本实用新型专利技术涉及一种试剂盒，包括方盒，泡沫垫以及试剂瓶，其中，所述方盒內置所述泡沫垫；所述泡沫垫上开设有四个孔；所述试剂瓶分别为1号试剂瓶、2号试剂瓶、3号试剂瓶、4号试剂瓶，放置于所述四个孔内。试剂盒操作简单，减少操作过程中污染的产生，同时试剂盒内使用的试剂瓶都是透明的，瓶盖的颜色都不一样，瓶盖上有圆形标识，缩短了挑选试剂的时间，使用方便。
Reagent kit
The utility model relates to a kit, including box, foam pad and reagent bottle, wherein the box inside the foam pad; the foam pad is provided with four holes; the reagent bottles were No. 1 and No. 2 reagent bottle reagent bottle, No. 3, No. 4 reagent bottle the bottle, placed on the four hole. The kit has the advantages of simple operation, reduce the pollution generated in the process of operation, at the same time, reagent bottles used in the kit are transparent, caps are not the same color, a circular logo on the caps, shorten the time of the selection reagent is convenient to use.
【技术实现步骤摘要】
一种试剂盒
本技术涉及生物
，具体涉及一种试剂盒。
技术介绍
聚合酶链式反应(PolymeraseChainReaction，PCR)是体外合成双链DNA的一种方法，技术基本原理是根据DNA双螺旋模型所建立的细胞复制的机制，以及双链DNA在体外复制的特点设计的。以DNA为模板，以小片段的DNA为引物，在DNA聚合酶的催化下将dNTPs合成为DNA新链。因此DNA聚合酶是实现DNA复制的关键。因此TaqDNA聚合酶广泛应用于PCR技术中，但是TaqDNA聚合酶缺乏校正功能，在PCR链的延伸反应中常因为发生错配或因为DNA模板高GC含量而终止,不能识别和切除不配对的DNA生长链末端的核苷酸使延伸反应继续。扩增片段的长度很难超过6kb,限制了PCR技术更为广泛的应用。人们又从古细菌分离出一种具有高保真性能的DNA聚合酶，其3’-5’外切酶校正活性能识别错误掺入延伸链中的碱基，并将其切下，利用DNA聚合酶活性添加为与模板互补的碱基，从而保证了新扩增链与模板的高度一致性。但是高保真聚合酶对引物和样品的结构、纯度和浓度要求比较高，反应灵敏度较低，扩增效率较低，限制了PfuDNA聚合酶的使用和推广。
技术实现思路
针对以上现有技术问题，本技术的目的在于提供一种试剂盒，具体技术方案如下：一种试剂盒，包括方盒，泡沫垫以及试剂瓶，其中，所述方盒內置所述泡沫垫；所述泡沫垫上开设有四个孔；所述试剂瓶分别为1号试剂瓶、2号试剂瓶、3号试剂瓶、4号试剂瓶，放置于所述四个孔内。进一步地，所述方盒为塑料方盒，所述试剂瓶均为透明试剂瓶，所述四个试剂瓶均具有瓶盖，所述瓶盖的颜色均不相同，所述瓶盖上均设有圆形标识，所述塑料方盒的内尺寸为150mm(L)*30mm(W)*40mm(H)，所述泡沫板尺寸为150mm(L)*30mm(W)*40mm(H)。上述TaqPlus聚合酶试剂盒的使用方法，包含如下步骤：(1)准备试剂盒复合酶；(2)准备试剂盒反应液；(3)设置长片段扩增PCR反应体系；(4)设置复杂模板扩增PCR反应体系；(4)设置PCR反应条件；(5)1％琼脂糖凝胶电泳。进一步地，包含如下步骤：(1)准备试剂盒复合酶：TaqDNA聚合酶(5U/μl)和高保真聚合酶(5U/μl)，酶活比为1:1-4:3；(2)准备试剂盒反应液：10×HP缓冲液，10×HF溶液；(3)长片段扩增PCR反应体系：模板2μl，10×HP缓冲液5μl，dNTPs1μL，复合酶1μL，上游、下游引物各2μL，加ddH2O至50μl；(4)复杂模板扩增PCR反应体系：模板2μl，10×HF缓冲液5μl，dNTPs1μL，复合酶1μL，上游、下游引物各2μL，加ddH2O至50μl；(4)PCR反应条件：92℃预变性2min，然后进行30个循环92℃变性15s，58℃复性15s，68℃延伸2min，最后68℃延伸3min；(5)1％琼脂糖凝胶电泳。进一步地，步骤(2)中同时准备Enhancer溶液，步骤(3)和(4)中，还根据需要加入Enhancer溶液，步骤(3)和(4)中，引物对包含上引物和下引物。与目前现有技术相比，本技术试剂盒操作简单，减少操作过程中污染的产生，同时试剂盒内使用的试剂瓶都是透明的，瓶盖的颜色都不一样，瓶盖上有圆形标识，缩短了挑选试剂的时间，使用方便。具体来说：1、本技术独创的复合酶使PCR具有扩增长度增加(简单模板可有效扩增长达45kb，对复杂模板也可达20kb)、且保真度好。2、与单一的高保真聚合酶比较，具有扩增速度快，反应灵敏性和产量高的优势3、本试剂盒操作简单，减少操作过程中污染的产生。4、试剂盒内使用的试剂瓶都是透明的，瓶盖的颜色都不一样，瓶盖上有圆形标识，缩短了挑选试剂的时间，使用方便。附图说明图1为试剂盒结构示意图具体实施方式下面根据附图对本技术进行详细描述，其为本技术多种实施方式中的一种优选实施例。在一个优选实施例中，参见图1，一种TaqPlus聚合酶试剂盒及其应用，包括塑料方盒，所述TaqPlus聚合酶是以TaqDNA聚合酶和高保真聚合酶为PCR反应体系的复合酶，酶活比为1:1-4:3。所述塑料方盒內置大小合适的泡沫垫5，所述泡沫垫有四个孔，所述孔内放置四个试剂瓶，分别为1号试剂瓶1、2号试剂瓶2、3号试剂瓶3、4号试剂瓶4，所述1号试剂瓶1内盛放TaqPlus聚合酶，所述2号试剂瓶2内盛放10×HP缓冲液，所述3号试剂瓶3内盛放10×HF溶液，所述4号试剂瓶4内盛放Enhancer溶液。所述TaqPlus聚合酶是以TaqDNA聚合酶和高保真聚合酶为PCR反应体系的复合酶，酶活比为1:1-4:3，所述2号试剂瓶内盛放10×HP缓冲液，所述3号试剂瓶内盛放10×HF缓冲液，所述增强剂溶液为Enhancer溶液，所述泡沫板尺寸为150mm(L)*30mm(W)*40mm(H)，但是不限于此，所述塑料方盒的内尺寸为150mm(L)*30mm(W)*40mm(H)，但是不限于此，所述试剂盒内使用的试剂瓶都是透明的，瓶盖的颜色都不一样，并且瓶盖上有圆形标识。在另一个优选实施例中，可以采用如下方案：一种TaqPlus聚合酶试剂盒，其复合酶有5’-3’外切核酸酶活性和3’-5’外切酶活性。与TaqDNA聚合酶相比，具有扩增长度增加(简单模板可有效扩增长达45kb，对复杂模板也可达20kb)、且保真度好；与单一的高保真聚合酶比较，具有扩增速度快，反应灵敏性和产量高的优势，解决现有技术中的缺陷。一种TaqPlus聚合酶试剂盒及其应用，包括塑料方盒，所述TaqPlus聚合酶是以TaqDNA聚合酶和高保真聚合酶为PCR反应体系的复合酶，酶活比为1:1-4:3。所述塑料方盒內置大小合适的泡沫垫，所述泡沫垫有四个孔，所述孔内放置四个试剂瓶，分别为1号试剂瓶、2号试剂瓶、3号试剂瓶、4号试剂瓶，所述1号试剂瓶内盛放TaqDNA聚合酶，所述2号试剂瓶内盛放10×HP缓冲液，所述3号试剂瓶内盛放10×HF溶液，所述4号试剂瓶内盛放Enhancer溶液。所述TaqPlus聚合酶是以TaqDNA聚合酶和高保真聚合酶为PCR反应体系的复合酶，酶活比为1:1-4:3，所述2号试剂瓶内盛放10×HP缓冲液，所述3号试剂瓶内盛放10×HF缓冲液，所述增强剂溶液为Enhancer溶液，所述塑料方盒的内尺寸为150mm(L)*30mm(W)*40mm(H)，但是不限于此，所述泡沫板尺寸为150mm(L)*30mm(W)*40mm(H)，但是不限于此，所述试剂盒内使用的试剂瓶都是透明的，瓶盖的颜色都不一样，并且瓶盖上有圆形标识。本技术方法包含如下步骤：(1)复合酶：TaqDNA聚合酶(5U/μl)和高保真聚合酶(5U/μl)，酶活比为1:1-4:3。(2)反应液：10×HP缓冲液，10×HF溶液，Enhancer溶液。(3)长片段扩增PCR反应体系：模板2μl，10×HP缓冲液5μl，dNTPs1μL，复合酶1μL，上游、下游引物各2μL，Enhancer溶液5μl(根据个人需要加入)，加ddH2O至50μl。(4)复杂模板扩增PCR反应体系：模板2μl，10×HF缓冲液5μl，dNTPs1μL，复合酶1μL，上游、下游引物各2μL本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种试剂盒，其特征在于，包括方盒，泡沫垫(5)以及试剂瓶，其中，所述方盒內置所述泡沫垫(5)；所述泡沫垫(5)上开设有四个孔；所述试剂瓶分别为1号试剂瓶(1)、2号试剂瓶(2)、3号试剂瓶(3)、4号试剂瓶(4)，放置于所述四个孔内；所述试剂瓶均为透明试剂瓶；所述四个试剂瓶均具有瓶盖；所述瓶盖的颜色均不相同；所述瓶盖上均设有圆形标识；所述1号试剂瓶(1)内设有聚合酶。
【技术特征摘要】
1.一种试剂盒，其特征在于，包括方盒，泡沫垫(5)以及试剂瓶，其中，所述方盒內置所述泡沫垫(5)；所述泡沫垫(5)上开设有四个孔；所述试剂瓶分别为1号试剂瓶(1)、2号试剂瓶(2)、3号试剂瓶(3)、4号试剂瓶(4)，放置于所述四个孔内；所述试剂瓶均为透明试剂瓶；所述四个试剂瓶均具有瓶盖；所述瓶盖的颜色均...
【专利技术属性】
技术研发人员：周辉，
申请(专利权)人：周辉，
类型：新型
国别省市：安徽,34
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