靶向血小板膜糖蛋白GPIbα的抑制肿瘤转移的单克隆抗体及其筛选方法技术

本发明专利技术涉及一种靶向血小板膜糖蛋白GPIbα的抑制肿瘤转移的单克隆抗体，所述的单克隆抗体为特异性结合血小板膜蛋白GPIbα的单克隆抗体。本发明专利技术还涉及一种用于筛选靶向血小板膜糖蛋白GPIbα的肿瘤转移抑制剂的方法，分为五部分：第一部分是利用酶联免疫吸附测定建立的初步筛选模型，第二部分是利用免疫印迹法建立的二次筛选模型，第三、四、五部分是利用流式细胞仪及连续光谱荧光仪建立的功能检测模型。本发明专利技术中建立的筛选模型可显著减少在获得靶向血小板膜糖蛋白GPIbα抑制剂过程中对人源血小板的需求，并最大程度在体外实验中活化肿瘤细胞，模拟了肿瘤细胞微环境，提高了筛选准确性，所获得的抗体YQ3具有很好地临床应用前景。

Monoclonal antibody against tumor metastasis of targeted platelet membrane glycoprotein GPIb alpha and screening method thereof

The invention relates to a monoclonal antibody against tumor metastasis targeting a platelet membrane glycoprotein GPIb alpha, which is a monoclonal antibody that specifically combines platelet membrane protein GPIb alpha. The invention also relates to a method for screening targeted platelet membrane glycoprotein GPIb alpha inhibitor of tumor metastasis, divided into five parts: the first part is the preliminary screening model was established for the determination by ELISA, the second part is the two screening model established by Western blot, the third, fourth, fifth part is established by flow cytometry instrument and continuous spectrum fluorescence instrument function detection model. Screen model of the invention can significantly reduce the demand for human platelet glycoproteins in platelet membrane to obtain the target GPIb alpha inhibitor in the process, and the greatest degree of in vitro activation of tumor cells, simulate the microenvironment of tumor cells, improve the accuracy of screening, YQ3 antibody obtained has good clinical application prospect.

【技术实现步骤摘要】
靶向血小板膜糖蛋白GPIbα的抑制肿瘤转移的单克隆抗体及其筛选方法
本专利技术涉及生物
，特别涉及药理学，具体是指一种靶向血小板膜糖蛋白GPIbα的抑制肿瘤转移的单克隆抗体及其筛选方法。
技术介绍
血小板能够促进肿瘤转移，其促进肿瘤转移的第一步及关键点是肿瘤细胞激活血小板形成瘤栓。血小板表面的多种粘附分子例如糖蛋白(Glycoprotein,GP)Ib-IX-V、GPIIb-IIIa等相互作用从而介导肿瘤细胞与血小板的粘附。其中GPIbα是GPIb-IX-V复合物中最大也是最重要的组成部分。有研究表明，敲除GPIbα基因或替换GPIbα胞外区的小鼠模型可显著减少小鼠肺癌的肺部转移，但会并发血小板减少症(JainS,ZukaM,LiuJ,etal.ProcNatlAcadSciUSA,2007,104(21))。另有研究表明，抗GPIIb/IIIa单克隆抗体可以有效阻断血小板与肿瘤细胞的粘附和聚集，但存在潜在的出血并发症也限制了这类单克隆抗体的应用(AmirkhosraviA,MousaSA,AmayaM,etal.ThrombHaemost,2003,90(3):549-554本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种靶向血小板膜糖蛋白GPIbα的抑制肿瘤转移的单克隆抗体，其特征在于，所述的单克隆抗体为特异性结合血小板膜蛋白GPIbα的单克隆抗体。

【技术特征摘要】
1.一种靶向血小板膜糖蛋白GPIbα的抑制肿瘤转移的单克隆抗体，其特征在于，所述的单克隆抗体为特异性结合血小板膜蛋白GPIbα的单克隆抗体。2.根据权利要求1所述的靶向血小板膜糖蛋白GPIbα的抑制肿瘤转移的单克隆抗体，其特征在于，所述的单克隆抗体抑制肿瘤转移且不影响血小板功能。3.一种用于筛选靶向血小板膜糖蛋白GPIbα的肿瘤转移抑制剂的方法，其特征在于，所述的方法包括：第一筛选模型，利用酶联免疫吸附技术初步筛选出靶向GPIb-IX复合物的样品；第二筛选模型，利用免疫印迹法，在筛选所述的第一筛选模型的基础上进一步筛选出靶向GPIbα的样品；第三筛选模型，利用连续光谱荧光仪测定样品对血小板与肿瘤细胞粘附作用的影响，筛选出对两者粘附具有抑制作用的抑制剂；第四筛选模型，利用流式细胞术检测样品对肿瘤细胞诱导血小板活化的影响，以筛选出具有抑制作用的抑制剂；第五筛选模型，利用流式细胞术检测血小板活性蛋白表达，以筛选出不影响血小板数量及功能的抑制剂。4.根据权利要求3所述的用于筛选靶向血小板膜糖蛋白GPIbα的肿瘤转移抑制剂的方法，其特征在于，所述的第一筛选模型具体包括：采用ELISA技术，依照双抗体夹心法原理，首先将靶向血小板膜糖蛋白GPIX的单克隆抗体吸附于酶标板上，加入微量血...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁欣，刘建文，亓莹雪，
申请(专利权)人：华东理工大学，
类型：发明
国别省市：上海,31