一种编码rhFGF‑6的核酸片段、表达载体、宿主细胞、生产方法及应用技术

技术编号:16029998 阅读:48 留言:0更新日期:2017-08-19 11:28
本发明专利技术公开了一种编码rhFGF‑6的核酸片段、表达载体、宿主细胞、生产方法及应用,涉及生物医药领域。本发明专利技术提供的编码rhFGF‑6的核酸片段根据FGF‑6的天然序列优化而得,在天然序列的基础上去除了37个信号肽,消除了不利于表达的二级结构,但是不改变FGF‑6的氨基酸序列,将此核酸片段构建到合适的载体构成重组表达载体,再将重组表达载体转化进入宿主细胞,得到重组菌,培养该重组菌,用诱导剂进行诱导表达,能够高表达rhFGF‑6,并且表达的rhFGF‑6具有促进组织再生、促进骨生成、修复心肌损伤、促进创伤愈合、促进血管再生的活性。

【技术实现步骤摘要】
一种编码rhFGF-6的核酸片段、表达载体、宿主细胞、生产方法及应用
本专利技术涉及生物医药领域,具体而言,涉及一种编码rhFGF-6的核酸片段、表达载体、宿主细胞、生产方法及应用。
技术介绍
成纤维细胞生长因子-6(FibroblastGrowthFactor-6,FGF-6)是FGF家族成员之一,属FGF4亚家族(FGF4、FGF5、FGF6)。人FGF-6基因定位于人类染色体12p13,共有约15kb的三个外显子,其编码的蛋白由208个氨基酸残基组成单链多肽,N端有约37个氨基酸残基的疏水信号肽序列,成熟蛋白有171个氨基酸(38-208氨基酸残基),其理论分子质量为19kDa,等电点约为9.73。人FGF-6与鼠的氨基酸序列具有93.3%的高度同源性。哺乳动物FGF-6位点上的比较基因组学显示出人类、大鼠和小鼠FGF-6启动子是高度保守的。在结构上,FGF-6与FGF基因家族的其它成员是非常相似的,尤其与FGF-4(70%)、FGF-5(49%)具有高度的序列同源性。体内外的研究表明,FGF-6在分化发育、骨生成、肿瘤形成和其他细胞发育过程中也发挥着重要的作用。先天性心脏病是本文档来自技高网...
一种<a href="http://www.xjishu.com/zhuanli/27/201710004159.html" title="一种编码rhFGF‑6的核酸片段、表达载体、宿主细胞、生产方法及应用原文来自X技术">编码rhFGF‑6的核酸片段、表达载体、宿主细胞、生产方法及应用</a>

【技术保护点】
一种编码rhFGF‑6的核酸片段,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

【技术特征摘要】
1.一种编码rhFGF-6的核酸片段,其特征在于,其核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。2.一种表达载体,其特征在于,其包含如权利要求1所述的编码rhFGF-6的核酸片段。3.根据权利要求2所述的表达载体,其特征在于,所述表达载体为pET3a、pET3c、pET14b或pET28a中的任意一种。4.含有权利要求2或3所述的表达载体的宿主细胞。5.根据权利要求4所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞选自大肠杆菌BL21、C41或Rosetta中的任意一种。6.一种生产rhFGF-6的方法,其特征在于,将权利要求1所述的编码rhFGF-6的核酸片段转化至宿主细胞,得到重组菌,培养所述重组菌,用诱导剂进行诱导表达,得到蛋白样品,所述蛋白样品经纯化处理后,得到纯净的所述rhFGF-6。7.根据权利要求6所述的生产rhFGF-6的方法,其特征在于,所述诱导剂为乳糖。8.根据权利要求7所述的生产rhFGF-...

【专利技术属性】
技术研发人员:田海山李校堃郑婕姜潮王申马吉胜许诺
申请(专利权)人:温州医科大学
类型:发明
国别省市:浙江,33

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