一种永生化鸡胚胎肝细胞系及其制备方法和用途技术

本发明专利技术公开了一种永生化鸡胚胎肝细胞系及其制备方法和用途。该永生化鸡胚胎肝细胞系CEL‑hMRP18S‑2于2016年12月6日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（简称为CGMCC），保藏编号为CGMCC NO.12333.保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。采用本发明专利技术所获得的永生化鸡胚胎肝细胞保留了原代鸡胚胎肝细胞的主要特征和主要功能。并且该细胞可以在体外无限制的扩增培养，该细胞系在体外传代100代仍具有较好的活力，保持分裂增殖，不发生衰老和凋亡。将其应用于I型禽腺病毒的增殖可以显著提高病毒抗原的制备效率。

Immortalized chicken embryo liver cell line, preparation method and application thereof

The invention discloses a immortalized chicken embryonic liver cell line, a preparation method and an application thereof. The immortalization of chicken embryo liver cell line CEL hMRP18S in December 6, 2016 2 preserved in common microbe center China microbe preservation Management Committee (referred to as CGMCC), the preservation number is CGMCC NO.12333. preservation address for Chaoyang District Beichen West Road, Beijing City Hospital No. 1, No. 3 Institute of Microbiology Chinese science. The immortalized chicken embryo hepatocytes obtained by the invention retain the primary characteristics and the main functions of the primary embryo liver cells of the chicken. Moreover, the cells can be cultured without restriction in vitro, and the cell line still has good viability in the 100 generation of somatic cells, and maintains proliferation and fragmentation without aging and apoptosis. Applying it to the proliferation of I avian adenovirus can significantly improve the efficiency of viral antigen preparation.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种永生化鸡胚胎肝细胞系及其制备方法和用途，属于生物学领域，具体的属于生物工程及兽用生物制品

技术介绍
自2013年以来，I型禽腺病毒在我国禽养殖场大量传播，引发了严重疫情，对养殖场造成重大经济损失。对于这一病毒，目前我国采用的主要防治手段是使用禽腺病毒相关疫苗。现有技术我们通常采用SPF鸡胚或原代鸡胚肝脏细胞进行禽腺病毒增殖，从而获得相关疫苗。但是，这两种方式都具有一定的缺陷。譬如，SPF鸡胚的使用会产生大量的病毒污染生产废弃物，而原代鸡胚肝脏细胞的获得同样需要使用SPF鸡胚，并且原代细胞的制备操作又极为费时费力、易污染。因此，现有的禽腺病毒疫苗制备工艺落后，生产效能低下，无法满足禽养殖场的实际免疫需求。细胞永生化技术可以使得目标细胞获得在体外连续传代增殖的能力。如果能够对原代鸡胚胎肝脏细胞进行永生化改造，获得永生化原代鸡胚胎肝脏细胞系，就可以实现I型禽腺病毒在连续传代细胞系中进行增殖。从而免去每次制备原代细胞的繁琐操作，提高病毒抗原的制备效率。解决目前禽腺病毒相关疫苗生产中的实际问题。更为重要的是避免了SPF鸡胚的使用，避免污染。但是，对于原代细胞永生化本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种永生化鸡胚胎肝细胞系，其特征在于：该永生化鸡胚胎肝细胞系CEL‑hMRP18S‑2于2016年12月7日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（简称为CGMCC），保藏编号为CGMCC NO.13290，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。

【技术特征摘要】
1.一种永生化鸡胚胎肝细胞系，其特征在于：该永生化鸡胚胎肝细胞系CEL-hMRP18S-2于2016年12月7日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（简称为CGMCC），保藏编号为CGMCCNO.13290，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。2.权利要求1所述的永生化鸡胚胎肝细胞系的制备方法，其特征在于：是通过真核表达载体pCAG-...

【专利技术属性】
技术研发人员：冯磊，恽君雯，吴培培，陈丽，侯继波，
申请(专利权)人：江苏省农业科学院，
类型：发明
国别省市：江苏;32