从生物技术产物中除去DNA的方法技术
Method for removing DNA from biological products
The present invention relates to a method for degrading DNA in a sample obtained by microbial fermentation or biotransformation, including treating samples with elevated temperatures and low pH combinations. The present invention also relates to methods for releasing DNA from microbial cells, including incubation of microbial cells for 2 to 10 hours at temperatures between 45 and 55 DEG C. Finally, the present invention provides a method for producing a product comprising the step of releasing DNA from a microbial cell and degrading DNA.
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】从生物技术产物中除去DNA的方法
本专利技术涉及用于降解微生物发酵或生物转化获得的样品中的DNA的方法，包括采用升高的温度和低pH的组合处理该样品。本专利技术也涉及用于从微生物细胞释放DNA的方法，包括在45℃至55℃的温度下温育微生物细胞2至10小时。最后，本专利技术提供用于生产产物的方法，包括从微生物细胞释放DNA并且降解该DNA的步骤。
技术介绍
在发酵和生物转化方法中，使用原核细胞和/或真核细胞的代谢活动来生产物质，例如啤酒、葡萄酒和生物乙醇、L-谷氨酸、柠檬酸和乳酸、不同的抗生素、酶、类固醇和芳香成分。通过发酵或生物转化获得的产物可能包含来自用于该方法中的细胞的DNA。在一方面，纯化胞内产物需要破裂细胞，在细胞破裂以后，包含DNA的胞内化合物释放到液体培养基中，甚至在几个进一步的纯化步骤以后，残留的DNA可能保留在产物中。另一方面，即使在发酵或生物转化以后-在发酵或生物转化方法期间，仅仅通过细胞裂解和释放DNA，使用用于除去细胞的有效的分离步骤，胞外产物也可能包含残留的DNA。对于通过发酵或生物转化获得的仍然包含DNA的产物，与不包含残留DNA的那些产物相比较，控制要求可能更加严格。例如对于通过发酵基因修饰的微生物(GMM)而获得的食物和饲料产物，在产物中不存在GMM和新引入的基因，对于其用于风险评估目的的分类具有直接影响(EFSA(2011)TheEFSAJournal9(6)：2193)。新引入基因的缺失将会由跨越有关靶基因的完整(complete)编码序列的PCR显示(EFSA(2011)TheEFSAJournal9(6)：2193)。因...
【技术保护点】
用微生物细胞产生目的产物的方法，包括以下步骤：a)在培养基中培养能够产生所述目的产物的微生物细胞；b)通过在45至55℃的温度下温育2至10小时来破裂微生物细胞，从而从细胞释放DNA；c)在至少50℃的温度和小于4.5的pH下，温育所释放的DNA，从而降解所释放的DNA；和d)分离所述目的产物。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.12.10 EP 14197230.71.用微生物细胞产生目的产物的方法，包括以下步骤：a)在培养基中培养能够产生所述目的产物的微生物细胞；b)通过在45至55℃的温度下温育2至10小时来破裂微生物细胞，从而从细胞释放DNA；c)在至少50℃的温度和小于4.5的pH下，温育所释放的DNA，从而降解所释放的DNA；和d)分离所述目的产物。2.根据权利要求1的方法，其中微生物细胞是真菌细胞，优选是棉花假囊酵母细胞。3.根据权利要求1或2的方法，其中目的产物选自维生素、类胡萝卜素、辅酶、氨基酸、有机酸、抗生素、醇、萜、蛋白质、脂肪酸、类固醇、核苷酸、多糖、聚羟基链烷酸酯，目的产物优选是维生素B2。4.根据权利要求1至3中任一项的方法，其中微生物细胞是棉花假囊酵母细胞并且目的产物是维生素B2。5.根据权利要求1至4中任一项的方法，其中通过在48℃的温度下温育细胞4小时使其破裂。6.根据权利要求1至5中任一项的方法，其中在...
【专利技术属性】
技术研发人员：B·霍夫，S·哈夫纳，W·K·曾，E·朔尔腾，
申请(专利权)人：巴斯夫欧洲公司，
类型：发明
国别省市：德国,DE
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