普通小麦中维生素B1含量的高效液相色谱测定方法技术

本发明专利技术公开了一种普通小麦中维生素B1含量的高效液相色谱测定方法。所述提取方法包括如下步骤：将普通小麦粉制成全麦粉，全麦粉在醋酸钠水溶液中进行酶解；酶解结束后的体系经过滤后滤液进行衍生化，加入正丁醇振荡后离心，取上清液，即得到维生素B1；酶解采用复合酶，复合酶为木瓜蛋白酶、酸性磷酸酶、α‑淀粉酶和还原性谷胱甘肽的复合物。本发明专利技术采用HPLC搭配荧光检测器，灵敏度更高，选择性更强。在碱性条件下，维生素B1被铁氰化钾氧化为硫色素，其在紫外光激发下产生蓝色荧光，利用该荧光强度与维生素B1含量成正比关系，将硫色素萃取分离，并荧光定量反映维生素B1的含量。通过高效液相色谱仪确定维生素B1的色谱条件，其中维生素B1的保留时间为3.827min。

Determination of vitamin B1 in common wheat by high performance liquid chromatography

The invention discloses a high performance liquid chromatography method for determining the content of vitamin B1 in common wheat. The extraction method comprises the following steps: wheat flour into wheat flour, whole wheat flour was hydrolyzed in sodium acetate aqueous solution; after enzymolysis system after filtration filtrate were derivatized, adding n-butanol oscillation after centrifugation, the supernatant fluid was to obtain vitamin B1; enzymatic hydrolysis by enzyme, compound enzyme papain, acid phosphatase, alpha amylase and glutathione complexes. The invention adopts HPLC to match the fluorescent detector, and has higher sensitivity and stronger selectivity. Under alkaline conditions, vitamin B1 is potassium ferricyanide as sulfur pigment, the blue fluorescence under ultraviolet excitation, the fluorescence intensity is proportional to the content of vitamin B1, sulfur pigment extraction and quantitative fluorescence reflect the content of vitamin B1. The chromatographic conditions of vitamin B1 were determined by HPLC, and the retention time of vitamin B1 was 3.827min.

【技术实现步骤摘要】
普通小麦中维生素B1含量的高效液相色谱测定方法
本专利技术涉及一种普通小麦中维生素B1含量的高效液相色谱测定方法。
技术介绍
小麦是世界第二大粮食作物，在全球各地广泛种植。我国是小麦生产和消费量最大的国家，2016年小麦种植面积达到24186.5千公顷，总产量约为1.29亿吨。随着经济和社会的发展，消费者的生活需求正在发生变化，小麦营养品质备受关注。B族维生素是维持人体生命活动必需的一类有机物质，特别是维生素B1在碳水化合物中的代谢、神经传导、糖尿病、心衰竭和阿兹海默症等方面中起重要作用。由于人类和动物自身不能合成维生素B，必须从外界摄取，而谷类食物既富含维生素B族成分又是人们重要的日常食物来源，因此准确测定小麦面粉中维生素B1的含量对评价小麦营养价值及品质育种具有重要的指导性意义。现阶段，维生素B1的检测方法包括国际上的微生物法和国标的荧光分光光度计法。其中，微生物法定量结果准确，但前处理步骤繁琐，培养时间长，技术难度大，重复性差；荧光分光光度计法操作简单，但由于谷物中维生素B含量较低，有共存物质干扰，所以检测结果重复性不高。鉴于人们对于B1的深入研究，此类方法已不能满足研究者的要本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种普通小麦中维生素B1的提取方法，包括如下步骤：将普通小麦粉制成全麦粉，所述全麦粉在醋酸钠水溶液中进行酶解；所述酶解结束后的体系经过滤后滤液进行衍生化，加入正丁醇振荡后离心，取上清液，即得到维生素B1；所述酶解采用复合酶，所述复合酶为木瓜蛋白酶、酸性磷酸酶、α‑淀粉酶和还原性谷胱甘肽的复合物。

【技术特征摘要】
1.一种普通小麦中维生素B1的提取方法，包括如下步骤：将普通小麦粉制成全麦粉，所述全麦粉在醋酸钠水溶液中进行酶解；所述酶解结束后的体系经过滤后滤液进行衍生化，加入正丁醇振荡后离心，取上清液，即得到维生素B1；所述酶解采用复合酶，所述复合酶为木瓜蛋白酶、酸性磷酸酶、α-淀粉酶和还原性谷胱甘肽的复合物。2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于：所述醋酸钠水溶液的摩尔浓度为0.05M；所述醋酸钠水溶液的pH值为4.50～4.52；所述全麦粉与所述醋酸钠水溶液的质量体积比为2.5～5g：25～50mL。3.根据权利要求1或2所述的提取方法，其特征在于：所述酶解的温度为36～38℃，时间为16～18h；所述全麦粉、所述木瓜蛋白酶、所述酸性磷酸酶与所述α-淀粉酶的质量比为2.5g：0.05～0.1g：0.01～0.02g：0.005～0.01g，所述全麦粉与所述还原性谷胱甘肽的用量比为2.5g：250～500μl。4.根据权利要求1-3中任一项所述的提取方法，其特征在于：所述衍生化采用的衍生化试剂为铁氰化钾水溶液与氢氧化钠水溶液的混合液；所述铁氰化钾水溶液的质量分数为1％；所述氢氧化钠水溶液的摩尔浓度为3.75M；所述铁氰化钾水溶液与所述氢氧化钠水溶液的体积比为1：24。5.根据权利要求4所述的提取方法，其特征在于：所述滤液、所述衍生化试剂与所述正丁醇的体积比为1：1～3...

【专利技术属性】
技术研发人员：张艳，李婕筠，何中虎，
申请(专利权)人：中国农业科学院作物科学研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11