一种霍山石斛圆球茎直播实生苗的方法技术

本发明专利技术涉及一种霍山石斛圆球茎直播实生苗的方法，包括以下步骤：播种培养基的配置、营养液的制备、霍山石斛果荚的选择和消毒、无菌播种、种子萌发培养、大棚建设、苗床建设、基质制备及消毒、圆球茎悬浮液的制备、撒播、温和光的控制、水分和湿度的控制、肥料和病害的管理、移栽，本发明专利技术的优点在于：本发明专利技术提供的一种霍山石斛圆球茎直播实生苗的方法的优点在于：减少组培的投入，去掉了传统工艺中的炼苗、驯化的过程，简化了育苗的生产过程，降低了生产成本，增加了种苗栽培的成活率，通过本方法得到的种苗移栽的成活率可达100%，减少栽培风险，育苗的门槛低，可操作性强。

Method for direct seeding seedlings of Dendrobium Mount Holyoke

The invention relates to a Mount Holyoke of Dendrobium protocorm live seedling method, which comprises the following steps: sowing medium configuration, nutrient solution preparation, pod and Mount Holyoke of Dendrobium sterilization, aseptic seeding, seed germination and cultivation of greenhouse construction, seedbed construction, matrix preparation and disinfection, protocorm suspension the preparation, sowing, Wen Heguang control, moisture and humidity control, fertilizer and disease management, transplanting, the invention has the advantages of a Mount Holyoke Dendrobium protocorm provided by the invention has the advantages of direct seeding seedling tissue culture method is: reduce investment, get rid of the traditional process of acclimatization and the process of domestication, simplifies the production process of seedlings, reduce production costs, increase the survival rate of seedling cultivation, were obtained by the process of seedling rate up to 100%, reduce cultivation Risk, the threshold of breeding is low, operability is strong.

【技术实现步骤摘要】
一种霍山石斛圆球茎直播实生苗的方法
本专利技术涉及植物培植
，尤其涉及一种霍山石斛圆球茎直播实生苗的方法。
技术介绍
霍山石斛(学名:DendrobiumhuoshanenseC.Z.TangetS.J.Cheng)俗称米斛，是兰科石斛属的草本植物。因其所含的生物碱、粗多糖、氨基酸、微量元素等成分具有强肾清音明目、保肝护嗓、滋阴清热、养胃生津、抑制肿瘤细胞生长、增强免疫力等功效，一直被视为九大“仙草”之首。野生状态下，霍山石斛生长十分缓慢，其中极为细小，仅有一个简单的胚及单层细胞的翅状种皮构成，无胚乳，在自然状态下，极少萌发成苗，由于过度的采伐利用、生长缓慢、生态环境的恶化和繁殖率低等原因的影响，霍山石斛野生资源濒临灭绝。通过植物组织培养的方法获得霍山石斛再生植株的方法有两个：（1）用霍山石斛成熟的种子消毒后进行无菌播种，进行芽诱导、茎诱导和根诱导，最后壮苗培养后产生种苗；（2）通过适宜的外植体诱导形成拟原球茎或者丛生芽，不断进行增值（产生一定数量），然后进行芽诱导、茎诱导和根诱导，最后进行壮苗培养后产生种苗。组培育苗这一过程中涉及到培养基制作，无菌接入外植体，原球茎无菌转分，分化芽无菌转分，小苗无菌转分，中苗无菌转分，大苗无菌转分，培养室管理等步骤，由此涉及到分苗人员的招聘与管理，培养基制作车间的建设，无菌操作车间的建设，培养室的建设；而炼苗、驯化过程中又涉及到相关人员的招聘与管理，智能温室及驯化大棚的建设。综上所述，现有技术方面要求企业在人力、物力、财力上都要有相当大的投入，由此造成企业成本大、负担重。随着霍山石斛产业化规模的不断发展，对霍山石斛种苗的需求量也在不断地增加，低成本高质量的霍山石斛种苗是发展趋势。
技术实现思路
有鉴于此，有必要提供一种霍山石斛圆球茎直播实生苗的方法。本专利技术是这样实现的，一种霍山石斛圆球茎直播实生苗的方法，包括以下步骤：步骤一：播种培养基的配置。播种培养基包括以下配方：硝酸钾450~550mg/L、硫酸铵200~300mg/L、硫酸镁200~300mg/L、磷酸二氢钾200~300mg/L、硝酸钙600~800mg/L、碘化钾0.81~0.85mg/L、硼酸6.0~6.4mg/L、硫酸锰22.1~22.5mg/L、硫酸锌8.2~9.0mg/L、钼酸钠0.2~0.3mg/L、硫酸铜0.02~0.03mg/L、氯化钴0.02~0.03mg/L、肌醇80~120mg/L、烟酸0.2~0.8mg/L、甘氨酸1~3mg/L、盐酸硫胺素0.1mg/L、盐酸吡哆醇0.2~0.8mg/L、乙二胺四乙酸二钠37.1~37.5mg/L、硫酸亚铁26.8~28.8mg/L、2，4-二氯苯氧乙酸0.1~0.3mg/L、6-苄基嘌呤0.4~0.8mg/L、萘乙酸0.1mg/L、赤霉素0.2mg/L、蔗糖30g/L和琼脂4g/L，将琼脂经高温溶解后，将配置好的药品逐一倒入，温度维持在55~65℃进行分装，再通过121℃湿热灭菌，灭菌时长为20min。步骤二：营养液的制备。营养液包括以下配方：硝酸钾450~550mg/L、硫酸铵200~300mg/L、硫酸镁200~300mg/L、磷酸二氢钾200~300mg/L、硝酸钙600~800mg/L、碘化钾0.81~0.85mg/L、硼酸6.0~6.4mg/L、硫酸锰22.1~22.5mg/L、硫酸锌8.2~9.0mg/L、钼酸钠0.2~0.3mg/L、硫酸铜0.02~0.03mg/L、氯化钴0.02~0.03mg/L、肌醇80~120mg/L、烟酸0.2~0.8mg/L、甘氨酸1~3mg/L、盐酸硫胺素0.1mg/L、盐酸吡哆醇0.2~0.8mg/L、乙二胺四乙酸二钠37.1~37.5mg/L、硫酸亚铁26.8~28.8mg/L、2，4-二氯苯氧乙酸0.3~0.7mg/L、6-苄基嘌呤0.1mg/L、萘乙酸0.6~1mg/L和矮壮素0.6~1mg/L，直接用纯化水将药品逐一倒入，定容、灭菌冷却后即可使用，灭菌的原因是尽量减少圆球茎直播时受到杂菌的感染。步骤三：霍山石斛果荚的选择和消毒。选择当年成熟保暖的霍山石斛果实，表面无病斑、虫斑，将采收的霍山石斛果荚进行手工清理，去除果荚表面多有的枝干及枯萎的部分，并用清水反复冲洗，然后放入75%的酒精中至淹没为止，浸泡30min，然后放在无菌的接种盘中，在无菌操作台上晾干，备用。步骤四：无菌播种。在无菌操台上，用灭菌后的移液枪从种子悬浮液中抽取1ml，放入播种培养基中，盖好瓶盖缓慢晃动，直至瓶内的悬浮液均匀的平铺在培养基表面为止，然后放入培养框中。步骤五：种子萌发培养。播种结束后，将放有种子的培养基放在光照2000lux、温度25~29℃的条件下进行培养，培养时间为2个月，即可看到绿色膨大已经萌发的种子，种子的萌发率在95%以上，比一般的组培配方对种子的萌发率提高20%左右。步骤六：大棚建设。采用普通的钢架大棚，棚高要求不低于3米，上面覆盖塑料膜和遮阳率达到80﹪以上的遮阳网，用于防雨水及阻挡太阳光线。步骤七：苗床建设。由于是密播，苗床不需要太多，因此采用简单的苗床即可，但必须架空45~55cm，且具有一定的承载力，利于基质存放和底部通风，床宽1-1.5米，长度以棚长为准，然后将海绵平铺在制作好的苗床长，海绵的厚度为8~12厘米，利于维持苗床的湿度，海绵要经过高锰酸钾浸泡消毒。步骤八：基质制备及消毒。将松树皮、菜籽粕按重量比例9：1混合，发酵腐透后过3目的筛网，用高锰酸钾浸泡24小时，将基质拿出，晾干到不滴水状态后放在制作好的海绵苗床上面，厚度不少于5cm，然后浇水，使基质和苗床完全湿透。步骤九：圆球茎悬浮液的制备。在无菌室超净工作台面上，将无菌营养液倒入萌发的培养基瓶子中，然后将圆球茎和营养液一起倒出，放在消好毒的容器中备用。步骤十：撒播。在室外气温转暖后的清明之后开始撒播，将稀释后的霍山石斛圆球茎放入洒水壶中，摇晃均匀，洒在准备好的苗床上，注意要边撒边摇晃。步骤十一：温和光的控制。撒播后2个月内，棚内温度控制在26~30℃，以28℃最为适宜，撒播的头一个月用遮光处理，可在苗床上面20公分处悬空加一层拉毛布起到保温、控湿和控光的作用，用双层遮阳网控制光强，出芽后逐渐加大光照，光照最高不超过20000lux。步骤十二：水分和湿度的控制。撒播后每两天用喷雾器喷洒一遍营养液，第一使圆球茎在苗床上面有生长所需的充足营养和分化所需要的生长调节物质，第二使苗床保持表面湿润，防止圆球茎脱水，空气湿度维持在80﹪左右。步骤十三：肥料和病害的管理。霍山石斛圆球茎播撒过后每隔一天喷洒营养液一次，维持霍山石斛发芽生长所必须的营养供给，一直到抽出叶子为止。当霍山石斛抽出两片叶子后，每15天喷施一次0.5-1‰的花朵朵叶面肥，日常病害较少，按生长期每个月喷施一次750倍的甲基托布津即可。每隔一周定期给育苗大棚进行消毒，采用烟熏剂，如保菇王。步骤十四：移栽。第二年的春季，将已具备完整的根、茎、叶的石斛苗拔起，按4~6株一丛，10厘米×10厘米的行列距进行移栽。进一步的，在所述步骤一中，播种培养基包括以下配方：硝酸钾500mg/L、硫酸铵250mg/L、硫酸镁250mg/L、磷酸二氢钾250mg/L、硝酸钙700mg/L、碘化钾本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种霍山石斛圆球茎直播实生苗的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：播种培养基的配置；播种培养基包括以下配方：硝酸钾450~550mg/L、硫酸铵200~300mg/L、硫酸镁200~300mg/L、磷酸二氢钾200~300mg/L、硝酸钙600~800mg/L、碘化钾0.81~0.85mg/L、硼酸6.0~6.4mg/L、硫酸锰22.1~22.5mg/L、硫酸锌8.2~9.0mg/L、钼酸钠0.2~0.3mg/L、硫酸铜0.02~0.03mg/L、氯化钴0.02~0.03mg/L、肌醇80~120mg/L、烟酸0.2~0.8mg/L、甘氨酸1~3mg/L、盐酸硫胺素0.1mg/L、盐酸吡哆醇0.2~0.8mg/L、乙二胺四乙酸二钠37.1~37.5mg/L、硫酸亚铁26.8~28.8mg/L、2，4‑二氯苯氧乙酸0.1~0.3mg/L、6‑苄基嘌呤0.4~0.8mg/L、萘乙酸0.1mg/L、赤霉素0.2mg/L、蔗糖30g/L和琼脂4g/L，将琼脂经高温溶解后，将配置好的药品逐一倒入，温度维持在55~65℃进行分装，再通过121℃湿热灭菌，灭菌时长为20min；步骤二：营养液的制备；营养液包括以下配方：硝酸钾450~550mg/L、硫酸铵200~300mg/L、硫酸镁200~300mg/L、磷酸二氢钾200~300mg/L、硝酸钙600~800mg/L、碘化钾0.81~0.85mg/L、硼酸6.0~6.4mg/L、硫酸锰22.1~22.5mg/L、硫酸锌8.2~9.0mg/L、钼酸钠0.2~0.3mg/L、硫酸铜0.02~0.03mg/L、氯化钴0.02~0.03mg/L、肌醇80~120mg/L、烟酸0.2~0.8mg/L、甘氨酸1~3mg/L、盐酸硫胺素0.1mg/L、盐酸吡哆醇0.2~0.8mg/L、乙二胺四乙酸二钠37.1~37.5mg/L、硫酸亚铁26.8~28.8mg/L、2，4‑二氯苯氧乙酸0.3~0.7mg/L、6‑苄基嘌呤0.1mg/L、萘乙酸0.6~1mg/L和矮壮素0.6~1mg/L，直接用纯化水将药品逐一倒入，定容、灭菌冷却后即可使用，灭菌的原因是尽量减少圆球茎直播时受到杂菌的感染；步骤三：霍山石斛果荚的选择和消毒；选择当年成熟保暖的霍山石斛果实，表面无病斑、虫斑，将采收的霍山石斛果荚进行手工清理，去除果荚表面多有的枝干及枯萎的部分，并用清水反复冲洗，然后放入75%的酒精中至淹没为止，浸泡30min，然后放在无菌的接种盘中，在无菌操作台上晾干，备用；步骤四：无菌播种；在无菌操台上，用灭菌后的移液枪从种子悬浮液中抽取1ml，放入播种培养基中，盖好瓶盖缓慢晃动，直至瓶内的悬浮液均匀的平铺在培养基表面为止，然后放入培养框中；步骤五：种子萌发培养；播种结束后，将放有种子的培养基放在光照2000lux、温度25~29℃的条件下进行培养，培养时间为2个月，即可看到绿色膨大已经萌发的种子，种子的萌发率在95%以上，比一般的组培配方对种子的萌发率提高20%左右；步骤六：大棚建设；采用普通的钢架大棚，棚高要求不低于3米，上面覆盖塑料膜和遮阳率达到80﹪以上的遮阳网，用于防雨水及阻挡太阳光线；步骤七：苗床建设；由于是密播，苗床不需要太多，因此采用简单的苗床即可，但必须架空45~55cm，且具有一定的承载力，利于基质存放和底部通风，床宽1‑1.5米，长度以棚长为准，然后将海绵平铺在制作好的苗床长，海绵的厚度为8~12厘米，利于维持苗床的湿度，海绵要经过高锰酸钾浸泡消毒；步骤八：基质制备及消毒；将松树皮、菜籽粕按重量比例9：1混合，发酵腐透后过3目的筛网，用高锰酸钾浸泡24小时，将基质拿出，晾干到不滴水状态后放在制作好的海绵苗床上面，厚度不少于5cm，然后浇水，使基质和苗床完全湿透；步骤九：圆球茎悬浮液的制备；在无菌室超净工作台面上，将无菌营养液倒入萌发的培养基瓶子中，然后将圆球茎和营养液一起倒出，放在消好毒的容器中备用；步骤十：撒播；在室外气温转暖后的清明之后开始撒播，将稀释后的霍山石斛圆球茎放入洒水壶中，摇晃均匀，洒在准备好的苗床上，注意要边撒边摇晃；步骤十一：温和光的控制；撒播后2个月内，棚内温度控制在26~30℃，以28℃最为适宜，撒播的头一个月用遮光处理，可在苗床上面20公分处悬空加一层拉毛布起到保温、控湿和控光的作用，用双层遮阳网控制光强，出芽后逐渐加大光照，光照最高不超过20000lux；步骤十二：水分和湿度的控制；撒播后每两天用喷雾器喷洒一遍营养液，第一使圆球茎在苗床上面有生长所需的充足营养和分化所需要的生长调节物质，第二使苗床保持表面湿润，防止圆球茎脱水，空气湿度维持在80﹪左右；步骤十三：肥料和病害的管理；霍山石斛圆球茎播撒过后每隔一天喷洒营养液一次，维持霍山石斛发芽生长所必须的营养供给，一直到抽出叶...

【技术特征摘要】
1.一种霍山石斛圆球茎直播实生苗的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：播种培养基的配置；播种培养基包括以下配方：硝酸钾450~550mg/L、硫酸铵200~300mg/L、硫酸镁200~300mg/L、磷酸二氢钾200~300mg/L、硝酸钙600~800mg/L、碘化钾0.81~0.85mg/L、硼酸6.0~6.4mg/L、硫酸锰22.1~22.5mg/L、硫酸锌8.2~9.0mg/L、钼酸钠0.2~0.3mg/L、硫酸铜0.02~0.03mg/L、氯化钴0.02~0.03mg/L、肌醇80~120mg/L、烟酸0.2~0.8mg/L、甘氨酸1~3mg/L、盐酸硫胺素0.1mg/L、盐酸吡哆醇0.2~0.8mg/L、乙二胺四乙酸二钠37.1~37.5mg/L、硫酸亚铁26.8~28.8mg/L、2，4-二氯苯氧乙酸0.1~0.3mg/L、6-苄基嘌呤0.4~0.8mg/L、萘乙酸0.1mg/L、赤霉素0.2mg/L、蔗糖30g/L和琼脂4g/L，将琼脂经高温溶解后，将配置好的药品逐一倒入，温度维持在55~65℃进行分装，再通过121℃湿热灭菌，灭菌时长为20min；步骤二：营养液的制备；营养液包括以下配方：硝酸钾450~550mg/L、硫酸铵200~300mg/L、硫酸镁200~300mg/L、磷酸二氢钾200~300mg/L、硝酸钙600~800mg/L、碘化钾0.81~0.85mg/L、硼酸6.0~6.4mg/L、硫酸锰22.1~22.5mg/L、硫酸锌8.2~9.0mg/L、钼酸钠0.2~0.3mg/L、硫酸铜0.02~0.03mg/L、氯化钴0.02~0.03mg/L、肌醇80~120mg/L、烟酸0.2~0.8mg/L、甘氨酸1~3mg/L、盐酸硫胺素0.1mg/L、盐酸吡哆醇0.2~0.8mg/L、乙二胺四乙酸二钠37.1~37.5mg/L、硫酸亚铁26.8~28.8mg/L、2，4-二氯苯氧乙酸0.3~0.7mg/L、6-苄基嘌呤0.1mg/L、萘乙酸0.6~1mg/L和矮壮素0.6~1mg/L，直接用纯化水将药品逐一倒入，定容、灭菌冷却后即可使用，灭菌的原因是尽量减少圆球茎直播时受到杂菌的感染；步骤三：霍山石斛果荚的选择和消毒；选择当年成熟保暖的霍山石斛果实，表面无病斑、虫斑，将采收的霍山石斛果荚进行手工清理，去除果荚表面多有的枝干及枯萎的部分，并用清水反复冲洗，然后放入75%的酒精中至淹没为止，浸泡30min，然后放在无菌的接种盘中，在无菌操作台上晾干，备用；步骤四：无菌播种；在无菌操台上，用灭菌后的移液枪从种子悬浮液中抽取1ml，放入播种培养基中，盖好瓶盖缓慢晃动，直至瓶内的悬浮液均匀的平铺在培养基表面为止，然后放入培养框中；步骤五：种子萌发培养；播种结束后，将放有种子的培养基放在光照2000lux、温度25~29℃的条件下进行培养，培养时间为2个月，即可看到绿色膨大已经萌发的种子，种子的萌发率在95%以上，比一般的组培配方对种子的萌发率提高20%左右；步骤六：大棚建设；采用普通的钢架大棚，棚高要求不低于3米，上面覆盖塑料膜和遮阳率达到80﹪以上的遮阳网，用于防雨水及阻挡太阳光线；步骤七：苗床建设；由于是密播，苗床不需要太多，因此采用简单的苗床即可，但必须架空45~55cm，且具有一定的承载力，利于基质存放和底部通风，床宽1-1.5米，长度以棚长为准，然后将海绵平铺...

【专利技术属性】
技术研发人员：高久双，
申请(专利权)人：高久双，
类型：发明
国别省市：安徽,34