一种利用蛤蟆菌制备灭蝇剂的方法技术

本发明专利技术提供一种利用蛤蟆菌制备灭蝇剂的方法，属于生物防治技术领域，包括蛤蟆菌的摇瓶种子培养、种子罐培养、发酵培养、发酵物提取。以提取物‑蛤蟆毒醇为基质辅以增诱成分，喷雾干燥，制粒成型等步骤。本发明专利技术主要研究蛤蟆菌发酵物中水溶性物质‑蛤蟆毒醇的提取工艺，并以蛤蟆毒醇为基质辅以增诱成分复配而成，具有对苍蝇毒力强，致死时间短，适口性强，耐药性低，对人畜安全性高，而不产生“三废”污染等优点，适用于家庭、宾馆、学校、医院、办公楼、畜禽养殖场、仓库等场所大规模灭蝇工作。

A method of producing bacteria using toad fly agent system

The present invention provides a method for preparing fly agent by a.muscaria system, which belongs to the field of biological control technology, including of a.muscaria shake flask culture of seeds, seed pot culture, fermentation, fermentation extract. In order to extract toad poison alcohol as matrix with increasing induced composition, spray drying, granulation and other steps. The extraction process of the invention is mainly study the toad bacteria fermentation product of water-soluble substances toad poison alcohol, and Toad poison alcohol as matrix with increasing induced composition which has strong toxicity, flies, death time is short, strong palatability, low resistance, high safety to human and livestock, and does not produce \three wastes\ pollution, suitable for families, hotels, schools, hospitals, office buildings, livestock farms, warehouses and other places of large-scale flies.

【技术实现步骤摘要】
一种利用蛤蟆菌制备灭蝇剂的方法
本专利技术公开一种利用蛤蟆菌制备灭蝇剂的方法，特别是涉及到一种利用大型真菌制备灭蝇剂的方法，属于生物防治害虫

技术介绍
目前，传统的灭蝇剂在灭杀苍蝇时存在着许多缺欠，如毒性过大，灭杀效果好，但对人畜有安全隐患；而毒性低对人畜安全隐患小，则对苍蝇灭杀效果差，存在着灭杀效果与安全之间的矛盾。因此现有技术当中亟需要一种新型的技术方案来解决这一问题。本专利技术涉及的蛤蟆菌Amanitamuscaria(L:Fr.)Lam.菌种属于担子菌纲、伞菌目、毒伞科，是分布于长白山林区的一种剧毒的大型真菌，夏秋季群生或散生于桦木科、壳斗科、松科植物组成的混交林地上，其有毒成分为蛤蟆毒醇，为5-羟基-N-二甲基色胺的吲哚衍生物（属碱性物质）。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是：提供一种利用蛤蟆菌制备灭蝇剂的方法，用来解决目前使用的灭蝇剂效果差，并且存在环境污染严重等弊端的技术问题。本专利技术所述的一种利用蛤蟆菌制备灭蝇剂的方法，其特征是包括以下步骤：1、选取蛤蟆菌斜面母种进行摇瓶种子培养，高压灭菌压力1kg/cm³保持30min,冷却后接种，接种量为斜面与摇瓶之比为1:6，培养温度为24～26℃，旋转式摇床170～200转/分钟，培养时间为160～240h，菌球湿重20%以上；所用的培养基配方为：蛋白胨2克、酵母膏0.1克、麦芽糖1.5克、黄豆芽5克、磷酸二氢钾0.15克、硫酸镁0.075克、维生素B10.001克、PH值6.5、水1000ml；2、种子罐培养：接种量为5%～10%，温度为24～26℃，搅拌速度为150～180r/min，通气量为每分钟1:0.5v/v.min，罐压0.3ⅹ105pa，培养2～3天；所用培养基配方为：麦麸50克、蛋白胨2克、葡萄糖20克、磷酸二氢钾1克、硫酸镁0.3克、水1000ml；3、发酵培养：接种量为5%～10%，温度为24～26℃，搅拌速度为150～180r/min，通气量为每分钟1:0.5v/v.min，培养5～6天；发酵液变稠，菌丝开始自溶，PH值降至4.5，残糖量降至0.3%，腺苷含量开始下降时即为发酵终点，放罐滤取菌丝体；所用培养基配方为：蔗糖20克、蛋白胨5克、葡萄糖20克、豆饼粉20克、磷酸二氢钾1.5克、硫酸镁0.75克、消泡剂（豆油）1克、水1000ml；4、将步骤3）含菌丝体和发酵液的发酵物通过板框压滤分为菌丝体和滤液，菌丝体加一倍量水加热至80℃，保温1h，真空抽滤，去掉残渣，滤液与提取液合并，浓缩至相对密度1:1，即为蛤蟆菌浓缩液；5、按照蛤蟆菌浓缩液与水的体积比1:4，向步骤4）的蛤蟆菌浓缩液中注入90℃的清水，蛤蟆菌浓缩液浸泡在90℃恒温水中2小时，蛤蟆菌的毒素-蛤蟆菌醇溶于水，过滤获得蛤蟆毒醇水溶液Ⅰ和滤渣Ⅰ；6、向步骤5）的滤渣Ⅰ中注入与步骤5）中等体积的90℃清水，保持2小时，过滤，获得蛤蟆毒醇水溶液Ⅱ和滤渣Ⅱ。7、将步骤5）的蛤蟆毒醇水溶液Ⅰ和步骤6）的蛤蟆毒醇水溶液Ⅱ混合，放入减压浓缩装置，设置减压浓缩装置的压强参数为60～65Kpa,加热温度为85～90℃，浓缩至原溶液体积的5～10%，得到蛤蟆毒醇浓缩液；8、将步骤6）的滤渣Ⅱ用烘干机烘干至含水量小于23%；9、）取炒熟有香味的玉米面与烘干后的滤渣Ⅱ按质量1:1混合，通过粉碎机粉碎成直径小于200目的混合颗粒，向混合颗粒中加入白糖，混合颗粒与白糖的质量比为25:1，获得药料；10、将步骤4）的蛤蟆毒醇浓缩液喷雾式喷洒在步骤9）的药料上，每千克药料喷洒1000ml蛤蟆毒醇浓缩液，并加入0.01%香油，搅拌10次以上，烘干机烘干至含水量55～60%；11、将步骤十干燥后的药料放入制粒成型设备，制粒成型，则灭蝇剂制备完毕。本专利技术的积极效果在于：通过蛤蟆菌经深层发酵得到的菌丝体水溶性毒剂物质的提取工艺，并用蛤蟆毒醇为基质辅以增诱成分复配而成，具有对苍蝇毒力强，致死时间短，适口性强，耐药性低，对人畜安全性高，而不产生“三废”污染等优点，适用于家庭、宾馆、学校、医院、办公楼、畜禽养殖场、仓库等场所大规模灭蝇工作。人工培育的蛤蟆菌菌种菌株在规范实施中不危及人类健康，不携带动植物病原，不污染环境。蛤蟆菌菌种传代18代以上不退化，属于抗老化能力、稳定性和代谢能力较强，产量和得率较高的菌种。具体实施方式通过以下实施例进一步举例描述本专利技术，并不以任何方式限制本专利技术，在不背离本专利技术的技术解决方案的前提下，对本专利技术所作的本领域普通技术人员容易实现的任何改动或改变都将落入本专利技术的权利要求范围之内。实施例11、选取人工培育的蛤蟆菌斜面母种（Am-A）进行摇瓶种子培养，所用的培养基配方为：蛋白胨2%、酵母膏0.1克、麦芽糖1.5克、黄豆芽5克、磷酸二氢钾0.15克、硫酸镁0.075克、维生素B10.001克、PH值6.5（消前）。高压灭菌压力1kg/cm³保持30min,冷却后接种，接种量为斜面与摇瓶之比为1:6，即一个斜面接6个250ml的摇瓶（装量为100ml），培养温度为24～26℃，旋转式摇床170～200转/分钟，培养时间为160～240h，菌球湿重20克以上，可为摇瓶种子备用；2、种子罐培养：所用培养基配方为：麦麸50克、蛋白胨2克、葡萄糖20克、磷酸二氢钾1克、硫酸镁0.3克、水1000ml；接种量为5%～10%，温度为24～26℃，搅拌速度为150～180r/min，通气量为每分钟1:0.5v/v.min，罐压0.3ⅹ105pa,培养2～3天；3、发酵培养：所用培养基配方为：蔗糖20克、蛋白胨5克、葡萄糖20克、豆饼粉20克、磷酸二氢钾1.5克、硫酸镁0.75克、消泡剂（豆油）1克、水1000ml；接种量为5%～10%，温度为24～26℃，搅拌速度为150～180r/min，通气量为每分钟1:0.5v/v.min，培养5～6天；此时发酵液变稠，菌丝开始自溶，PH值降至4.5左右，残糖量降至0.3%左右，腺苷含量开始下降时即为发酵终点，可放罐滤取菌丝体；4、将含菌丝体和发酵液的发酵物通过板框压滤分为菌丝体和滤液，菌丝体加一倍量水加热至80℃，保温1h，真空抽滤，去掉残渣，滤液与提取液合并，浓缩至相对密度1:1，即为蛤蟆菌浓缩液；5、按照蛤蟆菌浓缩液与水的体积比1:4，向蛤蟆菌浓缩液中注入90℃的清水，蛤蟆菌浓缩液浸泡在90℃恒温水中2小时，蛤蟆菌毒素-蛤蟆菌醇溶于水，过滤获得蛤蟆毒醇水溶液Ⅰ和滤渣Ⅰ；6、向滤渣Ⅰ中注入与步骤五中等体积的90℃清水，保持2小时，过滤，获得蛤蟆毒醇水溶液Ⅱ和滤渣Ⅱ；7、将水溶液Ⅰ和水溶液Ⅱ混合，放入减压浓缩装置，设置减压浓缩装置的压强参数为60～65Kpa,加热温度为85～90℃，浓缩至原溶液体积的5～10%，得到蛤蟆毒醇浓缩液；8、将滤渣Ⅱ用烘干机烘干至含水量小于23%；9、取炒熟有香味的玉米面与烘干后的滤渣Ⅱ按质量1:1混合，通过粉碎机粉碎成直径小于200目的混合颗粒，向混合颗粒中加入白糖，混合颗粒与白糖的质量比为25:1，获得药料；10、将蛤蟆毒醇浓缩液喷雾式喷洒在药料上，每千克药料喷洒1000ml蛤蟆毒醇浓缩液，并加入0.01克香油，搅拌10次以上，烘干机烘干至含水量55～60%；11、将步骤十干燥后的药料放入制粒成型设备，制粒本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用蛤蟆菌制备灭蝇剂的方法，其特征是包括以下步骤：1）选取蛤蟆菌斜面母种进行摇瓶种子培养，高压灭菌压力1kg/cm³保持30min,冷却后接种，接种量为斜面与摇瓶之比为1:6，培养温度为24～26℃，旋转式摇床170～200转/分钟，培养时间为160～240h，菌球湿重20%以上；所用的培养基配方为：蛋白胨2克、酵母膏0.1克、麦芽糖1.5克、黄豆芽5克、磷酸二氢钾0.15克、硫酸镁0.075克、维生素B1 0.001克、PH值6.5、水1000ml；2）种子罐培养：接种量为5%～10%，温度为24～26℃，搅拌速度为150～180r/ min，通气量为每分钟1:0.5v/v. min，罐压0.3ⅹ10

【技术特征摘要】
1.一种利用蛤蟆菌制备灭蝇剂的方法，其特征是包括以下步骤：1）选取蛤蟆菌斜面母种进行摇瓶种子培养，高压灭菌压力1kg/cm³保持30min,冷却后接种，接种量为斜面与摇瓶之比为1:6，培养温度为24～26℃，旋转式摇床170～200转/分钟，培养时间为160～240h，菌球湿重20%以上；所用的培养基配方为：蛋白胨2克、酵母膏0.1克、麦芽糖1.5克、黄豆芽5克、磷酸二氢钾0.15克、硫酸镁0.075克、维生素B10.001克、PH值6.5、水1000ml；2）种子罐培养：接种量为5%～10%，温度为24～26℃，搅拌速度为150～180r/min，通气量为每分钟1:0.5v/v.min，罐压0.3ⅹ105pa，培养2～3天；所用培养基配方为：麦麸50克、蛋白胨2克、葡萄糖20克、磷酸二氢钾1克、硫酸镁0.3克、水1000ml；3）发酵培养：接种量为5%～10%，温度为24～26℃，搅拌速度为150～180r/min，通气量为每分钟1:0.5v/v.min，培养5～6天；发酵液变稠，菌丝开始自溶，PH值降至4.5，残糖量降至0.3%，腺苷含量开始下降时即为发酵终点，放罐滤取菌丝体；所用培养基配方为：蔗糖20克、蛋白5克、葡萄糖20克、豆饼粉20、磷酸二氢钾1.5克、硫酸镁0.75克、消泡剂（豆油）1克、水1000ml；4...

【专利技术属性】
技术研发人员：程明，毛玉帮，见德宝，宫国富，王彬，朱海波，孙岩，赵金鹿，
申请(专利权)人：延边德康生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：吉林,22