毛外滋养层细胞或经清洗的裂解物；从经清洗的胎儿绒毛外滋养层细胞或经清洗的裂解物中提取胎儿绒毛外滋养层细胞RNA；以及测定所述胎儿绒毛外滋养层细胞RNA以确定胎儿绒毛外滋养层细胞RNA的一个或更多个特征。2.权利要求1的方法，其中所述用醛固定剂处理在从母体子宫颈内样品中移除胎儿绒毛外滋养层细胞之前和/或之后进行。3.权利要求1的方法，其中在从妊娠受试者获得样品之后立即固定所述母体子宫颈内样品。4.权利要求1-3中任一项的方法，其中在从妊娠受试者获得样品之后立即将所述母体子宫颈内样品在醇固定剂中固定，并且该在醇固定剂中的固定在通过用醛固定剂处理来固定胎儿绒毛外滋养层细胞产生醛固定的胎儿绒毛外滋养层细胞之前进行。5.权利要求1-3中任一项的方法，其中在从妊娠受试者获得样品之后立即通过用醛固定剂处理来固定所述母体子宫颈内样品。6.权利要求1-5中任一项的方法，其中测定所述胎儿绒毛外滋养层细胞RNA的方法包括测序、PCR、定量PCR、实时PCR或其任意两种或更多种的组合。7.权利要求1-6中任一项的方法，其中所述妊娠受试者是人。8.权利要求1-7中任一项的方法，其中从所述母体子宫颈内样品中移除胎儿绒毛外滋养层细胞的步骤包括使胎儿绒毛外滋养层细胞与特异地...

【专利技术属性】
技术研发人员：D·R·阿尔曼特，S·德鲁罗，
申请(专利权)人：韦恩州立大学，
类型：发明
国别省市：美国,US