一种利用基因枪法介导遗传转化毛竹的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用基因枪法介导遗传转化毛竹的方法。本发明专利技术的方法包括毛竹成熟胚的获取及预培养、含目的基因质粒的提取、基因枪参数设置、抗性筛选、转化植株鉴定、阳性植株培育和移栽等步骤，以及转化及诱导各过程中专用培养基的配方。本发明专利技术解决了毛竹难于进行遗传转化的问题，可有效缩短获得转基因竹的周期(筛选一个月后即获得了抗性幼苗，二至四个月可获得阳性植株)，提高获得转基因毛竹的几率。且本发明专利技术的方法重复性好，对工业用竹遗传改良和竹功能基因组学研究等具有重要的作用及广阔的应用前景。

Method for genetic transformation of bamboo by gene gun bombardment

The invention discloses a method for genetic transformation of Moso Bamboo by using gene gun bombardment. The method of the invention includes acquisition and pre mature embryo culture, bamboo extract, gene gun plasmid containing the target gene parameter setting, resistance screening and identification of transformed plants, positive plants cultivation and transplanting steps, and the process of transformation and induction of special culture medium formula. The invention solves the difficult problem of bamboo genetic transformation, can effectively shorten the cycle of transgenic bamboo (one month after screening for resistance of seedlings, two to four months to obtain positive plants), improve the chances of obtaining transgenic bamboo. The method of the invention has good repeatability, and has important function and broad application prospect for industrial bamboo genetic improvement and bamboo functional genomics research.

【技术实现步骤摘要】
一种利用基因枪法介导遗传转化毛竹的方法
本专利技术涉及一种利用基因枪法介导遗传转化毛竹的方法，属于植物转基因

技术介绍
竹类是禾本科(Gramimineae)竹亚科(Bambusoideae)多年生常绿植物。全世界竹类资源约70多属，1250种，我国竹类资源共有39属，500多种，竹林面积、蓄积量等均居世界第一位，主要分布在北纬40°以南地区，既是重要森林资源之一，同时也是重要的可再生资源。对于竹纤维品质的提高主要有两种方法：一是常规育种方式，但因竹开花具有不确定性，且开花后即死亡等特点，受到的限制巨大；二是通过基因工程手段在分子水平上对其进行改良。然而目前为止，竹纤维的优越性主要通过一些理化分析得到验证，却未在分子水平上进行深入研究。目前，竹类基因克隆及其遗传改良方面的研究尚处起步和探索阶段。在基因克隆方面，尽管相继在慈竹、绿竹、毛竹上克隆了调控竹木质素相关合成酶基因，但未见在竹中成功进行遗传转化的研究报道。毛竹(Phyllostachyspubescens)作为我国南方一种重要的森林资源，具有较高的社会、经济和生态效益，在竹产业中具有重要地位。毛竹(Phyllostac本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种竹子的遗传转化的方法，包括如下步骤：(1)将竹子种子的胚在预培养基中进行预培养，得到预培养后的成熟胚；(2)利用基因枪法将目的基因转化所述预培养后的成熟胚，培养，得到转基因竹子。

【技术特征摘要】
1.一种竹子的遗传转化的方法，包括如下步骤：(1)将竹子种子的胚在预培养基中进行预培养，得到预培养后的成熟胚；(2)利用基因枪法将目的基因转化所述预培养后的成熟胚，培养，得到转基因竹子。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述基因枪法的轰击参数如下：金粉量：80-240ug；轰击距离：6-12cm；轰击压力：1100-1550psi；真空度：27。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述基因枪法的轰击参数如下：金粉量：160ug；轰击距离：6cm；轰击压力：1350psi；真空度：27。4.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：所述预培养基是将MS大量元素溶液、B5有机元素溶液、B5微量元素溶液、MS铁盐溶液、2,4-D、KT、IBA、蔗糖和凝固剂混匀得到的培养基；或，所述MS大量元素溶液包括KNO3、NH4NO3、CaCL2、MgSO4·7H2O和KH2PO4；或，所述B5有机元素溶液包括肌醇、烟酸、烟酸硫铵和盐酸吡哆醇；或，所述B5微量元素溶液包括KI、H3BO3、MnSO4·4H2O、ZnSO4·7H2O、Na2MoO4·2H2O和CoCl2·6H2O；或，所述MS铁盐溶液包括FeSO4·7H20和NA2EDTA·2H2O。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述2,4-D在所述预培养基中的浓度为2mg/L；所述KT在所述预培养基中的浓度为0.2mg/L；所述IBA在所述预培养基中的浓度为0.4mg/L；所述KNO3在所述预培养基中的浓度为1.9g/L；所述NH4NO3在所述预培养基中的浓度为1.65g/L；所述CaCl2在所述预培养基中的浓度为0.33224g/L；所述MgSO4·7H2O在所述预培养基中的浓度为0.37g/L；所述KH2PO4在...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡尚连，黄艳，廖倩，姜勇，曹颖，徐刚，卢学琴，
申请(专利权)人：西南科技大学，
类型：发明
国别省市：四川,51