一种调节脂代谢和肥胖的化合物PAQG在制药中的应用制造技术

提供一种提取于黄棉木的降齐墩果酸化合物Pyrocincholic Acid 3β‑O‑β‑D‑quinovopyranosyl‑28‑O‑β‑D‑glucopyranoside(PAQG)在3T3‑L1细胞中调控脂代谢的新功能，以及其在制备改善肥胖及肥胖相关代谢性疾病的药物、食品及保健品中的应用。PAQG通过激活AMPK抑制3T3‑L1前脂肪细胞分化，下调分化相关转录因子和蛋白(PPARγ,C/EBPβ,C/EBPα和FABP4)的表达以及脂联素的释放。同时，还通过抑制脂肪酸合成和促进脂氧化抑制3T3‑L1成熟脂肪细胞中的脂肪累积。在安全有效的给药剂量下，PAQG从脂肪细胞数目和脂肪含量大小两方面来改善肥胖，可用于制备防治肥胖及肥胖相关的代谢性疾病的药物、保健品和功能食品。

A compound PAQG that regulates lipid metabolism and obesity; used in pharmaceuticals

To provide a method for extracting yellow Mianmu reduced oleanolic acid compound Pyrocincholic Acid 3 beta O D quinovopyranosyl 28 beta O D beta glucopyranoside (PAQG) new functional regulation of lipid metabolism in 3T3 L1 cells, and its application in preparing medicine, obesity and obesity related metabolic for the disease to improve the food and health care products in the. PAQG through the activation of AMPK inhibited 3T3 L1 preadipocytes differentiation and down-regulation of differentiation related transcription factors and protein (PPAR gamma, C/EBP beta, C/EBP alpha and FABP4) and the expression of adiponectin release. At the same time, through inhibition of fatty acid synthesis and promote lipid peroxidation inhibition of 3T3 L1 mature fat cells in fat accumulation. In a safe and effective medicine dosage, two PAQG from the number of fat cells and fat size to improve obesity, can be used for preparing medicine, prevention and treatment of obesity and related metabolic diseases and health products and functional foods.

【技术实现步骤摘要】
一种调节脂代谢和肥胖的化合物PAQG在制药中的应用
：本专利技术属于药物
，具体涉及一种降齐墩果酸化合物PyrocincholicAcid3β‐O‐β‐D‐quinovopyranosyl‐28‐O‐β‐D‐glucopyranoside(PAQG)在3T3‐L1细胞中调控脂代谢的新功能，以及其在制备改善肥胖及肥胖相关代谢性疾病的药物、食品及保健品中的应用。技术背景：糖尿病作为一种慢性代谢性疾病，它的并发症严重危及着人类的身体健康。尤其是与人类生活方式密切相关的2型糖尿病的研究也越来越多。研究表明，50％的肥胖人群都患有2型糖尿病，并且肥胖能够使2型糖尿病的患病率增加3倍。所以，肥胖与糖尿病的研究也越来越备受关注。世界卫生组织(WHO)明确将肥胖定义为“体内过多或异常的脂肪累积”，而造成体内脂肪累积的原因可以从脂肪细胞数目和脂肪细胞中脂肪的含量两方面考虑。对脂肪累积的研究也成为一个治疗糖尿病的新靶点。虽然，市面上存在着各种各样改善肥胖的药物，但大多由于药效低、副作用大而滞销，所以，研究一种安全有效的改善肥胖、治疗糖尿病的药物或者化合物仍然是极有必要的。PAQG是一种新型的降齐墩果酸型皂苷小分子，从黄棉木中提取。黄棉木是茜草科黄棉木属中的单种属植物，广泛生长于中国西南部，越南，印度等地。目前，这一类化合物仅分离出二十多种，PAQG就是其中的一种。而且，这些化合物的活性研究也比较少。本专利技术首次发现了PAQG在3T3‐L1细胞中对脂代谢的调控作用。
技术实现思路
：本专利技术的目的在于提供一种具有显著抑制3T3‐L1细胞分化和脂肪累积的化合物PAQG，以及该化合物在制备改善肥胖及肥胖相关代谢性疾病的药物、食品及保健品方面的应用。为了实现本专利技术的上述目的，本专利技术提供了如下的技术方案：化合物PAQG在制备对3T3‐L1前脂肪细胞分化的抑制剂中的应用，化合物PAQG在制备对成熟脂肪细胞脂肪代谢的调节剂中的应用。化合物PAQG在制备减肥药物中的应用。化合物PAQG在制备调节血脂的药物中的应用。根据所述的化合物PAQG在制备减肥药物中的应用，以及所述的化合物PAQG在制备调节血脂的药物中的应用，其中PAQG是通过显著抑制3T3‐L1前脂肪细胞分化，下调分化相关转录因子和蛋白PPARγ,C/EBPβ,C/EBPα和FABP4的表达以及脂联素的释放，并通过抑制脂肪酸合成和促进脂氧化来抑制脂肪细胞中的脂肪累积，达到减肥和调节血脂作用。本专利技术同时还提供了化合物PAQG在制备改善肥胖及治疗或预防肥胖相关代谢性疾病的药物中的应用。根据所述的化合物PAQG在制备改善肥胖及治疗或预防肥胖相关代谢性疾病的药物中的应用，其中PAQG是通过显著抑制3T3‐L1前脂肪细胞分化，下调分化相关转录因子和蛋白PPARγ,C/EBPβ,C/EBPα和FABP4的表达以及脂联素的释放，并通过抑制脂肪酸合成和促进脂氧化来抑制脂肪细胞中的脂肪累积，达到减肥作用。本专利技术另外还提供了化合物PAQG在制备改善肥胖及肥胖相关代谢性疾病的食品及保健品中的应用。经过大量多次的独立重复试验，首次发现了PAQG在3T3‐L1细胞中对脂代谢的调控作用。本专利技术发现PAQG能够显著抑制3T3‐L1前脂肪细胞分化，下调分化相关转录因子和蛋白(PPARγ,C/EBPβ,C/EBPα和FABP4)的表达以及脂联素的释放。同时，通过抑制脂肪酸合成和促进脂氧化来抑制脂肪细胞中的脂肪累积。其调节脂代谢的作用可能与AMPK信号通路的激活有关。在安全有效的给药剂量下，PAQG从脂肪细胞数目和脂肪含量大小两方面来改善肥胖。附图说明图1.油红O染色。3T3‐L1前脂肪细胞诱导分化6天。实验组添加不同浓度的PAQG；con组不加化合物，用0.1％DMSO替代；undifferentiated组不添加诱导试剂作为空白对照。实验独立重复三次。图2.3T3‐L1前脂肪细胞诱导分化6天，实验组添加不同浓度的PAQG，对照组不加化合物，用0.1％DMSO替代。(A)分化相关转录因子(PPARγ,C/EBPβ和C/EBPα)以及蛋白FABP4的电泳结果；(B)培养基中的脂联素释放水平。实验独立重复三次，组间比较使用独立样本t检验，误差线为标准误。与对照组比较，*P<0.05,**P<0.01。图3.分化完成的脂肪细胞，用不同浓度PAQG处理48小时，0.1％DMSO作对照。(A)，上图，给药方法；下图，给药48小时后，脂肪细胞中脂滴含量；(B)，正常情况下，3T3‐L1脂肪细胞中的甘油三酯的时间‐浓度曲线；(C)，给药处理后，3T3‐L1脂肪细胞中甘油三酯的时间‐浓度曲线；(D)，给药处理后，3T3‐L1脂肪细胞中的游离脂肪酸的时间‐浓度曲线；(E)，给药处理后，3T3‐L1脂肪细胞中的甘油的时间‐浓度曲线；(F)，3T3‐L1脂肪细胞中甘油释放的时间‐浓度曲线。实验独立重复三次，组间比较使用独立样本t检验，误差线为标准误。与对照组比较，*P<0.05,**P<0.01。图4.(A)，3T3‐L1前脂肪细胞在含有不同浓度PAQG的诱导分化培养基中分化，6天后，用聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测的蛋白AMPK和p‐AMPK的表达；(B)，对(A)实验结果的量化；(C)，在3T3‐L1前脂肪细胞诱导分化的全过程加入20μMPAQG，对照组添加0.1％的DMSO，然后在不同的时间点收集蛋白样品检测AMPK和p‐AMPK的表达水平；(D)，对(C)实验结果的量化(箭头表示化合物PAQG开始给药处理)。实验独立重复三次，组间比较使用独立样本t检验，误差线为标准误。与对照组比较，*P<0.05,**P<0.01。图5.将分化好的3T3‐L1脂肪细胞用不同浓度的PAQG孵育48小时(收集蛋白样品和RT‐PCR样品)。(A)，p‐AMPK和AMPK的电泳结果；(B)，对(A)蛋白电泳结果的量化；(C)，RT‐PCR结果：受AMPK调控的与脂肪酸合成相关的基因(SREBP1c、ACCα、SCD1、FAS)的表达；(D)，RT‐PCR结果：受AMPK调控的与脂氧化相关的基因(PDK4、CPT1a、ACOX1)的表达。实验独立重复三次，组间比较使用独立样本t检验，误差线为标准误。与对照组比较，*P<0.05,**P<0.01。图6.在3T3‐L1细胞中，化合物PAQG的细胞毒性实验。实验独立重复三次。具体实施方式：下面结合附图，用本专利技术的实施例来进一步说明本专利技术的实质性内容，但并不以此来限定本专利技术。实施例1：本专利技术化合物PAQG，结构式如下式(I)所示，提取于黄棉木，由中国科学院西双版纳热带植物园提供，制备方法请参考如下文献中所记载的方法。ZHANGY,TANN,HUANGH,etal.TriterpenoidSaponinsfromMetadinatrichotoma[J].ZeitschriftfürNaturforschungB,2007,62(5):745‐748.1、PAQG抑制3T3‐L1前脂肪细胞分化：3T3‐L1前脂肪细胞饥饿两天，用诱导试剂诱导分化三天，再用维持培养基培养一天，之后更换新鲜培养基正常培养即分化为脂肪细胞。按照该实验方法，在整个分化过程中用不同浓度本文档来自技高网...

【技术保护点】
化合物PAQG在制备对3T3‐L1前脂肪细胞分化的抑制剂中的应用。

【技术特征摘要】
1.化合物PAQG在制备对3T3‐L1前脂肪细胞分化的抑制剂中的应用。2.化合物PAQG在制备对成熟脂肪细胞脂肪代谢的调节剂中的应用。3.化合物PAQG在制备减肥药物中的应用。4.化合物PAQG在制备调节血脂的药物中的应用。5.根据权利要求3所述的化合物PAQG在制备减肥药物中的应用，其特征在于PAQG通过显著抑制3T3‐L1前脂肪细胞分化，下调分化相关转录因子和蛋白PPARγ,C/EBPβ,C/EBPα和FABP4的表达以及脂联素的释放，并通过抑制脂肪酸合成和促进脂氧化来抑制脂肪细胞中的脂肪累积，达到减肥和调节血脂作用。6.根据权利要求4所述的化合物PAQG在制备调节血脂的药物中的应用，其特征在于PAQG通过显著抑制3T3‐L1前脂肪细胞分化，下调分...

【专利技术属性】
技术研发人员：熊文勇，张玉梅，彭莉，胡敬，
申请(专利权)人：中国科学院昆明植物研究所，
类型：发明
国别省市：云南,53