一种大豆除草剂检测液制备方法及残留量的测定方法技术

本发明专利技术公开了一种大豆除草剂检测液制备方法及残留量的测定方法，大豆除草剂检测液制备方法打破了现有技术中对于大豆中除草剂残留量需要每一种除草剂使用一种溶剂进行提取的方式，该方法可以一次性将多种除草剂并同时提取，例如，可以同时将氟乐灵(trifluralin)、甲草胺(alachlor)、异丙甲草胺(metolachlor)、吡氟禾草灵(fluazifop‑butyl)和烯禾啶(sethoxydim)大豆田常用的除草剂一次性进行提取，获得的检测液可以通过气相色谱‑质谱联用仪(GC‑MS)同时测定一次性将多种除草剂进行检测。

【技术实现步骤摘要】
一种大豆除草剂检测液制备方法及残留量的测定方法
本专利技术涉及除草剂检验检测
，特别是涉及一种抗草甘膦转基因大豆除草剂检测液制备方法及所述的除草剂检测液中除草剂残留量的测定方法。
技术介绍
氟乐灵(trifluralin)、甲草胺(alachlor)、异丙甲草胺(metolachlor)、吡氟禾草灵(fluazifop-butyl)和烯禾啶(sethoxydim)是大豆田常用的除草剂，主要用于防除禾本科杂草和一些阔叶杂草，每亩的登记施用剂量均小于100g(有效成分)。以上种类除草剂可与大多数有机溶剂混溶，但由于大豆中脂肪、脂肪酸和淄醇类物质含量较高，所以净化困难。目前测定大豆中这些除草剂残留量的检测标准和方法相对比较落后，需要对几种农药分别进行检测，其中氟乐灵采用GB/T5009.172-2003《大豆、花生、豆油、花生油中的氟乐灵残留量的测定》、异丙甲草胺采用GB/T5009.174-2003《花生、大豆中异丙甲草胺残留量的测定》、吡氟禾草灵和精吡氟禾草灵采用GB/T5009.142-2003《植物性产品中吡氟禾草灵、精吡氟禾草灵残留量的测定》，可见，现有技术中由于不能够同时将上述四种除草剂一次性提取，要对上述四种除草剂进行检测，就需要采用不同溶剂逐一对各种除草剂进行分别提取，然后采用气相色谱法单独对其检测。这样使得检测的工作效率大大降低。
技术实现思路
本专利技术提供了一种大豆除草剂检测液制备方法及残留量的测定方法通过该法可以同时测定抗草甘膦转基因大豆中氟乐灵、甲草胺、异丙甲草胺、吡氟禾草灵、烯禾啶的残留量。本专利技术提供了如下方案：一种大豆除草剂检测液制备方法，包括：提取：准确称取10.00g检测试样与10g硅藻土混合，移入加速萃取仪的34毫升萃取池中，在10.25～10.56兆帕压力、75～84℃条件下，加热4.5～5.5分钟；用含1％乙酸的乙腈静态萃取2.5～3.2分钟，循环2次，然后用池体积60％的乙腈冲洗萃取池，并用氮气吹扫95～106秒；萃取完毕后，将萃取液混匀，待净化；净化：取10毫升乙腈预洗Envi-18柱，然后将Envi-18柱放入固定架上，下接梨形瓶，移入所述萃取液，并用15毫升乙腈洗涤Envi-18柱，收集萃取液及洗涤液，取旋转蒸发器将收集的液体浓缩至约1毫升，备用；在Sep-PakCarbon/NH2柱中加入2厘米高无水硫酸钠，用4毫升乙腈预洗，下接梨形瓶，放入固定架上；将上述样品浓缩液转移至双层萃取柱中，用3×2毫升乙腈洗涤样液瓶，并将洗涤液移入所述双层萃取柱中，再用25毫升乙腈洗涤所述双层萃取柱；收集上述所有流出物于梨形瓶中，并在37～42℃水浴中旋转浓缩至约0.5毫升，加入2×5毫升正己烷进行溶剂交换两次；最后加入0.02毫升内标溶液，用正己烷定容至1毫升，混匀既得所述检测液。优选的：将检测试样采用四分法分出1千克，全部磨碎并过20目筛后，准确称取10.00g检测试样与10g硅藻土混合。一种用于所述的除草剂检测液中除草剂残留量的测定方法，该方法包括：取不同除草剂标准品，根据大豆中不同除草剂残留限量要求及仪器响应灵敏度，以甲苯为溶剂分别配制各个除草剂的不同浓度混合标准工作溶液，分别取0.1毫升各级混合标准工作溶液加到样品空白基质提取液中，再加入0.020毫升内标溶液，最后定容至1毫升并混匀，将混匀后的所述溶液使用气相-质谱联用仪进行测定，获得标准离子色谱图；所述标准离子色谱图中离子强度为纵坐标，时间为横坐标；取所述检测液使用气相-质谱联用仪在一定色谱条件下进行测定，获得检测离子色谱图；将所述检测离子色谱图与所述标准离子色谱图对比，根据预设的条件获得所述检测中除草剂种类以及含量。优选的：取所述检测液使用气相-质谱联用仪在一定色谱条件下进行测定，所述一定色谱条件包括：色谱柱DB-1701(30m×0.25mm×0.25μm)石英毛细管柱；载气为高纯氦气，流速1.2mL/min；进样口温度290℃；升温程序：80℃保持1min,以30℃/min升至130℃，再以5℃/min升至250℃，再以10℃/min升至300℃，保持5min，无分流进样，1.5min后打开分流阀和隔垫吹扫阀。优选的：所述气相-质谱联用仪配备有电子轰击离子源，所述电子轰击离子源接口温度为280℃，离子源温度为230℃，电子能量为70eV，倍增器电压为1.4kV，SIM方式采集数据，溶剂延迟3.5min。优选的：所述不同除草剂标准品包括氟乐灵标准品、甲草胺标准品、异丙甲草胺标准品、吡氟禾草灵标准品以及烯禾啶标准品。优选的：将所述检测离子色谱图与所述标准离子色谱图对比，根据预设的条件获得除草剂种类以及含量；包括：预先确定所述离子色谱图中各个曲线峰值所在时间段对应的除草剂种类；确定所述检测离子色谱图各个曲线峰值所在时间点，根据所述时间点位于所述标准离子色谱图相应时间段所对应的除草剂标准品种类获得所述检测液中除草剂的种类。根据本专利技术提供的具体实施例，本专利技术公开了以下技术效果：通过本专利技术，可以实现一种大豆除草剂检测液制备方法及残留量的测定方法，在一种实现方式下，大豆除草剂检测液制备方法打破了现有技术中对于大豆中除草剂残留量需要每一种除草剂使用一种溶剂进行提取的方式，该方法可以一次性将多种除草剂同时提取，例如，可以同时将氟乐灵(trifluralin)、甲草胺(alachlor)、异丙甲草胺(metolachlor)、吡氟禾草灵(fluazifop-butyl)和烯禾啶(sethoxydim)是大豆田常用的除草剂一次性进行提取，获得的检测液可以一次性将多种除草剂进行检测。该留量的测定方法建立了气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)同时测定氟乐灵、甲草胺、异丙甲草胺、吡氟禾草灵和烯禾啶的分析方法，方法准确可靠，回收率和精密度符合残留检测要求，检测方法为检验检疫部门加强对进口转基因大豆的监管提高工作效率，也为进一步分析评估转基因大豆的食用安全性提供可利用的原始数据，同时可以为我国制定转基因大豆中相关除草剂残留限量标准提供有价值的参考资料。当然，实施本专利技术的任一产品并不一定需要同时达到以上所述的所有优点。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1是本专利技术实施例三提供的添加在空白基质中的五种除草剂混合标准物质的选择离子色谱图。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例一本专利技术实施例一提供了一种大豆除草剂检测液制备方法，该方法包括：提取：准确称取10.00g检测试样与10g硅藻土混合，移入加速萃取仪的34毫升萃取池中，在10.25～10.56兆帕压力、75～84℃条件下，加热4.5～5.5分钟；用含1％乙酸的乙腈静态萃取2.5～3.2分钟，循环2次，然后用池体积60％的乙腈冲洗萃取池，并用氮气吹扫95～106秒；本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种大豆除草剂检测液制备方法，其特征在于，所述方法包括：提取：准确称取10.00g检测试样与10g硅藻土混合，移入加速萃取仪的34毫升萃取池中，在10.25～10.56兆帕压力、75～84℃条件下，加热4.5～5.5分钟；用含1％乙酸的乙腈静态萃取2.5～3.2分钟，循环2次，然后用池体积60％的乙腈冲洗萃取池，并用氮气吹扫95～106秒；萃取完毕后，将萃取液混匀，待净化；净化：取10毫升乙腈预洗Envi‑18柱，然后将Envi‑18柱放入固定架上，下接梨形瓶，移入所述萃取液，并用15毫升乙腈洗涤Envi‑18柱，收集萃取液及洗涤液，取旋转蒸发器将收集的液体浓缩至约1毫升，备用；在Sep‑Pak Carbon/NH2柱中加入2厘米高无水硫酸钠，用4毫升乙腈预洗，下接梨形瓶，放入固定架上；将上述样品浓缩液转移至双层萃取柱中，用3×2毫升乙腈洗涤样液瓶，并将洗涤液移入所述双层萃取柱中，再用25毫升乙腈洗涤所述双层萃取柱；收集上述所有流出物于梨形瓶中，并在37～42℃水浴中旋转浓缩至约0.5毫升，加入2×5毫升正己烷进行溶剂交换两次；最后加入0.02毫升内标溶液，用正己烷定容至1毫升，混匀既得所述检测液。...

【技术特征摘要】
1.一种大豆除草剂检测液制备方法，其特征在于，所述方法包括：提取：准确称取10.00g检测试样与10g硅藻土混合，移入加速萃取仪的34毫升萃取池中，在10.25～10.56兆帕压力、75～84℃条件下，加热4.5～5.5分钟；用含1％乙酸的乙腈静态萃取2.5～3.2分钟，循环2次，然后用池体积60％的乙腈冲洗萃取池，并用氮气吹扫95～106秒；萃取完毕后，将萃取液混匀，待净化；净化：取10毫升乙腈预洗Envi-18柱，然后将Envi-18柱放入固定架上，下接梨形瓶，移入所述萃取液，并用15毫升乙腈洗涤Envi-18柱，收集萃取液及洗涤液，取旋转蒸发器将收集的液体浓缩至约1毫升，备用；在Sep-PakCarbon/NH2柱中加入2厘米高无水硫酸钠，用4毫升乙腈预洗，下接梨形瓶，放入固定架上；将上述样品浓缩液转移至双层萃取柱中，用3×2毫升乙腈洗涤样液瓶，并将洗涤液移入所述双层萃取柱中，再用25毫升乙腈洗涤所述双层萃取柱；收集上述所有流出物于梨形瓶中，并在37～42℃水浴中旋转浓缩至约0.5毫升，加入2×5毫升正己烷进行溶剂交换两次；最后加入0.02毫升内标溶液，用正己烷定容至1毫升，混匀既得所述检测液。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，将检测试样采用四分法分出1千克，全部磨碎并过20目筛后，准确称取10.00g检测试样与10g硅藻土混合。3.一种用于权利要求1至2任一项所述的除草剂检测液中除草剂残留量的测定方法，其特征在于，所述方法包括：取不同除草剂标准品，根据大豆中不同除草剂残留限量要求及仪器响应灵敏度，以甲苯为溶剂分别配制各个除草剂的不同浓度混合标准工作溶液，分别取0.1毫升各级混合标准工作溶液加到样品空白基质提取液中，再加入0.020毫升内标溶...

【专利技术属性】
技术研发人员：何龙凉，
申请(专利权)人：防城港出入境检验检疫局综合技术服务中心广西国际旅行卫生保健中心防城港分中心，
类型：发明
国别省市：广西,45