一种用于检测RhD阴性血型的引物组及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种用于检测RhD阴性血型的引物组，该引物组能够在226例血清学确证实验检测为RhD阴性或D变异的个体检测出十余种RHD基因型，并发现了1例新的SNP位点，所述的SNP位点是RHD基因编码区域由起始密码子起第208位碱基发生了突变，由C突变为T；第211位碱基发生插入了G，导致后续移码突变。本发明专利技术的引物对包括PCR扩增1～10外显子的上下游引物和10个测序引物。本发明专利技术在验证了数种已发现基因型外，又发现了一种新的SNP位点，从而提供了一种有效的RhD阴性血型鉴定途径，应用效果表明本发明专利技术所提供的检测引物可以有效的用于临床患者及血站献血员进行RHD基因的快速检测，从而准确确定其RhD血型。

Primer set for detecting RhD negative blood group and application thereof

The present invention provides a primer set for detection of RhD negative blood group, the primer is able to detect the serological confirmation test of 226 cases of RhD negative or D variation detected more than ten kinds of RHD genotypes, and found 1 cases of the new SNP site, SNP site of the RHD gene encoding region from the start codon 208th base mutation, C mutation is T; 211st bases were inserted into the G, leading to subsequent frameshift mutation. The primers of the present invention include upstream and downstream primers comprising 1~10 PCR amplified exons and 10 sequenced primers. The present invention in a number of verification has been found in genotype, and found a new SNP site, which provides an effective way to identify RhD negative blood type, the application results show that the primers were provided by the invention can be used for rapid detection of clinical patients and blood donors were RHD gene effectively, thus precise determination of RhD blood group.

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测RhD阴性血型的引物组及其应用
本专利技术属于基因诊断制品
，具体涉及一种用于检测RhD阴性血型的引物组及其应用。专利技术背景Rh血型系统(Rhesusmonkeys)是由著名科学家、诺贝尔奖得主KarlLandsteiner率先从恒河猴的红细胞上发现，故因此得名。Rh血型系统是目前人类36个血型系统中最复杂的，其重要性仅次于ABO系统，在临床输血、新生儿溶血病的诊治中占有重要地位。Rh血型系统中D抗原是免疫原性最强、多态性最复杂的。对于中国大陆的汉族人来讲，RhD阴性人群只占千分之三左右，由于十分罕见，故又名熊猫血。由于RhD的强抗原性，导致RhD阴性者不能接受RhD阳性血液，因为RhD抗原将刺激RhD阴性个体产生抗-RhD抗体。如果再次输入RhD阳性血液，即可导致溶血性输血反应。同样，若RhD阴性妇女由于妊娠或输血刺激体内产生抗-RhD抗体，再次怀孕则会导致新生儿溶血病的发生。RhD血型系统而除了正常的RhD阳性、阴性外，还存在许多变异型，包括弱D(weakD)、部分D(partialD)及DEL型(放散型)。这些变异型的红细胞表面存在不完全的、或者变异的R本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于检测RhD阴性血型的引物组合，其特征在于，所述的引物组合包含有如下的一个或几个引物对，其序列信息如下：RHD‑1F:5’‑AACTCCATAGAGAGGCCAGCAC‑3’、RHD‑1R:5’‑AGATGGGGGAATCTTTTTCCTT‑3’；RHD‑2F:5’‑TCCCCCTCGTCCTTCTCG‑3’、RHD‑2R:5’‑CAGGATGCCCAGTTAATTTGAAT‑3’；RHD‑3F:5’‑CCACAGAAAGTAGGTGCCCAA‑3’、RHD‑3R:5’‑TCTTTATTTTTCAAAACCCTGGAAA‑3’；RHD‑4F:5’‑TCCAAGGACTATCAGGGCTT...

【技术特征摘要】
1.一种用于检测RhD阴性血型的引物组合，其特征在于，所述的引物组合包含有如下的一个或几个引物对，其序列信息如下：RHD-1F:5’-AACTCCATAGAGAGGCCAGCAC-3’、RHD-1R:5’-AGATGGGGGAATCTTTTTCCTT-3’；RHD-2F:5’-TCCCCCTCGTCCTTCTCG-3’、RHD-2R:5’-CAGGATGCCCAGTTAATTTGAAT-3’；RHD-3F:5’-CCACAGAAAGTAGGTGCCCAA-3’、RHD-3R:5’-TCTTTATTTTTCAAAACCCTGGAAA-3’；RHD-4F:5’-TCCAAGGACTATCAGGGCTTG-3’、RHD-4R:5’-CTTCAGACACCCAGGGGAAC-3’；RHD-5F:5’-CAGCCCTAGGATTCTCATCCAA-3’、RHD-5R:5’-GCAGAAATGGGGTTCAAACTG-3’；RHD-6F:5’-CCCATCATGTCCACTGATGAA-3’、RHD-6R:5’-AGCCAAAGCAGAGGAGGTTAGTT-3’；RHD-7F:5’-AACTCCCCGATGATGTGAGTG-3’、RHD-7R:5’-CAAGGTAGGGGCTGGACAG-3’；RHD-8F:5’-TGGAGGCTC...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡彬，迟晓云，朱于莉，韩斌，
申请(专利权)人：青岛市中心血站青岛市公民义务献血办公室青岛市输血医学研究所，
类型：发明
国别省市：山东,37