一种海洋微藻的养殖方法技术

本发明专利技术创造提供一种海洋微藻的养殖方法，具有三个阶段的培养，具体分为一级培养、二级培养和三级培养。每个培养阶段的养殖环境均不相同。本发明专利技术创造旨能够解决实验室到生产实践过度不稳定的情况，不但实现了海洋微藻生长缓慢的问题，且同时保证微藻亲本的活性，本发明专利技术也适合在大的养殖场所保证微藻的稳定快速增长。

Method for culturing marine microalgae

The invention provides a method for culturing marine microalgae, which has three stages of culture, and is divided into primary culture, two stage culture and three stage culture. The culture environment in each culture stage is different. The invention aims to solve the laboratory to the production practice of excessive instability, not only realized the problem of slow growth of marine microalgae and microalgae, while ensuring parental activity, the invention is also suitable to ensure stable and rapid growth of microalgae in large farms.

【技术实现步骤摘要】
一种海洋微藻的养殖方法
本专利技术涉及海洋微藻
，尤其涉及一种实验室与生产实践相结合的海洋微藻快速养殖方法。
技术介绍
海洋微藻中含有蛋白质、氨基酸、色素、DHA和EPA等丰富的营养物质。目前广泛被应用于水产育苗方面，是鱼、虾等高档海鲜良好的优质饵料。但在生产实践应用当中，由实验室基础养藻到池塘生产实践应用过程当中仍然存在诸多问题，例如：藻类生长缓慢、转移到池塘中出现藻类停止生长或者死亡现象，以及藻类的诸多应激反应等。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术创造旨在提出一种海洋微藻的养殖方法，能够解决实验室到生产实践过度不稳定的情况，不但实现了海洋微藻生长缓慢的问题，且同时保证微藻亲本的活性，本专利技术也适合在大的养殖场所保证微藻的稳定快速增长。本专利技术创造提供的海洋微藻的养殖方法，为适应环境转变提供三个阶段的培养，具体分为一级培养、二级培养和三级培养，每个阶段培养时间优选为5天。其中，所述一级培养的培养基包括：FeCl31.6～3mg、(NH4)6Mo7O240.08～0.2mg、HCl2～3mg；所述二级培养的培养基包括：MgSO411～13mg、CaCl20.5～2mg、H2SO40.2～0.35ml；所述三级培养的培养基包括：柠檬酸铁0.01～0.1mg、MgCl12～14mg、葡萄糖0.05～0.2mg。在每个阶段提供不同的主要营养成分，能够帮助海洋微藻逐步适应实验室环境至生产实践环境的转变，提高微藻抗环境干扰能力，维持生长的稳定性。优选的，所述一级培养的培养基包括：FeCl32.6mg、MnCl20.72mg、H3BO467.2mg、EDTA90mg、KH2PO440mg、NaNO2200mg、ZnCl20.42mg、CoCl20.4mg、(NH4)6Mo7O240.18mg、CuSO40.4mg、HCl2.5mg、维生素B120.02mg、维生素B10.4mg、生物素0.02mg；所述二级培养的培养基包括：NaCl29.2mg、MgSO412.3mg、KCl0.75mg、CaCl21.11mg、NaNO31.2mg、K2HPO40.17mg、H3BO42.86mg、ZnSO40.66mg、NaMoO40.063mg、H2SO40.3ml、MnCl25.43mg、CuSO40.24mg；所述三级培养的培养基包括：柠檬酸铁0.05mg、MgCl13.66mg、NaNO30.2mg、KCl0.018mg、NaH2PO40.022mg、葡萄糖0.1mg、NaSiO30.1mg。进一步，所述一级培养的海水经过高温高压灭菌，优选的灭菌条件为120℃，30min；所述二级培养的海水经过中高温灭菌，优选的灭菌条件为90℃，10min；所述三级培养的海水经过曝气和日晒处理，优选的曝气和日晒时间为2h以上。海水是微藻直接接触和存货的直接环境因素，经不同级别的处理，使得海水环境逐级接近于生产实践的养殖环境，避免海水微藻在养殖环境骤变造成的适应不良。进一步，所述一级培养、二级培养和三级培养的接种密度均优选为106个细胞/ml。进一步，所述一级培养和二级培养的外部环境为，光照时间：黑暗时间＝12：12，光照强度为800～1500Lux，温度为25.5～28.5℃，湿度为20％；所述三级培养的外部环境为，自然条件下，定期泼洒尿素追肥。优选的，所述三级培养的外部环境下，追肥泼洒时间每次间隔7天，浓度为0.03g/L至0.08g/L，优选为0.05g/L。优选的，所述海水盐度为30。本专利技术的方法能够解决海洋微藻的实验室与实际生产的对接关系，直接从实验室到自然条件下的微藻转移过程中，容易使海洋微藻发生不适，产生停止生长及死亡的现象。本专利技术分为三级培养过程，通过改变培养条件及培养基配方从而解决藻类的应激反应。一级培养贴近实验室全程无菌操作过程，为海洋微藻提供微量生长环境保证下一步的接种量；二级培养为开放式培养过程，保证微藻的活性以及在逐渐提高微藻的适应能力；三级培养为开放式贴近自然条件下的培养过程，此阶段为藻大量培养过程以及海洋微藻的批量产出，在这个过程中海洋微藻基本能够实现在自然条件下的良好生长。具体实施方式本专利技术创造的示意性实施例及其说明用于解释本专利技术创造，并不构成对本专利技术创造的不当限定。实施例一一级培养的海水为经过高温高压灭菌(120℃，30min)，海水用量200～500ml，藻的接种量为100ml(密度为106个细胞/ml)，培养基为：FeCl32.6mg、MnCl20.72mg、H3BO467.2mg、EDTA90mg、KH2PO440mg、NaNO2200mg、ZnCl20.42mg、CoCl20.4mg、(NH4)6Mo7O240.18mg、CuSO40.4mg、HCl2.5mg、维生素B120.02mg、维生素B10.4mg、生物素0.02mg；二级培养的海水为经过(90℃，10min)处理，海水量为500～5000ml，藻的接种量为300ml(密度为106个细胞/ml),培养基为：NaCl29.2mg、MgSO412.3mg、KCl0.75mg、CaCl21.11mg、NaNO31.2mg、K2HPO40.17mg、H3BO42.86mg、ZnSO40.66mg、NaMoO40.063mg、H2SO40.3ml、MnCl25.43mg、CuSO40.24mg；三级培养的海水经过曝气和日晒两个小时以上，海水量为5000ml以上，藻的接种量为500ml(密度为106个细胞/ml),培养基为：柠檬酸铁0.05mg、MgCl13.66mg、NaNO30.2mg、KCl0.018mg、NaH2PO40.022mg、葡萄糖0.1mg、NaSiO30.1mg。一级培养和二级培养的外部环境为：光照：黑暗时间＝12：12，光照强度为800～1500Lux，温度为25.5～28.5℃，湿度为20％；三级培养为自然条件下，定期泼洒尿素追肥，泼洒时间每次间隔7天，浓度为0.05g/L。采用的藻种为海链藻，藻的增长率为50.7％。实施例二一级培养的海水为经过高温高压灭菌(120℃，30min)，海水用量200～500ml，藻的接种量为100ml(密度为106个细胞/ml)，培养基为：FeCl32.6mg、MnCl20.72mg、H3BO467.2mg、EDTA90mg、KH2PO440mg、NaNO2200mg、ZnCl20.42mg、CoCl20.4mg、(NH4)6Mo7O240.18mg、CuSO40.4mg、HCl2.5mg、维生素B120.02mg、维生素B10.4mg、生物素0.02mg；二级培养的海水为经过(90℃，10min)处理，海水量为500～5000ml，藻的接种量为300ml(密度为106个细胞/ml),培养基为：NaCl29.2mg、MgSO412.3mg、KCl0.75mg、CaCl21.11mg、NaNO31.2mg、K2HPO40.17mg、H3BO42.86mg、ZnSO40.66mg、NaMoO40.063mg、H2SO40.3ml、MnCl25.43mg、CuSO40.24mg；三级培养的海水经过曝气和日晒两个小时以上，海水量为5000ml以上，藻的接种量为500ml(密度为106个细胞/ml本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种海洋微藻的养殖方法，具有三个阶段的培养，具体分为一级培养、二级培养和三级培养；所述三个阶段的养殖环境和养殖条件各不相同。

【技术特征摘要】
1.一种海洋微藻的养殖方法，具有三个阶段的培养，具体分为一级培养、二级培养和三级培养；所述三个阶段的养殖环境和养殖条件各不相同。2.根据权利要求1所述的海洋微藻的养殖方法，其特征在于，每个阶段培养时间优选为5天。3.根据权利要求1所述的海洋微藻的养殖方法，其特征在于，所述一级培养的培养基包括：FeCl31.6～3mg、(NH4)6Mo7O240.08～0.2mg、HCl2～3mg；所述二级培养的培养基包括：MgSO411～13mg、CaCl20.5～2mg、H2SO40.2～0.35ml；所述三级培养的培养基包括：柠檬酸铁0.01～0.1mg、MgCl12～14mg、葡萄糖0.05～0.2mg。4.根据权利要求1所述的海洋微藻的养殖方法，其特征在于，所述一级培养的培养基包括：FeCl32.6mg、MnCl20.72mg、H3BO467.2mg、EDTA90mg、KH2PO440mg、NaNO2200mg、ZnCl20.42mg、CoCl20.4mg、(NH4)6Mo7O240.18mg、CuSO40.4mg、HCl2.5mg、维生素B120.02mg、维生素B10.4mg、生物素0.02mg；所述二级培养的培养基包括：NaCl29.2mg、MgSO412.3mg、KCl0.75mg、CaCl21.11mg、NaNO31.2mg、K2HPO40.17mg、H3BO42.86mg、ZnSO40.66mg、NaMoO40.063mg、H2SO40.3ml、M...

【专利技术属性】
技术研发人员：周文礼，柴英辉，范鑫昊，刘胜男，高金伟，贾旭颖，窦勇，宋虹，
申请(专利权)人：天津农学院，
类型：发明
国别省市：天津,12