一种大花胡麻草组织培养方法技术

本发明专利技术公开了一种大花胡麻草组织培养方法，包括以下步骤：(1)外植体选择和预处理；(2)种子萌发培养；(3)实生苗分化增殖培养；(4)分割苗诱导生根培养；(5)炼苗与移栽。本发明专利技术通过对大花胡麻草组织培养过程中种子消毒方法、增殖培养方法、壮苗生根方法进行了改进，解决了种子易污染、繁殖系数低、易褐化等问题，通过本方法培养出的大花胡麻组培苗繁殖系数高、生长速度快、移栽成活率高；此外，本发明专利技术提供的方法简便易行、可操作性强、重现性好。

Tissue culture method for large flowered flax grass

The invention discloses a method for culturing centranthera Grandiflora tissue, which comprises the following steps: (1) explants selection and pretreatment; (2) seed germination culture; (3) the proliferation and differentiation of cultured seedlings; (4) segmentation plantlets rooting culture; (5) seedling and transplanting. The present invention based on centranthera grandiflora during tissue culture of seed disinfection method, proliferation culture method, the seedling rooting method was improved to solve the seeds of easy pollution, low propagation coefficient, easy browning, large flower flax plantlets cultured by the method of propagation coefficient, high growth rate, transplanting the survival rate is high; in addition, the method is simple, the invention provides strong operability and repeatability.

【技术实现步骤摘要】
一种大花胡麻草组织培养方法
本专利技术属于植物组织培养
，涉及一种培养方法，更具体的涉及一种大花胡麻草组织培养方法。
技术介绍
大花胡麻草(CentrantheragrandifloraBench.)，玄参科胡麻草属植物，别名化血丹、红根野蚕豆、野蚕豆根、小红药、灵芝草等，主要分布于我国云南、贵州、广西等地及印度、缅甸等地。大花胡麻草生物学特征为全株被刚毛，须根为锈红色，茎部刚硬，具分枝；叶片对生，无叶柄，长圆形或条形，全缘；花腋生，花萼为佛焰苞状，苞片为叶状，花冠为管状，棕黄色。为云南民间名贵的地方中药，药用根，经化学分析鉴定其根部含环烯醚萜苷如桃叶珊瑚苷、玉叶金花苷、8-表番土鳖酸、8-表番土鳖碱、玉叶金花酸、梓醇等化学成分及杜鹃红素、甘露醇等化合物，具有消肿散瘀、止血止痛等作用，可用于治疗女性痛经、闭经及风湿骨痛、跌打损伤，还对心脑血管疾病具有显著疗效，具有很高的开发价值。由于大花胡麻草根经济价值高，其市场需求逐年增加，而目前野生资源已被大量开采。大花胡麻草对生态环境要求严格，其种子发芽率低，生长慢，远不能满足需求。应用组织培养技术进行快速繁殖并成功生根移栽，对于解决资源本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种大花胡麻草组织培养方法，该方法包括：(1)外植体选择和预处理；(2)种子萌发培养；(3)实生苗分化增殖培养；(4)分割苗诱导生根培养；(5)炼苗与移栽；其特征在于：所述外植体选择和预处理步骤中，选择野外收集的大花胡麻草种子作为外植体，然后对种子进行预处理；所述种子萌发培养步骤中，将经过处理的大花胡麻草种子接种于种子萌发培养基进行培养，培养2‑3周后获得无菌实生苗；所述实生苗分化增殖培养步骤中，选择1‑2cm高的无菌实生苗在超净工作台上接种于增殖培养基进行继代培养，培养3‑4周后获得组培丛芽；所述分割苗诱导生根培养步骤中，将获得的4‑6cm长苗的组培丛芽进行分割处理，将分割苗接种于生根培养基...

【技术特征摘要】
1.一种大花胡麻草组织培养方法，该方法包括：(1)外植体选择和预处理；(2)种子萌发培养；(3)实生苗分化增殖培养；(4)分割苗诱导生根培养；(5)炼苗与移栽；其特征在于：所述外植体选择和预处理步骤中，选择野外收集的大花胡麻草种子作为外植体，然后对种子进行预处理；所述种子萌发培养步骤中，将经过处理的大花胡麻草种子接种于种子萌发培养基进行培养，培养2-3周后获得无菌实生苗；所述实生苗分化增殖培养步骤中，选择1-2cm高的无菌实生苗在超净工作台上接种于增殖培养基进行继代培养，培养3-4周后获得组培丛芽；所述分割苗诱导生根培养步骤中，将获得的4-6cm长苗的组培丛芽进行分割处理，将分割苗接种于生根培养基中进行诱导生根培养，获得组培苗；所述炼苗与移栽步骤中，当根长达到2-5cm时，进行炼苗3-5天，后取出组培苗，进行移栽。2.根据权利要求1所述的一种大花胡麻草组织培养方法，其特征在于，所述外植体选择和预处理步骤中：在收集的大花胡麻草种子中，挑选种荚未开裂的种子作为外植体，然后进行预处理；所述预处理包括前处理与消毒灭菌处理步骤；其中，所述前处理步骤为：先用75wt％酒精擦拭种荚表面，将种子破壳取出后置于灭菌的1.5mL的离心管中，加入1mL无菌水浸泡1-2h，待种子吸足水分后，在1000rpm的条件下离心3-5min，倒掉上清液，准备下一步消毒；所述消毒灭菌处理步骤为：将前处理后的种子置于超净工作台中，用75％的酒精消毒30-60秒，再用体积浓度为0.1％的升汞浸泡8-10min，后使用无菌水冲洗6-8次。3.根据权利要求1所述的一种大花胡麻草组织培养方法，其特征在于，所述种子萌发培养步骤中，所述种子萌发培养基为在MS培养基中添加蔗糖20-30g/L、琼脂粉6-7g/L，并调节PH至5.5-6.0所得的培养基；所述培养基置于透明玻璃培养瓶中并给予光照10-12h/天，其中，光照强度为1500-2000LX，温度为25℃±2℃，在此条件下培养2-3周诱导种子萌发出苗。4.根据权利要求3所述的一种大花胡麻草组织培养方法，其特征在于：所述的种子萌发培养基的pH调节至5.8。5.根据权利要求1所述的一种大花胡麻草组织培养方法，其特征在于，所述实生苗分化增殖培养步骤中，所述增殖培养基为在WPM培养基中添加6-苄氨基腺嘌呤0....

【专利技术属性】
技术研发人员：陈敏敏，叶正文，张学英，张建军，张永春，殷丽青，杨柳燕，
申请(专利权)人：上海市农业科学院，
类型：发明
国别省市：上海,31