一种检测溶菌酶的方法技术

本发明专利技术提供了一种检测溶菌酶的方法，包括以下步骤：将金属有机骨架溶液滴涂到金电极表面、孵育、洗涤、氮气吹干；再将溶菌酶适体溶液滴涂到金电极表面、孵育、洗涤、氮气吹干，进行第一电化学阻抗谱检测；洗涤第一次电化学阻抗谱检测后的金电极，氮气吹干，滴涂待测样品、孵育、洗涤、氮气吹干，进行第二电化学阻抗谱检测；待测样品电阻抗图谱中的电子转移电阻减去第一次电阻抗图谱中的电子转移电阻后得到的电子转移电阻差，与预定的标准曲线，得到溶菌酶的浓度。根据本发明专利技术的实施例可知，采用本发明专利技术的检测方法操作简单，不需要标记，且灵敏度较高，检测限可达2.0×10

Method for detecting lysozyme

The invention provides a method for detection of lysozyme, which comprises the following steps: metal organic framework solution onto the surface of the gold electrode, incubation, washing and drying with nitrogen; then lysozyme aptamer solution onto the surface of the gold electrode, incubation, washing and drying with nitrogen for the electrochemical impedance spectroscopy detection; washing the first electrochemical impedance spectroscopy of gold electrode, after detection of nitrogen dry coating sample, incubation, washing and drying with nitrogen, second electrochemical impedance spectroscopy detection; the sample impedance of the electron transfer resistance minus the first resistance of the electron transfer resistance obtained after electron transfer the resistance is poor, and the standard curve was predetermined, the concentration of lysozyme. According to the embodiment of the invention, the detection method of the invention has simple operation, no marking and high sensitivity, and the detection limit can be up to 2 * 10

【技术实现步骤摘要】
一种检测溶菌酶的方法
本专利技术属于生物化学分析
，尤其涉及一种检测溶菌酶的方法。
技术介绍
溶菌酶又称胞壁质酶或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶，是一种能水解致病菌中黏多糖的碱性酶，主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4糖苷键，使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽，导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。溶菌酶还可与带负电荷的病毒蛋白直接结合，与DNA、RNA、脱辅基蛋白形成复盐，使病毒失活。因此，该酶具有抗菌、消炎、抗病毒等作用。目前溶菌酶的检测方法有电致化学发光法，虽然电致化学发光灵敏度高，但是得到的可定量测定的线性范围较窄。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于针对现有技术的不足，而提供一种检测溶菌酶的方法，能够使得检测结果灵敏度高、线性范围宽。本专利技术提供了一种检测溶菌酶的方法，包括以下步骤：1)将金属有机骨架溶液滴涂到金电极表面，25～42℃孵育2～4h，水洗涤金电极表面，氮气吹干后，得到金属有机骨架修饰金电极；再将溶菌酶适体溶液滴涂到所述金属有机骨架修饰金电极表面，25～42℃孵育1～3h，再次水洗涤金电极表面，氮气吹干；以得到的溶酶体本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测溶菌酶的方法，包括以下步骤：1)将金属有机骨架溶液滴涂到金电极表面，25～42℃孵育2～4h，水洗涤金电极表面，氮气吹干后，得到金属有机骨架修饰金电极；再将溶菌酶适体溶液滴涂到所述金属有机骨架修饰金电极表面，25～42℃孵育1～3h，再次水洗涤金电极表面，氮气吹干；以得到的溶酶体适体‑金属有机骨架修饰金电极为工作电极，采用三电极系统进行第一电化学阻抗谱检测，得到基础电阻抗图谱；2)用水洗涤所述步骤1)第一电化学阻抗谱检测后的金电极，氮气吹干，滴涂待测样品，25～42℃孵育1～3h，再次水洗涤金电极表面，氮气吹干，进行第二电化学阻抗谱检测，得到待测样品电阻抗图谱；3)根据所述待测样品电阻...

【技术特征摘要】
1.一种检测溶菌酶的方法，包括以下步骤：1)将金属有机骨架溶液滴涂到金电极表面，25～42℃孵育2～4h，水洗涤金电极表面，氮气吹干后，得到金属有机骨架修饰金电极；再将溶菌酶适体溶液滴涂到所述金属有机骨架修饰金电极表面，25～42℃孵育1～3h，再次水洗涤金电极表面，氮气吹干；以得到的溶酶体适体-金属有机骨架修饰金电极为工作电极，采用三电极系统进行第一电化学阻抗谱检测，得到基础电阻抗图谱；2)用水洗涤所述步骤1)第一电化学阻抗谱检测后的金电极，氮气吹干，滴涂待测样品，25～42℃孵育1～3h，再次水洗涤金电极表面，氮气吹干，进行第二电化学阻抗谱检测，得到待测样品电阻抗图谱；3)根据所述待测样品电阻抗图谱中的电子转移电阻减去所述基础电阻抗图谱中的电子转移电阻后得到的电子转移电阻差，与预定的标准曲线，得到待测样品中溶菌酶的浓度，所述标准曲线为溶菌酶的浓度与电阻抗差值之间的线性曲线；所述金属有机骨架的结构如图3所示。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述金属有机骨架溶液中金属有机骨架的质量体积浓度为0.5～2.5mg/ml。3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述金属...

【专利技术属性】
技术研发人员：虞召朋，冯斌，时鹏飞，
申请(专利权)人：临沂大学，
类型：发明
国别省市：山东,37