一种检测谷胱甘肽的试剂及其合成方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种检测谷胱甘肽(GSH)的试剂和方法，所述试剂是香豆素衍生物:(Z)‑2‑(3‑chloro‑3‑(7‑(diethylamino)‑2‑oxo‑2H‑chromen‑3‑yl)allylidene)malononitrile，中文名字是(Z)‑2‑(3‑氯‑3‑(7‑(二乙胺基)‑2‑氧‑2氢‑色烯‑3‑基)亚烯丙基)丙二腈。检测方法是在pH为7.4的PBS缓冲溶液中通过荧光分光光度计定量地检测谷胱甘肽的含量。该检测方法，对GSH显示了高的灵敏度和选择性，检测过程简便、灵敏、快速，检测结果准确。

Reagent for detecting glutathione, synthetic method and application thereof

The invention provides a method for detection of glutathione (GSH) reagent and method, the reagent is coumarin derivatives (Z): 2 (3 chloro 3 (7 (diethylamino) 2 oxo 2H chromen 3 YL) allylidene) malononitrile (Z, Chinese name 2 (3) chloride 3 (7 (diethylamino) 2 oxygen 2 hydrogen chromen 3 base) sub allyl) two propylene nitrile. The method is to quantitatively detect glutathione content in a PBS buffer solution of 7.4 pH by fluorescence spectrophotometer. The detection method has high sensitivity and selectivity to GSH, and the detection process is simple, sensitive and fast, and the detection result is accurate.

【技术实现步骤摘要】
一种检测谷胱甘肽的试剂及其合成方法和应用
本专利技术涉及谷胱甘肽检测技术，具体涉及一种检测谷胱甘肽的试剂及其合成方法，以及这种试剂在检测谷胱甘肽中的应用。
技术介绍
谷胱甘肽(GSH)在人的生理活动中起着重要作用，是细胞内最多的非蛋白巯基化合物，它在维持细胞生理功能中起着重要作用，其中包括细胞内的氧化还原反应，异物代谢，信号传导与基因调控等。谷胱甘肽在细胞内的浓度为1-10mM，它分为还原型谷胱甘肽和氧化型谷胱甘肽两种类型，它们之间存在着氧化还原平衡。其中还原型谷胱甘肽在细胞的生长、维持细胞正常功能的氧化还原平衡上起着关键作用；此外，人体中还原型谷胱甘肽浓度异常还与癌症、阿尔茨海默氏症和心血管等疾病相关。鉴于生物硫醇在生理活动中重要意义及其浓度与各类疾病的密切关系，所以针对小分子生物硫醇检测的研究引起了科学家们的高度关注及浓厚兴趣。目前，大部分荧光探针可以实现三种生物硫醇Cys/Hcy/GSH对其他22种氨基酸的区分检测，但是特异性检测GSH的试剂还比较少。因此研究开发一种可以在细胞浓度水平上检测GSH的试剂显得尤为重要。在本专利技术中，合成了一种基于香豆素的化合物，通过GSH和化合本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测谷胱甘肽的试剂：特征在于结构式为：

【技术特征摘要】
1.一种检测谷胱甘肽的试剂：特征在于结构式为：2.如权利要求1所述的一种检测谷胱甘肽试剂的合成方法，其特征在于，步骤为：冰浴下，DMF溶液中缓慢滴加等体积量的三氯氧磷，搅拌半小时，加入溶解在DMF中的3-(二乙胺基)苯酚，75℃回流4-6h；反应完成后，把反应液倒入冰水中，并用Na2CO3水溶液调节pH至中性，棕色固体析出，抽滤，水洗，最后用乙醇重结晶得到4-(二乙胺基)-2-间羟基苯甲醛；将摩尔比为1:1.5的4-(二乙胺基)-2-间羟基苯甲醛和乙酰乙酸乙酯，加入1-2滴哌啶做催化剂，在乙醇中充分溶解后回流10-12h，浓缩、冷却后减压蒸馏得到黄色固体即为3-乙酰基-7-(二乙胺基)-2氢-色烯-2-酮；冰浴下，DMF溶液中缓慢滴加等体积的三氯氧磷，搅拌，当溶液颜色变成橘红色，加入充分溶解在DMF中的3-乙酰基-7-(二乙胺基)-2氢-色烯-2-酮，继续搅拌3-4h，然后在75℃回流6-8h；冷却至室温后将体系倒入适当量的冰水中，并用Na2CO3水溶液调节pH至中性，抽滤，有砖红色固体析出，然后以二氯甲烷洗脱剂经柱层析分离得到(Z)-3-氯-(7-(二乙胺基)-2-氧-2-氢-色烯-3-基)丙烯醛；将摩尔比为1:1.5:1的(Z)-3-氯-(7-(二乙胺基)-2-氧-2-氢-色烯-3-基)丙烯醛、丙二腈及催化剂1,4-二氮杂二环[2,2,2]辛烷溶于乙醇中，回流14-16小时；混合体系减压蒸馏，以二氯甲烷为洗脱剂柱层析分离得到紫红色目标试剂(Z)-2-(3-氯-3-(7-(二乙胺基)-2-氧-2氢-色烯-3-基)亚烯丙基)丙二腈。3.如权利要求1所述的试剂在谷胱甘肽检测中的应用。4.一种检测谷胱甘肽的方法：其特征在于，步骤为：(1)、...

【专利技术属性】
技术研发人员：阴彩霞，李晓琪，霍方俊，
申请(专利权)人：山西大学，
类型：发明
国别省市：山西,14