一种检测猫疱疹病毒的方法技术

技术编号:15876552 阅读:394 留言:0更新日期:2017-07-25 14:23
本发明专利技术提供一种检测猫疱疹病毒的方法,即通过筛选获得的寡核苷酸引物,通过SYBR Green I荧光定量PCR方法检测猫疱疹病毒。本发明专利技术首先提供一种用于检测猫疱疹病毒的引物对,其上下游引物的序列分别为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2。本发明专利技术筛选的引物既能保证鉴定病原的正确,又不能漏检同种不同株病原。另外,本发明专利技术的扩增片段长度适宜,既能在电泳中相互分开,又不太离散,避免多重PCR中优先扩增小片段后阻碍长片段扩增的情形,同时引物二聚体等非特异性扩增产物很少。另外,通过荧光定量反应体系和反应条件的优化,得到特异性和灵敏性较高的FHV的荧光定量PCR检测方法。

Method for detecting feline herpes virus

The invention provides a method for detecting feline herpes virus, the oligonucleotide primers were obtained by screening the SYBR I Green by fluorescent quantitative PCR method to detect feline herpes virus. The present invention provides a method for detecting the first feline herpes virus primers, the downstream primer sequences were SEQ ID and SEQ NO:1 ID NO:2. The primers screened by the invention can ensure the correct identification of pathogens, and can not detect different pathogenic bacteria of the same kind. In addition, the invention is suitable for amplification fragment length, can be separated from each other in electrophoresis, and not too discrete, avoid multiple PCR preferential amplification of small fragments after blocking the long fragment situation, at the same time two primer dimers nonspecific amplification products rarely. In addition, a quantitative fluorescence detection method for FHV with high specificity and sensitivity was obtained by optimizing the fluorescent quantitative reaction system and the reaction conditions. PCR.

【技术实现步骤摘要】
一种检测猫疱疹病毒的方法
本专利技术属于分子检测
,具体涉及一种检测猫疱疹病毒的方法,即通过筛选获得的寡核苷酸引物,通过SYBRGreenI荧光定量PCR方法检测猫疱疹病毒。
技术介绍
猫疱疹病毒(FHV,猫鼻气管炎),该病毒主要侵害仔猫,能致发猫鼻气管炎病,感染猫症状严重时,出现体温升高,明显的上呼吸道感染,病毒在病猫的鼻、咽喉、气管和支气管以及舌、结膜等的部位增殖。该病最早从美国发现,随后在加拿大、英国、荷兰、瑞士、匈牙利、越南等地发现和流行,我国已多次发现可疑病例,并分离到病毒。但目前在实验动物国家标准及地方标准中,均没有对实验用猫的检测要求及相关规定。对于猫疱疹病毒病的诊断可根据本病的流行病学特点、临诊表现及典型病理变化做出初步诊断,若要进一步确诊需要进行实验室诊断。猫疱疹病毒病的实验室诊断方法主要包括病原学诊断、血清学诊断和分子生物学诊断。然而在病原学诊断方面,由于分离培养工作量相对较大,且病毒自身对外界环境的抵抗力较低,因此分离的成功率并不是非常高。分离培养之后的最为快捷、简便的病毒电镜鉴定也仅仅能够观察到病毒的病态结构,无法完成同科病毒的区别;常用的血清学诊断方法本文档来自技高网...
一种检测猫疱疹病毒的方法

【技术保护点】
一种引物对,所述的引物对,其上下游引物的序列分别为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2。

【技术特征摘要】
1.一种引物对,所述的引物对,其上下游引物的序列分别为SEQIDNO:1和SEQIDNO:2。2.权利要求1所述引物对在制备用于检测猫疱疹病毒的生物制品中的应用。3.如权利要求2所述的应用,其特征在于,所述的生物制品为试剂盒。4.一种用检测猫疱疹病毒的试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒中包含有权利要求1所述的引物对。5.权利要求1所述引物对在非疾病诊断和治疗目的的猫疱疹病毒的检测中的应用。6.一种用于非疾病诊断和治疗目的的猫疱疹病毒的检测方法,其特征在于,所述的方法包括的步骤如下:1)提取待检测的样品的核...

【专利技术属性】
技术研发人员:单虎潘柳婷倪彬砚张慧秦志华张洪亮杨瑞梅于鹏孙军昌孙强
申请(专利权)人:青岛农业大学
类型:发明
国别省市:山东,37

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