含脱辅基水母发光蛋白的组合物及其用于治疗神经元炎症的方法技术

本发明专利技术涉及预调节神经元以减少对象中的神经元炎症的方法。所述方法包括给予对象脱辅基水母发光蛋白的步骤，其中所述对象的神经元经预调节以减小所述对象中的后续神经元炎症。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】含脱辅基水母发光蛋白的组合物及其用于治疗神经元炎症的方法相关申请的交叉引用本申请要求2014年11月11日提交的美国临时申请62/078,099的权益，其通过引用其全文纳入本文用于所有目的。专利
本专利技术一般涉及可用于治疗神经元炎症的组合物。更具体地，本专利技术涉及含脱辅基水母发光蛋白的组合物和采用那些组合物来治疗神经元炎症的方法。专利技术背景2009年，在美国，大约每19例死亡中就有一例因中风所致，这使其成为仅次于心脏疾病和癌症的第三大死因。因此，需要寻求改善中风后的损伤的方式势在必行。人们对于局部缺血中钙的作用以及通过阻断其在局部缺血后的毒性作用来提供可能的神经保护给予了极大的关注。钙(Ca2+)在多种神经元过程中起关键作用，包括神经递质释放和突触可塑性。由于持续活性，神经元持续经历胞内Ca2+的波动然而胞内Ca2+的过量或持续增加对于神经元可能是毒性的。因此，神经元胞内Ca2+受到极其严格的调控，并且存在允许神经元限制或控制胞浆Ca2+水平的若干机制。具体而言，钙结合蛋白(CaBP；例如钙结合蛋白、小清蛋白和钙网膜蛋白)对于胞浆Ca2+的结合和缓冲而言是重要的。关于海马体的研究已显示CaBP的存在提供一些抵抗兴奋毒性损伤的保护，而该损伤通常导致细胞死亡。有趣的是，随年龄增长，且在神经退行性疾病(包括阿兹海默病和帕金森病)中，观察到减少的CaBP水平。意图通过在缺血性损伤之前给予CaBP使毒性局部缺血过程中Ca2+最小化的治疗也显示了积极结果。例如，Yenari等在诱导局部缺血之前用钙结合蛋白处理动物并发现钙结合蛋白的过表达是神经保护性的。此外，Fan等在局部缺血之前用钙结合蛋白处理大鼠并显示钙结合蛋白处理的动物中有较小的梗死体积、较好的行为恢复，和减少的凋亡。事实上，已有大量研究聚焦于对中风有害作用的了解。有趣的是，中风的一项主要风险因素是衰老，而脑衰老的一项突出假设是衰老的Ca2+假设。该假设辩称，年龄相关的调节钙和钙依赖性过程的能力变化是认知减退和神经退行性疾病易感性增加的关键促进因素。鉴于这些年龄相关的Ca2+变化，以及Ca2+在缺血性细胞死亡中的关键作用，大量研究聚焦于神经元和神经胶质中的Ca2+调节异常。已知局部缺血之后的过度胞内Ca2+累积会通过兴奋毒性加强细胞死亡。缺血性损伤之后，Ca2+通过电压门控的Ca2+通道(VGCC)，通过NMDA受体，并且通过从胞内细胞器释放，在细胞中累积。许多研究已显示，阻断通过NMDA受体、VGCC，或两者结合的Ca2+进入可能具有抵抗局部缺血的神经保护性。有趣的是，当NMDA受体阻断剂进入临床试验时，它们无法提供神经保护作用，并且它们产生了不希望的副作用，例如幻觉和昏迷。尽管尚不确定NMDA受体阻断剂为何会在临床试验中失败，但很明确，需要针对缓解缺血性中风的毁灭性作用的持续研究。尽管已有进展，但仍需要治疗神经元炎症的替代性的新疗法。具体而言，需要相较于先前制剂具有较少副作用的药物或营养组合物，它们如果被开发出来则将满足医疗及营养卫生界长期以来的需求。
技术实现思路
本专利技术部分基于专利技术人对于脱辅基水母发光蛋白(apoaequorin)的近期研究，脱辅基水母发光蛋白是一种钙结合蛋白，专利技术人预料之外地发现脱辅基水母发光蛋白具有新的神经保护能力。具体而言，已发现脱辅基水母发光蛋白可用于预调节(preconditioning)对象中的神经元以减少后续神经元炎症。因此，本专利技术提供含脱辅基水母发光蛋白的组合物及其使用方法，其在神经保护性应用中提供实质性益处。在第一方面中，本专利技术涉及预调节神经元以减少对象中的神经元炎症的方法。所述方法包括给予对象脱辅基水母发光蛋白的步骤，其中所述对象的神经元经预调节以减少神经元炎症。在一个实施方式中，通过注射对所述对象进行给予。在另一个实施方式中，经口递送对所述对象进行给予，例如，采用配制成单位剂型的脱辅基水母发光蛋白，所述单位剂型选自片剂或胶囊。在某些实施方式中，脱辅基水母发光蛋白以营养组合物的形式给予对象。可理解，本专利技术涵盖脱辅基水母发光蛋白，其用于预调节神经元以减少对象中的神经元炎症，以及脱辅基水母发光蛋白在制造用于预调节神经元以减少对象中的神经元炎症的组合物中的用途。另一方面，本专利技术涉及降低对象中肿瘤坏死因子α(TNFα)蛋白质水平的方法。所述方法包括给予对象脱辅基水母发光蛋白的步骤，其中所述对象的TNFα蛋白质水平被降低。在某些实施方式中，通过注射对所述对象进行给予。在另一些实施方式中，通过经口递送对所述对象进行给予，例如，采用配制成单位剂型的脱辅基水母发光蛋白，所述单位剂型选自片剂或胶囊。在某些实施方式中，脱辅基水母发光蛋白以营养组合物的形式给予对象。可理解，本专利技术涵盖脱辅基水母发光蛋白，其用于降低对象中的TNFα蛋白质水平，以及脱辅基水母发光蛋白在制备用于降低对象中的TNFα蛋白质水平的组合物中的用途。本专利技术提供优于现有技术组合物和方法的多项益处，其中，其通过其神经保护性的功能对于对象的身心健康提供总体改善。在阅读了说明书和权利要求后，本专利技术的其他目标、特征和优势是显而易见的。附图的简要说明图1A-C描述短时间海马脑切片中氧-葡萄糖剥夺对于细胞死亡的作用。A)实验设计的图表。冠状海马切片在人造脑脊液(aCSF)中孵育1小时。一半切片转移至缺血性条件，持续5分钟的氧-葡萄糖剥夺(OGD)，而另一半保持含氧正常(无OGD)。然后，全部切片被转移至aCSF进行30分钟的再灌注和台盼蓝染色。然后，切片在10％中性缓冲的福尔马林中固定。B)保持含氧正常(无OGD)的切片和经历5分钟OGD的切片中海马体的区域CA1中的台盼蓝染色的代表性图像。注意到，相较于OGD切片，在含氧正常切片中存在较少染色。C)相较于保持含氧正常的切片，经历5分钟OGD的切片的海马体的区域CA1中存在台盼蓝染色的神经元数量的显著增加(*，p＜.01)。图2A-C描述脱辅基水母发光蛋白对于缺血性细胞死亡的剂量依赖性作用。A)实验设计图表。对背侧海马体中双边插管的大鼠的一个半球中输注0、0.4、1或4％脱辅基水母发光蛋白(AQ)，而另一半球中输注载剂(0％AQ)。输注后一天，冠状海马切片被切下并在人造脑脊液(aCSF)中孵育1小时。全部切片转移至缺血性条件经历5分钟的氧-葡萄糖剥夺(OGD)。然后，切片被转移至aCSF进行30分钟的再灌注和台盼蓝染色。然后，切片在10％中性缓冲的福尔马林中固定。B)载剂处理的切片或4％AQ处理的切片中，局部缺血之后，海马体的区域CA1中的台盼蓝染色的典型图像。注意到，相较于载剂处理的切片，AQ处理的切片中存在较少染色。C)图表显示神经保护(援救的细胞百分比)和脱辅基水母发光蛋白剂量的关系。相较于0％AQ(载剂)，用1或4％AQ(但非0.4％AQ)处理的大鼠中存在显著神经保护(*，p＜.01)。图3A-C描述脱辅基水母发光蛋白对于缺血性细胞死亡的时间依赖性作用。A)实验设计图表。对背侧海马体中双边插管的大鼠的一个半球中输注4％脱辅基水母发光蛋白(AQ)，而另一半球中输注载剂(0％AQ)。输注后1小时、1天、2天、3天或5天切下冠状海马切片，且切片在人造脑脊液(aCSF)中孵育1小时。全部切片转移至缺血性条件经历5分钟的氧-葡萄糖本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种预调节神经元以减少对象中的神经元炎症的方法，其包括：给予对象脱辅基水母发光蛋白，其中所述对象的神经元经预调节以减少神经元炎症。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.11.11 US 62/078,0991.一种预调节神经元以减少对象中的神经元炎症的方法，其包括：给予对象脱辅基水母发光蛋白，其中所述对象的神经元经预调节以减少神经元炎症。2.如权利要求1所述的方法，其中所述给予通过注射进行。3.如权利要求1所述的方法，其中所述给予通过经口递送进行。4.如权利要求3所述的方法，其中所述组合物是单位剂型形式，所述单位剂型选自片剂或胶囊。5.如权利要求3所述的方法，其中脱辅基水母发光蛋白以营养组合物的形式给予所述对象。6.脱辅基水母发光蛋白，其用于预调节神经元以减少对象中的神经元炎症。7.脱辅基水母发光蛋白在制备用于预调节神经元以减少对...

【专利技术属性】
技术研发人员：M·Y·安德伍德，J·R·小莫耶，
申请(专利权)人：昆西生物科学有限公司，
类型：发明
国别省市：美国,US