通道调节剂制造技术

本发明专利技术涉及包含连接蛋白调节剂、泛连接蛋白调节剂、间隙连接调节剂、半通道调节剂和泛连接蛋白通道调节剂的组合物和制造物品，以及它们单独或组合用于治疗眼部和其他病症的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】通道调节剂相关申请的引证本专利申请是要求于2014年11月14日提交的美国临时申请序列号62/080,217；于2014年11月26日提交的美国临时申请序列号62/085,226；于2015年4月10日提交的美国临时申请序列号62/146,128；于2015年4月14日提交的美国临时申请序列号62/147,488；于2014年8月22日提交的新西兰申请序列号628630；以及于2015年7月2日提交的新西兰申请序列号709673的优先权的美国专利申请；所述专利申请各自的内容以引用的方式整体并入本文。
本专利技术涉及连接蛋白和泛连接蛋白通道调节剂和调节。
技术介绍
下述包括可用于理解本专利技术的信息。它并非承认本文明确或暗示引用的信息、出版物或文献中的任何是对于目前描述或请求保护的本专利技术的现有技术或必不可少的。本文提及或鉴定的所有出版物、专利、相关专利申请和其他书面或电子材料以引用的方式在此整体并入本文。所并入的信息与提交的申请的部分一样多，如同所有文本和其他内容在专利申请中重复一样，并且应当被视为所提交的专利申请的文本和内容的部分。间隙连接是在大多数动物细胞类型之间发现的专门的细胞间连接。它们在身体的几乎所有组织中表达，除了成熟的骨骼肌和移动细胞类型例如精子和红细胞之外。间隙连接直接连接两个细胞的细胞质，这允许不同分子、离子和电脉冲直接通过细胞之间的调节门。与关闭(紧密)连接和锚定(粘附和桥粒)连接形成对比，间隙连接不将膜密封在一起，它们的功能也不是限制材料在膜之间的通过。相反，间隙连接通道允许某些分子从一个细胞穿梭到另一个，因此通过直接连接邻近细胞的内部而提供物理连通通道。一个间隙连接通道由两个连接子(或半通道)组成，所述连接子连接穿过邻近细胞之间的细胞间隙并且允许细胞内分子在这些细胞之间流动。间隙连接的每个连接子驻留在相邻的细胞膜中，并且通过六个个别连接蛋白(“Cx”或“Cxn”)的共价寡聚形成。Yeager(1998)Structureofcardiacgapjunctionintercellularchannels,JStructBiol121:231-245。连接子可包含一种或多种不同的连接蛋白，尽管它们通常以同六聚体的形式。人类连接蛋白基因和蛋白质家族现在编号为21。(G&WilleckeK.(2004).Gapjunctionsandtheconnexinproteinfamily.CardiovascRes.62:228-232)。Structuralandfunctionaldiversityofconnexingenesinthemouseandhumangenome,BiolChem383:725-737。在不同组织类型中表达的连接蛋白的范围存在很多变化，并且通常在细胞类型中存在超过一种连接蛋白形式。参见Sohl和Willecke(2004)。尽管存在相容性限制，但连接蛋白和连接子的不同组合能够彼此相互作用。Marziano等人HumMolGenet.12:805-812(2003)。连接蛋白及其相关的间隙连接通道具有一系列尺寸和构型，其被认为对可通过的化学物种提供一定特异性。Niessen等人(2000)Selectivepermeabilityofdifferentconnexinchannelstothesecondmessengerinositol1,4,5-trisphosphate,JCellSci113(Pt8):1365-1372。所有连接蛋白均共享共有结构，其具有四个跨膜结构域、两个细胞外环、细胞质环、短细胞质氨基末端和长度可显著不同的羧基末端。Unger等人(1999)Electroncryo-crystallographyofarecombinantcardiacgapjunctionchannel,NovartisFoundSymp219:22-30&discussion31-43。连接蛋白通常根据其分子量命名，例如，Cx26是26kDa的连接蛋白。连接蛋白之间的主要结构差异是C末端细胞质尾部的长度，其中连接蛋白26几乎没有尾部(16个氨基酸)，而连接蛋白43和32具有长尾部和中等尾部(分别为156和73个氨基酸)。已预测不同连接蛋白的细胞质尾部的大小和氨基酸序列的差异尤其涉及通道开放和关闭构象。间隙连接的功能和/或功能障碍已牵涉许多病症。例如，连接蛋白30在克鲁斯顿综合征(有汗性外胚层发育不良)中突变，并且连接蛋白26基因中的突变是遗传性耳聋的最常见原因。人类连接蛋白32基因中的突变引起X-连锁的夏-马-图三氏病，这是遗传性神经病，而眼牙指发育不良一般被认为由编码连接蛋白43的基因中的突变引起。泛连接蛋白是跨膜通道糖蛋白家族，包括Panx1、Panx2和Panx3。泛连接蛋白与连接蛋白共享相似的结构特征，其由4个跨膜结构域、2个细胞外环和1个细胞内环，连同细胞内N末端尾部和C末端尾部组成。Panx1在许多哺乳动物组织中表达，而Panx2和Panx3表达更受限制。Panx1已与钙波的传播、声音(tone)的调节、粘液纤毛肺清除和味蕾功能相关。Panx1在脑、膀胱、睾丸和卵巢中表达，而Panx2主要在脑中表达，并且Panx3在皮肤、软骨、心脏、肾和耳蜗中表达。Panx1半通道已牵涉ATP释放、钙信号传导、角质形成细胞和成骨细胞分化、味觉接受、细胞死亡、缺血后神经变性、肿瘤抑制和癫痫发作。Panx2涉及神经元的分化，而Panx3在软骨细胞、成骨细胞的分化以及精子的成熟和转运中起作用。Panx1定位于质膜，而Panx2细胞内定位。连接蛋白和泛连接蛋白通道之间的一个主要区别是泛连接蛋白通道不形成细胞-细胞通道，并且已提示泛连接蛋白的高度糖基化的细胞外环干扰对接过程。与连接蛋白半通道一样，泛连接蛋白通道据说由许多因素激活，但也显示一些差异。连接蛋白半通道和泛连接蛋白通道两者均促成于谷氨酸和ATP释放，尽管泛连接蛋白通道对钙离子浓度的减少不敏感。
技术实现思路
本文描述和请求保护的本专利技术具有许多属性和实施例，包括但不限于在本
技术实现思路
中阐述或描述或引用的那些。它并不预期是包括所有的，并且本文描述和请求保护的本专利技术并不限于本引言中鉴定的特征或实施例或者并不由所述特征或实施例限制，其仅被包括用于举例说明性目的而不是限制性目的。本专利技术的一个目的是提供用于调节间隙连接通道、半通道和/或泛连接蛋白通道和/或用于治疗病症的化合物、组合物、制剂、试剂盒和方法，所述病症将受益于间隙连接通道、半通道和/或泛连接蛋白通道的调节。因此，在一个方面，本专利技术涉及用于调节间隙连接通道、间隙连接半通道和/或泛连接蛋白通道的方法，并且特别地但不排他地，涉及用于治疗对于其间隙连接通道、间隙连接半通道和/或泛连接蛋白通道的调节可以是有益的病症的方法，该方法包括施用间隙连接通道调节剂，例如式I化合物(例如托那博沙)，连接蛋白拟肽化合物，和/或其前述化合物中任何的一种或多种类似物或前药，和/或施用泛连接蛋白调节剂，例如式VI化合物(例如丙磺舒)和/或其前述化合物中任何的一种或多种类似物或前药，和/或泛连接蛋白拟肽化合物和/或其前述化合物中任何的一种或多种类似物或前药。在一个方面，本专利技术提供了本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于治疗受试者的青光眼、DME、眼部纤维化、视网膜灌注损伤或眼部缺氧的方法，所述方法包括将治疗有效量的间隙连接调节剂、连接蛋白调节剂、泛连接蛋白调节剂或泛连接蛋白通道调节剂施用于所述受试者的眼。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.08.22 NZ 628630;2015.07.02 NZ 709673;2014.11.1.一种用于治疗受试者的青光眼、DME、眼部纤维化、视网膜灌注损伤或眼部缺氧的方法，所述方法包括将治疗有效量的间隙连接调节剂、连接蛋白调节剂、泛连接蛋白调节剂或泛连接蛋白通道调节剂施用于所述受试者的眼。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述青光眼的特征在于青光眼性眼神经病变和/或眼内压相关神经病变。3.根据权利要求1或2中任一项所述的方法，其中所述连接蛋白调节剂是连接蛋白43调节剂。4.根据权利要求3所述的方法，其中所述青光眼是眼内压相关神经病变。5.根据权利要求4所述的方法，其中所述青光眼是开角型青光眼或闭角型青光眼。6.根据权利要求5所述的方法，其中治疗视网膜神经节细胞的丧失。7.根据权利要求1所述的方法，其中减少内部视网膜中的炎症。8.根据权利要求1所述的方法，其中增加通过小梁网的流量。9.根据权利要求1所述的方法，其中所述间隙连接调节剂、连接蛋白调节剂或泛连接蛋白调节剂与Rho激酶抑制剂、前列腺素、前列腺素类似物、碳酸酐酶抑制剂、α2激动剂、β阻滞剂、F2α前列腺素类似物、抗凋亡剂、N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂和谷氨酸盐释放抑制剂中的一种或多种组合施用。10.根据权利要求9所述的方法，其中所述间隙连接调节剂是与Rho激酶抑制剂组合施用的连接蛋白调节剂。11.根据权利要求1所述的方法，其中治疗眼部缺氧减少脉络膜炎症。12.根据权利要求11所述的方法，其中所述连接蛋白调节剂是连接蛋白43调节剂。13.根据权利要求11所述的方法，其中所述连接蛋白调节剂是连接蛋白43调节剂，并且所述连接蛋白43调节剂与眼部治疗试剂组合施用。14.根据权利要求11所述的方法，其中减少脉络膜毛细血管内皮细胞丧失和/或脉络膜毛细血管脱落。15.根据权利要求11所述的方法，其中减少脉络膜炎症。16.根据权利要求12所述的方法，其中减慢或预防脉络膜毛细血管内皮细胞丧失。17.一种用于治疗受试者的视网膜动脉阻塞或视网膜中央静脉阻塞的方法，所述方法包括将治疗有效量的连接蛋白调节剂或泛连接蛋白调节剂施用于所述受试者的眼。18.根据权利要求1、3、11或17中任一项所述的方法，其中所述间隙连接调节剂、连接蛋白调节剂或泛连接蛋白调节剂选自反义寡核苷酸、反义多核苷酸、式I化合物和式VI化合物。19.根据权利要求18所述的方法，其中所述寡核苷酸或多核苷酸的至少一个核苷酸是经修饰的。20.根据权利要求18所述的方法，其中所述寡核苷酸或多核苷酸的至少一个核苷酸包含至少一个构象应变核苷酸、至少一个经修饰的核苷间键、至少一个经修饰的糖部分和/或至少一个经修饰的核碱基。21.根据权利要求19所述的方法，其中所述构象应变核苷酸是锁定核苷酸(LNA)。22.根据权利要求19所述的方法，其中所述构象应变核苷酸是桥接核酸(BNA)。23.根据权利要求21所述的方法，其中所述锁定核苷酸选自下述类型之一：2′-O—CH2-4′(氧基-LNA)、2′-CH2—CH2-4′(亚甲基-LNA)、2′—NH—CH2-4′(氨基-LNA)、2′—N(CH3)—CH2-4′(甲基氨基-LNA)、2′-S—CH2-4′(硫代-LNA)和2′-Se—CH2-4′(硒基-LNA)。24.根据权利要求19所述的方法，其中反义化合物是包含天然存在的核碱基和未经修饰的核苷间键的反义寡核苷酸。25.根据权利要求18所述的方法，其中所述反义化合物是包含至少一个经修饰的核苷间键的反义寡核苷酸。26.根据权利要求25所述的方法，其中所述经修饰的核苷间键是硫代磷酸酯键。27.根据权利要求19所述的方法，其中所述反义化合物是包含至少一个经修饰的糖部分或至少一个经修饰的核碱基的寡核苷酸。28.根据权利要求18所述的方法，其中所述反义化合物包含选自SEQIDNO:1-16的寡核苷酸序列，并且所述寡核苷酸的长度不超过40个核苷酸。29.根据权利要求18所述的方法，其中所述反义化合物靶向编码具有选自SEQIDNO:17的序列的连接蛋白的核酸分子的至少约8个核苷酸。30.根据权利要求1、3、11或18-29中任一项所述的方法，其中反义化合物是长度为约15至约35个核苷酸或约15至约40个核苷酸的反义寡核苷酸。31.根据权利要求18所述的方法，其中反义化合物包含选自SEQIDNO:1-16或SEQIDNO:17的区域的长度不超过40个核苷酸的核碱基序列。32.根据权利要求1、3、11、13、17或18中任一项所述的方法，其中所述连接蛋白调节剂通过局部、角膜、眼内、玻璃体内、结膜下或眼周施用进行施用。33.根据权利要求32所述的方法，其中所述连接蛋白调节剂通过眼内注射或玻璃体内注射进行施用。34.根据权利要求32或33中任一项所述的方法，其中反义化合物施用一次。35.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述受试者是人。36.根据权利要求28所述的方法，其中所述反义化合物与具有选自SEQIDNO:1至16的序列或SEQIDNO:17的区域的多核苷酸具有至少约80百分比、至少约90百分比、至少约95百分比或至少约97百分比同源性。37.根据权利要求13所述的方法，其中所述眼部治疗试剂选自抗VEGF调节剂、mTOR抑制剂、补体调节剂、PDGF调节剂例如PDGF拮抗剂、S1P产生抑制剂、角鲨胺、PEDF产生剂、微管蛋白结合剂、整联蛋白抑制剂、及其任何混合物。38.根据权利要求37所述的方法，其中所述眼部治疗试剂选自下述眼部治疗试剂中的一种或多种：阿柏西普、拉姆帕力珠单抗、松昔珠单抗、芬维A胺、雷珠单抗、贝伐珠单抗、蛋白质睫状神经营养因子、血管内皮生长因子调节化合物和低氧诱导因子1-α调节化合物、溴莫尼定、噻吗洛尔、曲伏前列素、多佐胺、碳酸酐酶抑制剂、β阻滞剂、前列腺素类似物、抗凋亡剂、N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂或谷氨酸盐释放抑制剂、α2激动剂和β阻滞剂的组合、α2激动剂和碳酸酐酶抑制剂的组合、及其任何混合物。39.根据权利要求38所述的方法，其中与用单独的所述眼部治疗试剂的单一疗法治疗的受试者相比较，脉络膜毛细血管脱...

【专利技术属性】
技术研发人员：科林·理查德·格林，金易林，安东尼·菲利普斯，布拉德福德·詹姆斯·杜夫特，
申请(专利权)人：奥克兰联合服务有限公司，欧耐柯萨斯医疗有限公司，
类型：发明
国别省市：新西兰,NZ