一种快速提取果梅花芽中蛋白质的方法技术

本发明专利技术公开了一种快速提取果梅花芽中蛋白质的方法，以25‑30mg果梅花芽为原料，液氮研磨至粉末；加入100‑150μL SDS缓冲液研磨至匀浆，4‑10℃、8000‑12000g短暂离心30‑60秒，煮沸5‑8min，4‑10℃、8000‑12000g离心10‑15分钟，上清即梅组织中的蛋白质。本发明专利技术方法提取得到的蛋白质用于Western‑blot、ChIP试验的应用。相较于这些传统方法，本发明专利技术方法只需要25‑30mg的果梅花芽材料，整个提取过程只需要30分钟，大大减少了样品的使用量及提取时间。

【技术实现步骤摘要】
一种快速提取果梅花芽中蛋白质的方法
本专利技术涉及一种快速提取果梅花芽中蛋白质的方法，专用于Western-blot、ChIP等蛋白试验。
技术介绍
果树分子生物学领域的研究越来越深入，然而长期以来，由于果树木本植物的特性，其蛋白质的提取过程十分复杂耗时，因此进一步进行Western-blot、ChIP等试验显得尤为困难。Western-blot(Western印迹技术)，也称Western杂交技术，是一种常见的半定量分析生物组织蛋白质表达的方法，是蛋白质分析的常用分子生物学技术之一。果梅(PrunusmumeSiebetZucc)属蔷薇科(Rosaceae)李属(PrunusL.)，原产中国，是我国的特色树种，亦是我国重要的创汇果树。花是果树重要的生殖器官，在梅产量形成中具有重要意义。研究花芽发育过程的蛋白质组学，是进一步揭示梅花器官的形成和发育以及休眠机制的有效手段。目前，鲜有关于梅Western-blot研究的报道，从梅组织中提取高质量的总蛋白，是开展梅Western-blot技术研究的前提。关于梅组织总蛋白质的提取已有文献报道[1]，一般传统方法如TCA/丙酮沉淀法、酚抽法及本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种快速提取果梅花芽中蛋白质的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)、以25‑30mg梅花芽为原料，液氮研磨至粉末；(2)、加入100‑150μL SDS缓冲液研磨至匀浆，4‑10℃、8000‑12000g短暂离心30‑60秒，煮沸5‑8min，4‑10℃、8000‑12000g离心10‑15分钟，上清即梅组织中的蛋白质。

【技术特征摘要】
1.一种快速提取果梅花芽中蛋白质的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)、以25-30mg梅花芽为原料，液氮研磨至粉末；(2)、加入100-150μLSDS缓冲液研磨至匀浆，4-10℃、8000-12000g短暂离心30-60秒，煮沸5-8min，4-10℃、8000-12000g离心10-15分钟，上清即梅组织中的蛋白质。2.根据权利要求1所述的快速提取果梅花芽中蛋白质的方法，其特征在于步骤(2)中，所述的SDS缓冲液为：pH6.8的1.0mol/LTris-HCl1...

【专利技术属性】
技术研发人员：侍婷，高志红，倪照君，吴欣欣，张勇，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32