一种检测miRNAs‑21的方法、探针组及试剂盒技术

本发明专利技术属于分子生物学领域，具体公开了一种检测miRNAs‑21的方法、探针组及试剂盒。本发明专利技术所述检测miRNAs‑21的方法中修饰金纳米棒的单链DNA与修饰聚二乙炔微米管的单链DNA通过杂交配对形成金纳米棒修饰的聚二乙炔微米管，使聚二乙炔微米管端头光波导荧光淬灭，与H1探针、H2探针和待测样品混合后，miRNA‑21可催化发夹探针自组装，形成双链结构，通过toehold进行单链取代，从而使聚二乙炔微米管端头光波导荧光恢复，根据荧光变化强度可检测待测样品中的miRNAs‑21的含量。实验表明本发明专利技术所述检测方法，对miRNA‑21显示了高的灵敏性和选择性，检测过程简便、灵敏、快速，检测结果准确。

A method for detection of miRNAs 21 probe sets and kit

The invention belongs to the field of molecular biology, specifically discloses a method for detection of miRNAs 21 probe sets and kit. Single stranded DNA and modification of the detection method of miRNAs 21 modified gold nanorods poly acetylene two micron tube single stranded DNA by hybridization pairing of gold nanorods modified poly acetylene two micron tube, poly two micron acetylene tube end waveguide fluorescence quenching, and H1 probe, H2 probe and sample mixing after the test, miRNA 21 can catalyze the hairpin probe self-assembly to form double stranded structure through toehold single chain substitution, so that the two micron tube end poly acetylene optical waveguide fluorescence recovery, according to the change of fluorescence intensity can be detected in a sample of 21 of the content of miRNAs. Experiments show that the detection method of miRNA 21 shows high sensitivity and selectivity of the detection process is simple, sensitive, rapid and accurate detection results.

【技术实现步骤摘要】
一种检测miRNAs-21的方法、探针组及试剂盒
本专利技术涉及分子生物学领域，具体涉及一种检测miRNAs-21的方法、探针组及试剂盒。
技术介绍
MicroRNAs(miRNAs)是一类由18-24个碱基组成的非编码单链小分子RNA，在转录后水平对基因表达发挥负调控作用，参与细胞生长、发育、凋亡等重要生物过程。最近的一些医学研究表明，miRNA的表达水平，或增大或减少，都在某种程度上与人类重大疾病如癌症等有着密不可分的联系。这使得miRNA可以作为肿瘤标记物来早期地监控癌症的发生。miRNA-21的编码基因定位于17q23.2，即液泡膜蛋白基因(vacuolemembraneprotein-1，VMP1)编码区，VMP1基因的第十内含子。VMP1也被称为跨膜蛋白49(transmembraneprotein-49,TMEM-49)。miRNA-21对多种癌症都有高表达，如：胰腺癌、胃癌、肝癌、乳腺癌等等。因此miRNA-21是一个公认的致癌性小RNA，对miRNA-21进行定量检测可以有效的监控癌症的发生。目前发展出了许多检测miRNA的方法，比如Northern印迹技术、微阵列本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测miRNAs‑21的方法，其特征在于，将金纳米棒修饰的聚二乙炔微米管与H1探针、H2探针和待测样品混合，检测金纳米棒修饰的聚二乙炔微米管端头光波导荧光亮度的变化；其中所述金纳米棒和聚二乙炔微米管分别经单链DNA修饰，且修饰金纳米棒的单链DNA与修饰聚二乙炔微米管的单链DNA碱基互补；H1探针与H2探针均为发夹探针，在miRNAs‑21存在下可自组装形成双链结构，然后通过toehold与修饰金纳米棒的单链DNA发生链置换反应。

【技术特征摘要】
1.一种检测miRNAs-21的方法，其特征在于，将金纳米棒修饰的聚二乙炔微米管与H1探针、H2探针和待测样品混合，检测金纳米棒修饰的聚二乙炔微米管端头光波导荧光亮度的变化；其中所述金纳米棒和聚二乙炔微米管分别经单链DNA修饰，且修饰金纳米棒的单链DNA与修饰聚二乙炔微米管的单链DNA碱基互补；H1探针与H2探针均为发夹探针，在miRNAs-21存在下可自组装形成双链结构，然后通过toehold与修饰金纳米棒的单链DNA发生链置换反应。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述修饰金纳米棒的单链DNA的序列如SEQIDNO：1所示；所述修饰聚二乙炔微米管的单链DNA的序列如SEQIDNO：2所示。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述H1探针的序列如SEQIDNO：3所示；所述H2探针的序列如SEQIDNO：4所示。4.根据权利要求1-3任意一项所述的方法，其特征在于，所述金纳米棒修饰的聚二乙炔微米管固定在疏水片上；所述待测样品为血清。5.一种检测miRNAs-21的探针组，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹纲，王梦乔，
申请(专利权)人：中国科学技术大学，
类型：发明
国别省市：安徽,34