The invention relates to a method for extracting fish collagen, belonging to the technical field of natural protein extraction. The invention adopts a solvent-free fish collagen extraction process, to achieve the separation of fat removal technology, the main idea is: firstly, by grinding under the action of ultrasonic and homogenization, so that skin tissue cells fully broken, fat and protein can be removed in the more alkaline treatment and enzyme treatment in the follow-up, can get the low fat content of the crude extracts, next, then the crude extract solution through the lipophilic resin bed, achieve the purpose of low levels of lipid adsorption. The prepared fish collagen has the advantages of high purity, low fat content and good water solubility.
【技术实现步骤摘要】
一种鱼胶原蛋白的提取方法
本专利技术涉及一种鱼胶原蛋白的提取方法,属于天然蛋白提取
技术介绍
胶原蛋白(collagen)是一种白色、不透明、无支链的纤维性蛋白质,在动物细胞中扮演结合组织的角色。胶原蛋白富含除色氨酸和半胱氨酸外的18种氨基酸,其中维持人体生长所必需的氨基酸有7种。胶原蛋白中的甘氨酸占30%,脯氨酸和羟脯氨酸共占约25%,是各种蛋白质中含量最高的,丙氨酸、谷氨酸的含量也比较高。同时,还含有在一般蛋白中少见的羟脯氨酸和焦谷氨酸和在其他蛋白质几乎不存在的羟基赖氨酸。所以,胶原蛋白的营养十分丰富。鱼胶原蛋白主要是从罗非鱼、鳕鱼新鲜皮和鱼鳞中通过生物酶定向剪切技术提取得到,分子量在2000Da~5000Da长度之间,具有很高的消化吸收性,热稳定性极好,具有极好生物亲和性,能够很好的发挥其渗透、保湿、修复等功能。鱼胶原蛋白主要含有I和V型胶原蛋白,分布在鱼类的皮、骨、鳞等处,是由3条肽链拧成的螺旋形纤维状蛋白质。其主要氨基酸组成为甘氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸、丙氨酸,羟赖氨酸等,氨基酸组成与其它蛋白质有显著区别,甘氨酸的含量很高,几乎占总氨基酸残基的三分之一,即每隔2个其它氨基酸残基(X,Y)即有1个甘氨酸,故其肽链可用(Gly-X-Y)n来表示;其所含有的羟脯氨酸和羟赖氨酸残基在其它蛋白质中较为罕见。由于海洋生态环境的特殊性(如高压、低温等),使得鱼胶原蛋白在氨基酸的组成和氨基酸的序列上与陆生动物胶原蛋白相比都有一定的差异,从而使鱼胶原蛋白拥有独特生理功能和物化特性。鱼胶原蛋白易溶于中性盐溶液或稀酸,较易调制成可溶性胶原溶液,由于其鱼胶原蛋白 ...
【技术保护点】
一种鱼胶原蛋白的提取方法,其特征在于,包括如下步骤:第1步,组织破碎:将鱼皮解冻之后,加入水,使鱼皮与水的重量比在10:0.2~1,将混合物进行粉碎和研磨,在粉碎和研磨的同时外加超声作用,得到浆料;第2步,去除盐溶性杂质:将浆料与NaCl溶液混合,搅拌均匀后浸泡,再经过离心处理,去除上清,得到第一沉淀;第3步,去除脂类和碱溶性杂质:将第一沉淀与碱溶液混合,搅拌均匀后浸泡,再经过离心处理,去除上清,得到第二沉淀;第4步,去除酸溶性杂质:将第二沉淀与酸溶液混合,搅拌均匀后浸泡,再经过离心处理,去除上清,得到第三沉淀;第5步,酶解处理:第三沉淀与水混合,再加入第三沉淀重量1~5%的蛋白酶进行酶解,反应结束后升温灭酶,经过离心后,取上清液得到粗提物;第6步,树脂除脂处理:粗提物送入除脂树脂床层中进行吸附处理,得到除脂液;第7步,精制处理:除脂液中加固体 NaCl,使NaCl浓度为 0.5~1.5mol/L,冷冻离心得盐析后的胶原蛋白沉淀;再用0.5~1.5mol/L 的醋酸对胶原沉淀物复溶后装袋透析除去盐离子,冷冻干燥得到精制鱼胶原蛋白。
【技术特征摘要】
1.一种鱼胶原蛋白的提取方法,其特征在于,包括如下步骤:第1步,组织破碎:将鱼皮解冻之后,加入水,使鱼皮与水的重量比在10:0.2~1,将混合物进行粉碎和研磨,在粉碎和研磨的同时外加超声作用,得到浆料;第2步,去除盐溶性杂质:将浆料与NaCl溶液混合,搅拌均匀后浸泡,再经过离心处理,去除上清,得到第一沉淀;第3步,去除脂类和碱溶性杂质:将第一沉淀与碱溶液混合,搅拌均匀后浸泡,再经过离心处理,去除上清,得到第二沉淀;第4步,去除酸溶性杂质:将第二沉淀与酸溶液混合,搅拌均匀后浸泡,再经过离心处理,去除上清,得到第三沉淀;第5步,酶解处理:第三沉淀与水混合,再加入第三沉淀重量1~5%的蛋白酶进行酶解,反应结束后升温灭酶,经过离心后,取上清液得到粗提物;第6步,树脂除脂处理:粗提物送入除脂树脂床层中进行吸附处理,得到除脂液;第7步,精制处理:除脂液中加固体NaCl,使NaCl浓度为0.5~1.5mol/L,冷冻离心得盐析后的胶原蛋白沉淀;再用0.5~1.5mol/L的醋酸对胶原沉淀物复溶后装袋透析除去盐离子,冷冻干燥得到精制鱼胶原蛋白。2.根据权利要求1所述的鱼胶原蛋白的提取方法,其特征在于,所述的第1步中,鱼皮来源选自鲤鱼、鲫鱼、青鱼、草鱼、鲢鱼、鳙鱼或者罗非鱼。3.根据权利要求1所述的鱼胶原蛋白的提取方法,其特征在于,所述的第2步中,NaCl溶液的质量浓度4~10%,浆料与NaCl溶液重量比1:5~10,浸泡时间是10~30h。4.根据权利要求1所述的鱼胶原蛋白的提取方法,其特征在于,所述的第3步中,所述的碱溶液选自NaOH溶液、KOH溶剂、NaHCO3溶液或者K2CO3溶液;碱溶液的质量浓度2~5%,第一沉淀与碱溶液重...
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